子宫内膜癌中vegf

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1、子宫内膜癌中VEGF【关键词】血管内皮生长因子C；血管内皮生长因子受体；淋巴转移；子宫内膜肿瘤【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheexpressionofvascularendothelialgroetrialadenocarcinomatissueinpursuitoftheirroleintumormetastasisandotherclinicalsignificance.Methods48freshendometrialadenocarcinomatissueinedbyRTPCRtodetectt

2、heVEGFC/KDR/Flt4mRNAexpression.ResultsThereRNAexpressionbetorandthenormalcontrols.AndthereRNA,KDRmRNAorflt4mRNAexpressionaofcervix.Buttheexpressionorpathology,lymphnodemetastasis,tumorsizeandtheinvasionofdeepmuscularlayer(P<005).ConclusionTheresultssuggestthattheVEGFCma

3、yplayanimportantroleinthelymphnodemetastasisanditcouldbeausefulbiologicalmarkertoforeseethelymphnodemetastasisandprognosisforcervicalcancer.【Keyphaticmetastasis，cervicalneoplasm子宫内膜癌是严重威胁妇女生命的第三大恶性肿瘤，发病率呈升高和低龄化趋势。目前子宫内膜癌的发病原因及机制尚未完全阐明，诊断治疗上还有许多问题没有解决。其发生远处转移是造成子宫内膜癌治疗困难的原因

4、之一，多数学者认为淋巴结转移对子宫内膜癌的预后至关重要，是判断患者预后和确定治疗方案的重要依据。目前的仪器检查很难较早发现淋巴结转移，淋巴结转移是子宫内膜癌治疗的难点之一，而对其淋巴道转移机制的深入研究将有助于新的有效的治疗手段的发展。由于缺乏明确的淋巴管生成因子和标记因子，对淋巴转移的研究进展缓慢。血管内皮生长因子C(vascularendothelialgroRNA在子宫内膜癌组织中的表达，并探讨其在肿瘤转移中的作用。1资料与方法1.1研究对象48例子宫内膜癌组织和36例正常子宫内膜组织均来自2003年1月-2004年12月我院妇科手术

5、切除标本，均经病理证实。患者年龄32~71岁，中位年龄52.2岁。按FIGO标准分期，Ⅰb2期15例，Ⅱa期20例，Ⅱb期13例；按G）引物均委托上海生工公司合成，VEGFC、KDR所用引物序列参照了以前研究者的设计［2］。根据VEGFC及KDR引物Tm值，DNAstar软件设计了Flt4的引物序列（见表1）。表1引物序列引物序列Tm值片段163根据QIAGENOneStepRTPCRKit的说明，在同一反应体系中同时扩增β2MG、VEGFC、KDR及Flt4的4对引物，为去除多重PCR反应中的扩增竞争，较为准确地获得不同靶基因的扩增结果，

6、体系中使用QIAGENOneStepRTPCRKit试剂盒提供的Q溶液。根据紫外分光光度仪检测的OD值计算RNA样品浓度，将RNA样品稀释，以保证RTPCR体系中RNA模板加样4μl时，所加的模板含量基本一致，即首先做到模板定量。具体PCR循环参数为：变性94℃60s，退火52℃60s，延伸72℃90s，共35个循环。最后延伸72℃10min以获得更多的扩增产物。1.3.3扩增产物半定量分析：PCR反应扩增产物4μl加4μl载样缓冲液加15μl溴酚兰，以05×TBE为电泳缓冲液，在2%琼脂糖凝胶上80V恒压电泳40min。将电泳结果用凝胶成

7、像仪扫描记录并借助凝胶图像分析系统（BioCapTV.10）测定灰度。以VEGFC、KDR、flt4和βactin条带灰度值之比作为相对光密度。13.4统计学处理：用SSPS统计软件（11.0版本）进行，所用的统计学方法为卡方检验，P＜005认为有统计学意义。2结果2.1VEGFC及其受体mRNA在肿瘤组织（T）及正常子宫内膜组织（N）中的表达VEGFC阳性者可见320bp条带，flt4阳性者可见402bp条带，KDR阳性者可见555bp条带(见图1)。各项指标在肿瘤组织中的表达率均明显高于正常子宫内膜组织，其具体表达率见表2。图1子宫内膜

8、癌组织中VEGFC及其受体KDR、Flt4mRNA的表达。表2VEGFC及其受体mRNA在不同组织中的表达3讨论　子宫内膜癌的临床特点是局部蔓延，肿瘤细胞主要通过淋巴途径转移，沿