pcr技术在食品微生物检测中的应用价值

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1、PCR技术在食品微生物检测中的应用价值杨丹郎慧柯河南华测检测技术有限公司摘要：食品检测技术随着人类的进步和发展不断更新换代，而如何保障食品安全更是关系着国计民生的大事，目前受到了政府和越来越多民众的重视。微生物检测技术作为保证食品安全的一项重耍手段，需耍综合考虑快速性、精准性、经济性和可操作性等诸多因素。木文首先分析了PCR技术在食品微生物检测中的优势，然后分析了在食品检测中的应用，最后探讨了食品微生物检测中的三种PCR技术，力求为今后的工作提供一定的技术支撑。关键词：PCR技术;食品微半.物检测;应用价值;1PCR技术在食品微生物检测中的

2、优势1.1方便性传统检测方法往往自动化程度不高，而且操作比较繁琐，需要消耗大量的劳动力。因为不同微生物的生长需要的pH、温度、营养物质不同，需要消耗大量的人力和时间观察菌落特征、细胞特征、革兰氏染色情况，鉴定生理生化特性。由此可见，传统检测方法已经逐渐无法满足时代的需要，并II阻碍了现代化食品企业的发展，而PCR技术可以实现对食品屮微生物的快速检测，并且操作简单，只需要一人即可完成，具有极大的方便性。1.2快捷性传统微生物检测方法的最大弊端是耗时较长，一般菌种的检测需要2飞天，甚至有的需要7天以上，因为检测过程相对于实际生产有明显的滞后性，

3、所以检测结果出来时往往产品已经流向市场，这就失去丫检测食品微生物的意义。而采用PCR技术检测食品中的微生物，一天内就能得出结果，这样可以对工业生产起到良好的指导作用［1］。1.3准确性因为食品中微生物的种类繁多，而且同一种微生物的检测方法也不尽和同，要想将每一种微生物都分辨出来比较网难，尤其是对于弱势菌，釆用传统的方法很难检测出，而采用PCR技术就可以冇效解决这些问题，因为PCR技术可以准确识别微生物。1PCR技术在食品检测中的应用PCR技术起源于20世纪90年代，最早用于基因克隆和转基因检测，因为其具有精准和微量的优势。近年来得到了快速的

4、发展，而且随着食品微生物遗传背景被探明，PCR技术被引入到食品安全保障领域，在食品微生物的检测领域得到了广泛的应用，其具体应用在以下几个方而。（1）食源性致病菌的检测。早在1992年，就有关于利用PCK技术检测病原菌的报道，而其真正应用于食品微生物的检测中，却是在近儿年才得到快速的发展，经过几年的发展，利用传统的PCR技术可以实现对单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、致病性大肠埃希氏菌、大肠埃希氏菌0157等项目的检测。（2）食品屮成分种类的检测。为Y充分预防某种特定动物疾病，比如疯牛病等，需要鉴定食品中的动物成分，而PCR技

5、术因为其简单、快速、准确等优势被大规模应用于鉴定工作中。（3）食品中有效成分的检测。在人们生活水平不断提高的背景下，不但要求食品质量要过关，而且还需要明确食品中的营养成分，特别是对于深加工食品，往往经过多道工序后，原材料己经彻底变为其他物质，而通过感官等传统手段已经无法评判食品的质量，而消费者只能从产品的说明中得到产品的相关信息，这样就给一些不法分子可乘之机，会出现以次充好的状况，而将PCR技术引入食品尤其是深加工食品的检测中，可以准确检测其有效成分，给产品提供充分的数据支持。（4）转基因食品的鉴定。PCR检测技术被广泛应用于转基因食品的鉴

6、定中，既可以实现定性分析，又可以实现定量分析，目前为止，PCR技术可以实现对大豆、玉米、番茄等多种转基因作物的检测，但是传统的PCR技术也存在一定的弊端，比如，在有死细菌存在的情况下容易产生假阳性、不能检测产毒素微生物产生的毒素等。2PCR技术在食品微生物检测中的应用3.1常规PCR检测对于常规的检测工作而言，其原理比较简单。其主要是在DNA模板和相应引物的混合物中加入适量的聚合酶，然后经过催化后完成对DNA片段的扩增。这个过程主要是通过DNA模板实现，并且经历多个不同的周期。各个周期都会产生DNA片段，并可继续作为模板进行循环，这样反应的

7、产物就不断增加，早在20年前,就采用传统的PCR检测技术实现丫对沙门氏菌的检测。现阶段，利用PCR检测技术可以实现对多种菌类的检测，其检出率高达99%以上，并且得到了大规模的推广。3.2多重PCR检测该检测方法与常规检测方法具有一定的和似性，唯一的不同就是在反应体系中加入了更多的引物。若是在混合物中存在互补关系的引物，则在反应管中增设不同的DNA片段，这种检测方式既保留了常规PCR检测方式的优势，在保证检测质量的棊础上，可以显著减少检测步骤。此外，采取多重PCR检测方法，还可以实现对多个基因的检测。但是这种检测方式也存在着一些缺点，需要止视

8、这些问题,并采取有效的措施来改进和提高。3.3RT-PCR检测RT-PCR技术其全称为逆转录聚合酶链反应，其主要是提取细胞的RNA,并以此为模板实现对CDNA的获取，然后再以CD