睾丸固定术对隐睾大鼠生殖细胞凋亡与enos表达的影响

《睾丸固定术对隐睾大鼠生殖细胞凋亡与enos表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、睾丸固定术对隐睾大鼠生殖细胞凋亡与eNOS表达的影响【关键词】隐睾症睾丸固定术eNOS基因Abstract：ObjectiveThisthesisaimstoexploretheeffectoforchidopexyongermcelldevelopmentandapoptosisinratmodel.MethodsThirtymaleSDrats(22-dayold)lydividedintothreegroups:left-sham-operatedgroup(n=10)，cryptorchidgroup(n=10)，orchidopexygroup(n=10

2、).Ratsedonasubsetoftheserats.Fortydaysaftertheinitialprocedure,testesmunohistochemicalstudies.Apoptosisonoclonalantibody.ResultsThenumberofapoptoticgermcellincryptorchidtestesincreasedobservablypared-operatedgroup(P<0.01),andthenumberofapoptoticgermcellinorchidopexidtestesdecreased

3、observablyparedincreasesgermcellapoptosis,andorchidopexycanlocellapoptosis.eNOSexpressioniscloselyrelatedtogermcelldegeneration.Key;orchidopexy;eNOS;gene隐睾是男性不育症的重要原因之一。睾丸局部温度升高可导致生精细胞过度凋亡并成为不育的主要原因。隐睾睾丸生精上皮各类细胞(包括各级生精细胞、支持细胞、间质细胞)中以生精细胞对温度最为敏感［1］，而激素、温度等都是生精细胞凋亡的重要调节因素，但是这些细胞外的调节因素，必

4、须激活生精细胞内部某些基因的转录，表达才能诱导细胞凋亡［2］。本实验旨在研究大鼠隐睾固定对生殖细胞发育和凋亡的影响，并探讨eNOS基因表达与生殖细胞发育和凋亡的关系。1材料与方法1.1实验动物和分组SD雄性大鼠（22日龄）30只随机分为3组：正常对照组10例、隐睾组10例、隐睾固定组10例，由辽宁医学院实验动物中心提供。1.2动物模型建立隐睾组：水合氯醛麻醉，下腹正中切口，切断左侧睾丸引带，用7～0无创伤线将睾丸固定于后腹壁上。对照组：方法同上（但不切断睾丸引带）将睾丸处理后立即将睾丸还至阴囊。隐睾固定组：隐睾模型术后14d，下腹正中切口和阴囊横行切口将睾丸游离后

5、还至阴囊，用7～0无创伤线将睾丸固定于阴囊肉膜上。在第一次手术后第40d用快速脱颈椎法处死所有模型动物，留取双侧睾丸标本，用电子天平称重。）1.4免疫组化SABC法检测eNOS基因表达，eNOS多抗和免疫组化SABC试剂盒购自武汉博士德生物技术公司，阴性对照组用PBS液代替一抗，阳性细胞胞浆呈棕黄色。1.5统计学方法数据以±s表示，用SPSS13.0分析软件进行方差分析及两两比较分析。2结果2.1睾丸的重量的变化见表1。假手术组和对侧睾丸的平均重量无明显差别。与假手术组相比，隐睾组隐睾侧睾丸的重量显著减轻。隐睾固定组睾丸的平均重量较隐睾组显著增加(P﹤0.01)。

6、2.2生殖细胞凋亡的影响与假手术组相比，隐睾组睾丸生殖细胞凋亡明显增加(P﹤0.01)。与隐睾组相比，隐睾固定组生殖细胞凋亡明显减少(P﹤0.01)，但仍略高于假手术组(P﹥0.05)。2.3eNOS在睾丸生殖细胞中的表达在睾丸生精上皮的各级生精细胞、支持细胞和间质细胞胞浆中均存在eNOS基因的弱表达，免疫染色呈淡黄色;在隐睾组睾丸退化的生精细胞胞浆中eNOS基因表达明显增强，免疫染色呈深棕黄色。表1左侧睾丸重量及TUNEL计数例数重量