氯化镍对家兔离体窦房结自律细胞的影响

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1、氯化镍对家兔离体窦房结自律细胞的影响沈建昕陈丽娜张三明张晓云【摘要】目的：探讨氯化镍对家兔窦房结自律细胞的影响。方法：利用细胞内微电极记录技术，观察20例家兔窦房结细胞动作电位以及氯化镍对窦房结细胞动作电位产生的影响。结果：用180μmol/LNiCl2灌流后窦房结自律细胞的VDD、APA、Vmax、RPF均明显下降（P＜0.01），APD、APD90显著延长，MDP、APD50均无明显改变（P＞0.05）。结论：氯化镍对窦房结自律细胞的动作电位0相和4相去极离子流有明显的抑制作用。【关键词】氯化镍；窦房结；电生理TheInfluenceofNiCl2onSpontaneousCe

2、llsofIsolatedSinoatrialNodeofRabbitnode.Methods:Thecharacteristicsofintracellularactionpotentialsinoartialnodeof20rabbitsircoelectrodetechnique,andalsothatofsinoartialnodeperfusedol/LNiCl2ax、RPFobviouslydecreased（P＜0.01）andtheAPD、APD90akercellsofsinoartialnode.Conclusion:ItappearsthatNiCl2hasn

3、otablyinhibitiveactionontheionbeamtakenplaceinthedepolarizationofphase0andphase4ofpacemakercellsinsinoartialnode.【KEYAP2程序显示、采样、存储动作电位并进行分析其各项参数指标。如不能直接记录到自发电位，则需要进行电刺激，将刺激电极置于标本远离瓣膜一端的心肌组织上，给一波宽2ms、频率1Hz，二倍于阈强度的方波刺激，刺激时间由数秒至数分不等，直至诱发出稳定的自发节律，停止电刺激，待自发节律稳定后开始实验。1.4窦房结律细胞动作电位参数分析放大后的窦房结自律细胞动作电位

4、信号输入微机A/D转换器，采集动作电位波形，利用心肌细胞跨膜动作电位自动分析软件MAP2分析，测算窦房结细胞（SANC）动作电位的各项参数：最大舒张电位（MDP）、动作电位幅值（APA）、最大除极速率（Vmax）、舒张期除极速率（VDD）、自发放电频率（RPF）、动作电位时程（APD）、复极50%和90%时间（APD50和APD90）。1.5统计学处理应用Excel统计工具进行动作电位的各观察数据均用x±s表示，给因素前后各项指标采用自身配对t检验，检验水准设为0.05；表格绘制使用ol/L）对家兔窦房结起搏细胞动作电位的影响注：#P＜0.05，＊P＜0.012结果氯化镍对窦房结自

5、律细胞动作电位的影响给予NiCl21min后，APA、Vmax、VDD下降，APD、APD90开始延长，自发节律不稳，出现逸搏，RPF显著减慢（P＜0.01）；6min时，上述指标变化幅值开始减小。MDP、APD50与正常对照相比无明显差异（P＞0.05）。冲洗30min，上述效应可部分恢复（见表1）。3讨论研究表明：在豚鼠心肌细胞上存在有两种Ca2+通道，它具有不同的药物敏感性，L型（IcaL）的生理作用更为显著，它主要与动作电位的幅度有关；T型（IcaT）可能与自律细胞的自发活动及一些异常冲动的产生有一定关系〔1，2〕。实验表明，用NiCl2灌流后，显著降低窦房结自律细胞动

6、作电位的幅度（APA）、0相最大上升速率（Vmax）、舒张期除极速率（VDD）和自发放电频率（RPF），其作用机制与Ca2+内流抑制有关。有实验证实〔3〕，Ni2+阻断T型Ca2+通道后，会出现RPF降低，APA减小，电位有时在静息电位出现停止。在给予180μmol/L浓度的NiCl2时，会出现明显的后超极化电位和后去极化电位，与我们的实验结果相符合。最新实验表明，低电压激活的IcaT可触发肌膜下Ca2+的释放，后者又刺激Na+-Ca2+的交换，从而使起搏电位去极到阈电位水平，这一机制说明在正常的心脏起搏活动中，IcaT和肌膜下细胞内Ca2+的释放起着很重要的作用〔4〕。Lei

7、ve〔5〕认为Na+的进入通过提高细胞内Na+的浓度进一步激活反式Na+—Ca2+交换，使Ca2+内流而引起Ca2+释放。本实验APD、APD90明显延长，似对复极过程有抑制作用，这可能是由于在Ni2+的存在下，心肌细胞膜对K+通透性有不同程度的提高，还有可能是Ni2+抑制了细胞膜的钠泵活动〔6〕。现已明确，心肌细胞Ca2+通道至少包括L型和T型两种钙离子流成分，哺乳动物的窦房结细胞的VDD是由T型Ca2+离子流和逐渐衰减的K+外向离子流构成的〔7，8〕【