家兔离体颈动脉窦压力感受器放

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1、关于氨基甙类抗生素对家兔离体颈动脉窦压力感受器放电的抑制作用的问题刘东霞*；钮伟真**；沈靖首都医科大学心血管研究室；北京100054关键词：压力感受器；氨基甙类抗生素；钙；L-型钙通道阻断剂摘要：实验用自制的压力感受器标本灌流-记录一体化装置,研究氨基甙类抗生素、胞外钙离子浓度变化和L-型钙通道拮抗剂对家兔离体颈动脉窦压力感受器活动(CS-BRA)的影响。研究中发现,(1)链霉素(0.25~0.75mmol/L)和庆大霉素(0.43~1.29mmol/L)浓度依赖性地抑制CS-BRA,停药后可基本恢复;(2)高钙灌流液(3.3mmol/L)抑制CS-BRA,而微量钙灌流液(10-

2、5mol/L数量级)兴奋CS-BRA;(3)维拉帕米和地尔硫　在选择性阻断L-型钙通道的有效浓度范围内(<10-7mol/L)对CS-BRA没有显著影响,在更高浓度(>10-6mol/L)时,则抑制CS-BRA。结果表明:(1)氨基甙类抗生素特异性地抑制CS-BRA,是一种新的研究压力感受器活动的工具药;(2)钙离子不是形成压力感受器发生器电位的主要离子,而且L-型钙通道在CS-BRA中没有显著作用;(3)氨基甙类抗生素对CS-BRA的抑制作用可能不是通过阻断L-型钙通道实现的。动脉压力感受器(BR)是分布于主动脉弓和颈动脉窦血管壁上的感觉神经末梢,其结构细微分散[1],难于从通道

3、水平研究。许多学者认为,BR的换能过程是通过某种机械敏感离子通道(MSIC)实现的[2~4]。MSIC存在于许多组织中,如耳蜗毛细胞、心室肌细胞等。研究表明,氨基甙类抗生素可阻断MSIC,其机制可能与阻断牵张引起的Ca2+内流有关[5,6]。另外,有人报道氨基甙类抗生素可抑制L-2期刘东霞等:氨基甙类抗生素对家兔离体颈动脉窦压力感受器放电的抑制作用生理学报ActaPhysiol.Sin.53卷型Ca2+通道[7]。最近,尹彤[8]等报道链霉素对大鼠压力感受性反射有抑制作用,然而,有关氨基甙类抗生素对BR机械-电转导过程的直接作用,尚未见报道。为进一步研究BR的机械-电转导机制,本实

4、验在家兔离体颈动脉窦-窦神经(CS-CSN)标本上,研究了氨基甙类抗生素对压力感受器活动(BRA)的影响,并探讨其换能过程与钙离子的关系。成年家兔40只(体重1.9~2.7kg,雌雄不拘)经静脉麻醉(1%戊巴比妥钠,40mg/kg体重)、暴露颈动脉窦区、静脉注射肝素(500U/kg体重)抗凝等步骤后,游离CS-CSN标本[9]。研究采用自制的CS-CSN标本灌流-记录一体化装置[9],该装置设有灌流槽和记录槽。CS-CSN标本的血管部分置于灌流槽内,窦神经的游离部分经两槽间隔板上的小孔穿出,搭在位于记录槽的不锈钢丝记录电极上。记录槽内充石蜡油。无关电极置于灌流槽底。灌流液经两条途径

5、对标本分别进行窦内和窦外灌流[9]。一路对标本表面(窦外)以1ml/min匀速灌流;另一路则经蠕动泵对窦内(血管内)进行脉动式灌流,该路灌流压由灌流液出口处的调节阀控制并由连于入口处的压力换能器监测。窦内灌流压搏动频率(取决于蠕动泵转速)为108次/min,搏动幅度控制在13.2~18/8~12kPa。对每个标本在用药前后保持灌流压在相同搏动范围内。灌流液温度控制在36~37℃。窦神经放电活动通过单极记录法引导[9],信号经前级(JB-101J,NihonKonden)及后级放大滤波(FZG-81,上海嘉龙教学仪器厂),电压总增益为20?000倍,频带0.16~10kHz。放大后的

6、信号分三路:(1)输入示波器,显示原始信号;(2)输入生物信号处理系统(SMUP-A型,上海医科大学),对超过某一指定幅值的放电自动进行频率直方图处理;(3)输入磁带记录仪(DX-900型,TOSHIBACORPORATION)。颈动脉窦窦内压信号经二道生理记录仪(LMS-2B型,成都仪器厂)放大及描记压力曲线,并与窦神经放电信号同步记录于磁带记录仪。磁带信号可回放输入另一信号采集分析系统(Axoscope,AxonInstruments)进一步分析。将窦神经分至细束,可分别记录到单纤维、少纤维和多纤维放电。具有单一形状和幅值动作电_坏姆诺缥　ハ宋　诺?single-fiberdi

7、scharge);如放电中包含有2~5个不同形状的动作电位称为少纤维放电(few-fiberdischarge);放电记录中不同形状及幅度的动作电位超过五个,则视为多纤维放电(multi-fiberdischarge)。对单纤维和少纤维放电,通过观察放电与窦内压搏动的一致关系,可判定放电的性质;对于多纤维放电,除确定放电与窦内压的关系外,还观察标本对纯氮平衡的灌流液灌流10min或对氰化钠(125μg)窦内注射的反应,以排除化学感受纤维放电的参与。灌流液成分为:(1)