微柱凝胶技术在新生儿血型鉴定的应用

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1、微柱凝胶技术在新生儿血型鉴定的应用黄寿坤(广丙壮族自治区柳州市第四人民医院检验科广丙柳州545002)【摘要】目的新生儿出生后其红细胞抗原弱，2-4岁后成熟，其抗原表达才完全。6个月前，自身没有其相应的血型抗体产生，反定型没有明确的临床意义。大量的有关新生儿血型正反定研究的结果不一致也证明了新生儿反定结果没有明确的临床意义。常规新生儿血型鉴定采用玻片法和试管法经常漏检A或者B型。为了研究新生儿和6个月内幼儿ABO、RhD血型正确鉴定方法和影响因素,釆用试管法和新生儿微柱凝胶ABO、RhD血型检测卡

2、对我院出生婴儿和住院3个月的1500例新生儿进行血型鉴定对比。试管法为85.3%。新生儿微柱凝胶ABO全部正确，二法RhD结果一致。新生儿微柱凝胶ABO、RhD血型检测明显优于试管法，在新生儿ABO,RhD血型检测应推广使用。【关键词】婴儿新生儿新生儿微柱凝胶ABO、RhD血型检测试管法【中图分类号】R319【文献标识码】B【文章编号】2095-1752(2012)16-0277-02传统的新牛.儿血型鉴定方法是采用玻片法和试管法，因新生儿红细胞抗原弱，2-4岁后成熟[1],该方法对新生儿血型鉴定

3、敏感性差，不能正确鉴定新生儿血型。同时操作难以规范化、也受气候影响，气温在15度以下时红细胞冷凝聚常常影响血型鉴定结果。新生儿和6个月前幼儿其6个月之内由于血浆中ABO抗体活性太弱并且含有来自母体的抗体，免疫反应相对较弱，尤其是出生3〜4个月时的生理性低γ球蛋白血症，使IgG水平相当于成人的35%左右，1〜2岁时IgG水平也仅相当于成人的60%,直到13岁以后才基木达到成人水平，故血型反定型就没有明确的临床意义，所以新生儿血型只能由检测红细胞抗原正定型来检定其ABO血型。目前有大量文章

4、报道使用微柱凝胶方法对新生儿血型鉴定报道，但都使用的是成人血型正反定卡进行研究。新生儿微柱凝胶ABO、RhD血型检测卡因其卡不同于成人血型卡，在卡中第四管有高效价抗AB抗体，这样就防止了因为新生儿血型抗原弱而漏检血型。而现就采用新生儿微柱凝胶法鉴定新生儿和6个月内幼儿ABO及Rh(D)血型的结果进行分析，结果报告如下。1材料与方法1.1长春博迅生物技术有限公司提供卡式离心机TD-3A，新生儿微柱凝胶ABO、RhD血型检测卡(批号20100812)。抗A抗B血型定型试剂由上海血液中心提供(批号:20

5、100708)。1.2检测对象我院在2010年9月-2010年11月出生的婴儿和6个月内住院的幼儿。新生儿出生后，由产科抽脐带血2ml，采用EDTA抗凝送检。住院幼儿采静脉2mlEDTA抗凝或者末梢血20ul加入1ml红细胞稀释液中配制为1%红细胞悬液。脐带血和静脉血取10ul压积红细胞加入1ml红细胞稀释液中，制作1%红细胞悬液。为新生儿微柱凝胶ABO、RhD血型检测做准备。试管法将只能用脐带血和静脉血，EDTA抗凝，制作50ul压积红细胞加入1ml红细胞稀释液中制作成5%红细胞悬液，为试管法准

6、备。1.3检测方法1.3.1试管法ABO及Rh(D)定型取三只玻璃试管，分别标记好ABD管在每管中加受检者5%红细胞悬液20μl,分别在三只试管中加入抗-A,抗-B,抗-D血清各100μl:混匀，3200r/min离心15sec，品微镜观察结果，镜下凝集者应判为阳性。1.3.2微柱凝胶法ABO及Rh(D)定型微柱凝胶法卡式离心机和新生儿微柱凝胶ABO、RhD血型检测卡由长春博迅生物技术冇限公司提供，新生儿微柱凝胶ABO、RhD血型检测卡在使用前卡式离心机离心2-3分钟，以防运输过程中导

7、致的凝胶界面不整齐，影响检测结果。操作按照其操作说明书操作，在新生儿微柱凝胶ABO、RhD血型检测卡中，第一管A中含IgM抗A，第二管中含IgM抗B,第三管中含IgM抗AB,第四管中含IgM抗D,第五管为质控管，第六孔中含抗IgG抗体和C3D抗体。标记好患儿的姓名，在6管中分别加入1%红细胞悬液后，放置于微柱凝胶法卡式离心机中离心5分钟判读结果。离心速度和吋间均按厂商推荐标准执行。2结果300例婴儿和幼儿检测ABO血型，试管法44例漏检为O型44/300,符合率85.3%新生儿微柱凝胶ABO、Rh

8、D血型检测全部正确。试管法结果为“镜下散在凝集(mf)”者在微柱凝胶法显示出较强的凝集。300例脐血Rh(D)定型两方法相同。3讨论婴幼儿的ABO血型抗原较成人弱，只约有成人的1/4，其抗原2-4岁才能达到正常人水平[2]，其ABO抗原弱的原因并非缺少糖苷转移酶，而是由于红细胞上酶的底物少。婴幼儿可以从母亲获得IgGABO抗体吋，但IgMABO抗体却在出生3〜6个月后才合成。6个月内的新生儿反定就没有明确的临床意义。新生儿微柱凝胶ABO、RhD血型检测卡中质控管中阳性可以提示患儿标