蒲薏颗粒药效学实验研究论文

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1、蒲薏颗粒药效学实验研究论文迟明艳黄勇王爱民兰燕宇王永林【摘要】目的对蒲薏颗粒进行药效学研究。方法观察蒲薏颗粒对荷瘤(H22)小鼠增效减毒作用，对艾氏腹水癌(EAC)小鼠生命延长率的影响，对体外培养人食管癌(ECA-109)细胞的影响，对荷瘤小鼠免疫功能的影响。结果蒲薏颗粒能增强化疗药物抑瘤作用、拮抗化疗药物对小鼠，雄性.freela公司出品，批号：206-069-5。2方法与结果2.1蒲薏颗粒对小鼠肝癌H22化疗的增效减毒作用1～3在无菌条件下于小鼠右腋皮下接种2×107/ml的H22细胞悬液，0.2ml/只，24h后按体重随机分为模型对照组，5-Fu组，PY高、低剂量组，5-Fu

2、加PY高剂量组，5-Fu加PY低剂量组。各组小鼠按表1的剂量灌胃(ig)给药，1次/d，连续10d，模型对照组给予等量生理盐水(NS)。停药次日称重后，摘眼球取血作外周血象检查，脱颈椎处死动物，剖取并称重瘤块，计算抑瘤率。剥离小鼠右股骨，用1640培养液通过针头反复冲洗骨髓并测定洗液中骨髓有核细胞数。见表1。肿瘤抑制率(%)=(1-实验组平均瘤重对照组平均瘤重)×100%由表1结果可见，蒲薏颗粒与5-Fu合用，可使5-Fu的肿瘤抑制率明显提高;白细胞、骨髓有核细胞计数也有显著性差异(P0.05或P0.01);提示蒲薏颗粒具有增效减毒的作用。表1对小鼠肝癌H22化疗的增效减毒作用与模

3、型对照组比较，*P0.05，**P0.01;与5-Fu组比较，#P0.05，##P0.01;n=102.2蒲薏颗粒对艾氏腹水癌(EAC)小鼠生命延长率的影响4～5于无菌条件下小鼠腹腔常规接种艾氏腹水癌小鼠(1×108/ml)的细胞悬液，瘤液0.2ml/只，接种后24h，按体重随机分为5组：模型对照组，CTX组(20mg/kg)，PY高、中、低剂量组，各组小鼠按表2的剂量ig给药，1次/d，连续10d，模型对照组给予等量NS。记录存活天数，计算生命延长率，比较各组间差异。结果见表2。生命延长率(%)=给药组平均生存时间-对照组平均生存时间对照组平均生存时间×100%表2蒲薏颗粒对艾氏

4、腹水癌(EAC)小鼠生命延长率的影响由表2结果可见，蒲薏颗粒高、中、低剂量组EAC荷瘤小鼠生存时间与模型对照组比较均有显著差异,生命延长率最高达50%以上,表明该药对艾氏腹水癌小鼠生存时间有明显的延长作用。2.3对体外培养人食管癌(ECA-109)细胞的影响1取大鼠30只，随机分为对照组(NS10ml/kg)、环磷酰胺组(20mg/kg)、蒲薏颗粒组(12g/kg)。各组动物分别ig给药，1次/d，连续7d。末次ig后2h乙醚麻醉，无菌条件下股动脉取血，4℃2500r/min离心25min，吸取血清，同组血清混匀，以0.22μm微孔滤膜正压过滤除菌，各组保留部分全血清，其余血清用1

5、640分别配成含鼠血清60%，30%，15%的培养基，-40℃保存备用。取在对数生长期的人食管癌细胞标准株(ECA-109)，用胰酶消化后，稀释成1×105个/ml，台盼蓝染色，检测活细胞达95%以上。分别将肿瘤细胞接种于96孔板，每孔100μl，培养24h后，观察细胞贴壁后，分别换成含不同浓度大鼠血清培养基，每组10个平行孔。培养24h，每孔内加入5mg/mlMTT10μl，继续培养4h，弃去培养孔内培养基，每孔加入二甲基亚砜100μl，待蓝色结晶完全溶解后，用酶标仪(波长490nm)测定各孔吸光度(A)。见表3。细胞毒活性(%)=(1-实验组OD值对照组OD值)×100%表3含

6、药血清对ECA-109细胞的细胞毒活性与相应浓度对照组鼠血清比较,*P0.05，**P0.01;n=10与相应血清浓度的对照组比较，蒲薏颗粒各剂量组的OD值明显减小，差异显著(P﹤0.05，P﹤0.01)，高剂量组细胞毒活性大于20%。显示蒲薏颗粒有显著的抑制ECA-109细胞增殖的细胞毒作用。2.4对荷瘤(S180)小鼠细胞免疫功能的影响BALB/C小鼠，在无菌条件下，接种S180细胞悬液，0.2ml/只，接种后24h，分组，给药方法见表4。分别于给药的第3天和第6天动物皮下注7%的2.4-二硝基氯苯丙酮液0.02ml/只致敏。于第1次致敏的第10天，动物一侧耳用1%的2.4-二

7、硝基氯苯甘油溶液0.02ml进行涂布攻击，另侧耳作对照，24h后处死动物，剪下两耳，打孔器取耳片，称重，以左右两耳片的重量差作为肿胀度，比较各组间差异。同时取胸腺、脾脏称重，计算胸腺指数和脾脏指数。见表4。由表4结果可见，蒲薏颗粒可使荷瘤小鼠降低的迟发型超敏反应水平、胸腺指数和脾脏指数明显改善，具有提高荷瘤小鼠的细胞免疫水平作用。表4对荷瘤(S180)小鼠细胞免疫功能的影响与模型对照组比较，*P0.05，**P0.013讨论“蒲薏颗粒”处方为贵州省民间中医祖传经验方，