不孕不育患者解脲支原体、沙眼衣原体及淋病奈瑟氏菌感染状况调查

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1、不孕不育患者解脲支原体、沙眼衣原体及淋病奈瑟氏菌感染状况调查[摘要]目的:探讨解脲支原体、沙眼衣原体、淋病奈瑟氏菌感染与不孕不育的相关性。方法:选取2012年8月至2015年8月于我院诊治的不孕不育症患者800例纳入不孕不育组,另选取同期于我院健康体检或产检者800例纳入健康对照组。采用荧光定量PCR仪测定两组患者解脲支原体、沙眼衣原体及淋病奈瑟氏菌DNA。结果:与健康对照组相比,不孕不育组患者解脲支原体感染、沙眼衣原体感染、解脲、沙眼衣原体同时感染、淋病奈瑟氏菌感染率明显较高(P[关键词]解脲

2、支原体;沙眼衣原体;淋病奈瑟氏不孕不育;相关性解脲支原体、沙眼衣原体及淋病奈瑟氏菌通过性接触传播引起的泌尿生殖系统感染在临床上越来越常见。由于这些病原体对人类生殖健康有着重要的不良影响,因此感染者往往容易出现不孕不育症。随着分子生物学及分子诊断学的快速发展,泌尿生殖系统感染病原体的检测方法由传统的培养法、普通免疫法、PCR逐渐发展为实时焚光定量PCR法。实时焚光定量PCR法除了有高效、灵敏度高、特异性高等PCR特点不孕不育患者解脲支原体、沙眼衣原体及淋病奈瑟氏菌感染状况调查[摘要]目的:探讨解脲

3、支原体、沙眼衣原体、淋病奈瑟氏菌感染与不孕不育的相关性。方法:选取2012年8月至2015年8月于我院诊治的不孕不育症患者800例纳入不孕不育组,另选取同期于我院健康体检或产检者800例纳入健康对照组。采用荧光定量PCR仪测定两组患者解脲支原体、沙眼衣原体及淋病奈瑟氏菌DNA。结果:与健康对照组相比,不孕不育组患者解脲支原体感染、沙眼衣原体感染、解脲、沙眼衣原体同时感染、淋病奈瑟氏菌感染率明显较高(P[关键词]解脲支原体;沙眼衣原体;淋病奈瑟氏不孕不育;相关性解脲支原体、沙眼衣原体及淋病奈瑟氏菌

4、通过性接触传播引起的泌尿生殖系统感染在临床上越来越常见。由于这些病原体对人类生殖健康有着重要的不良影响,因此感染者往往容易出现不孕不育症。随着分子生物学及分子诊断学的快速发展,泌尿生殖系统感染病原体的检测方法由传统的培养法、普通免疫法、PCR逐渐发展为实时焚光定量PCR法。实时焚光定量PCR法除了有高效、灵敏度高、特异性高等PCR特点及精确定量的光谱技术特点外,由于该技术全程检测反应均为全封闭,使PCR扩增产物污染的问题得到了根本的解决,因此还有污染小的特点,该技术的应用使泌尿生殖系统感染病原体

5、DNA检测具有划时代的意义,使临床检测及基础研究的数据来源更加及时、可靠。本研宄应用实时荧光定量PCR法测定不育不孕症患者解脲支原?w、沙眼衣原体及淋病奈瑟氏菌DNA探讨这些病原体感染予不孕不育的相关性。1.资料及方法1.1一般资料选取2012年8月至2015年8月于我院诊治的不孕不育症患者,阶段整群抽样选取800例,纳入不孕不育组,纳入标准:(1)1年未采取任何避孕措施,性生活正常而没有成功妊娠;(2)所有患者自愿参加本研究并签署知情同意书。排除标准:(1)合并严重器官功能障碍;(2)有精神障

6、碍或不配合检查者。年龄20-45岁,平均(28.9±3.5)岁,男425例,女375例;其中有130对为不孕不育夫妻。另选取同期于我院健康体检或产检者800例纳入健康对照组,年龄18〜47岁,平均(29.3±3.8)岁,男452例,女348例。性别、年龄在不孕不育组与健康对照组间比较差异无统计学意义(P>0.05),具有良好的可比性。1.2检测仪器与试剂盒采用ABI-7500全自动荧光定量PCR仪及中山大学达安基因股份有限公司生产的试剂盒测定解脲支原体、沙眼衣原体及淋病奈瑟氏菌DNA(生产批号:

7、S20150093)。1.3取标本及处理所有取标本操作均由妇产科及泌尿外科医生完成。(1)女性标本:先用干净棉签抹掉子宫颈外口分泌物,在用一次性女性专用无菌棉签在宫颈管内旋转3取宫颈管内分泌物于配套管内。(2)男性标本:将一次性男性专用拭子伸入尿道内3cm后旋转几圈,停留半分钟后取出置于配套管内。标本取好后立即封闭并送检。标本处理及提取DNA过程由检测专业人员严格按照说明书进行:将棉拭子从生物安全柜中取出后置于EP管内,加入1.5mL无菌生理盐水充分混匀悬浮后去掉棉拭子,将EP管放入离心机内以1

8、2000r/min离心3min,去掉上清留取沉淀备用。1.4扩增DNA及判定结果将2uL标本DNA、阳性定量参考物及质控品DNA先后加入扩增管内,置于离心机以8000r/min离心5s后放进全自动荧光定量PCR仪进行扩增,每次检测均分为空白对照、阴性及阳性。PCR仪参数设定:93°C3min预变;93°C45s后进入55°Clmin持续10个循环当作荧光本底信号;93°C30s后进入55°C45s持续30个循环,在55°C时可收集荧光。用ct值代表扩增结果,为使标准曲线效果最佳,需根据阳性定量参

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