反相hplc测定注射用乳糖酸阿奇霉素含量

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1、反相HPLC测定注射用乳糖酸阿奇霉素含量【摘要】目的建立用高效液相色谱法（HPLC）测定注射用乳糖酸阿奇霉素含量的方法。方法色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶（phenomenexluna5μm,250mm×4.6mm）；流动相为乙腈-0.02mol/L磷酸氢二钾（pH9.0）（60：40）；流速1.0ml/min，进样量20μl；检测波长210nm。结果乳糖酸阿奇霉素在20～100μg/mg范围内浓度与峰面积具良好线性的关系(r=0.9996)，回收率平均值为99.5%，RSD=0.7%，精密度为RSD=0.85%。结论HPLC法简便

2、，快捷，准确，适用于企业对中间体含量的控制。【关键词】阿奇霉素;高效液相色谱法【Abstract】ObjectiveTobuildthemethodofmeasuringthecontentofazithromycinlactobionateforinjectionanceliquidchromatography(HPLC).MethodsChromatographiccolumnis18-alkylsilicanebondingsiliconerubber(phenomenexluna5μm,250mm×4.6mm),flool

3、/LK2HPO3(pH9.0)(60:40),theflol/min,theinflo.ResultsTheconcentrationandpeakareaofazithromycinlactobionatehaveagoodlinearrelationship(r=0.9996)g,recoveryratioaverageis99.5%,RSD=0.7%,theprecisionisRSD=0.85%.ConclusionHPLCmethodissimpleandconvenient,quickandprecise,ediate

4、pound.【Keyycin;high-performanceliquidchromatography乳糖酸阿奇霉素是一种新型的注射用大环内酯类广谱抗生素。其法定含量测定采用微生物测定法［1］，操作繁琐费时。本文研究了用反相HPLC测定乳糖酸阿奇霉素的含量，并与微生物法进行了比较。本法简便、快速、准确。　　1仪器与试剂1.1仪器高效液相色谱仪（美国enexluna5μm,250mm×4.6mm），广州菲罗门科学仪器公司提供。2.2流动相乙腈-0.02mol/L磷酸氢二钾（pH9.0）（60：40），流速：1.0ml/min，进样量

5、20μl，检测波长：210nm，温度：30，理论塔板数：按阿奇霉素计算应不低于3000。2.3阿奇霉素标准品谱图和乳糖酸阿奇霉素样品谱图如图1,2,3。在上述色谱条件下，乳糖酸对阿奇霉素测定无干扰，且乳糖酸和阿奇霉素的分离良好，分离度为2.6；保留时间为8.6min;理论塔板数：按阿奇霉素计算4600；结果见图1～3。2.4样品测定及方法比较取注射用乳糖酸阿奇霉素适量，配制成每1ml含0.06mg的溶液。按2.2色谱条件在高效液相色谱仪上进样，记录色谱图用外标法计算含量测定结果见表1，同时与微生物法进行含量测定两种方法的比较见表1

6、。表1样品测定结果3结果与结论3.1工作曲线与线性范围精密称取阿奇霉素标准品约50mg，置25ml容量瓶中，以流动相溶解并稀释制成每1ml含阿奇霉素0.02mg、0.04mg、0.06mg、0.08mg、0.10mg的标准品溶液系列，分别在高效液相色谱仪进样20μl，以标准品峰面积与浓度做回归方程：Y=0.3692X-0.1526，r=0.9996（n＝5）。结果表明阿奇霉素在20～100μg/mg范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系。3.2回收率试验按处方工艺精密量取不加阿奇霉素的乳糖酸溶液适量，分别精密加入阿奇霉素原料240mg

7、，以次制备5份取上述0.06mg的溶液，作为对照品溶液，在高效液相色谱仪上测定峰面积，以外标法计算含量，得回收率平均值为99.5%，RSD为0.79%。3.3精密度试验取每1ml含0.06mg的阿奇霉素标准品溶液，连续进样10次，得峰面积的RSD为0.85%。4讨论注射用乳糖酸阿奇霉素是冻干粉针剂，中间体含量控制采用微生物测定法实验周期太长，约24h，不利于半成品的保存，采用高效液相色谱法15min即可分离测定完毕。由测定结果可知，高效液相色谱法间接控制中间体及成品的含量，与微生物法基本符合质量标准规定的90%～110%范围，本法

8、具有一定的实际意义。【参考