HPLC法测定阿奇霉素散剂的含量.doc

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1、HPLC法测定阿奇霉素散剂的含量【摘要】目的建立HPLC法测定阿奇霉素散剂的含量。方法采用C8柱，以0.045mol/L磷酸二氢胺溶液∶乙腈(2∶1)(用三乙胺调pH至7.35)为流动相，流速1ml/min，检测波长210nm，柱温40℃。结果阿奇霉素的线性范围为50.3～1006μg/ml，平均回收率100.1%，r=1.0000，RSD=0.8%(n=9)。结论HPLC法测定结果与微生物检定法比较无显著性差异。本方法可准确、快速、简便地测定阿奇霉素散剂的含量。【关键词】高效液相色谱法；阿奇霉素散剂；含量测定　　Content

2、determinationofazithromycinpowderbyHPLC　　ABSTRACTObjectiveToestablishanHPLCmethodforthedeterminationofazithromycinpowder.MethodThechromatographicconditionswereasfollowed:C8column,0.045mol/Lammoniumphosphatemonobasicsolution∶acetonitrile(2∶1)(adjustedtopH7.35withtriet

3、hylamine)asmobilephase,temperature:40℃,theflowrate:1.0ml/min,detectionwavelength:210nm.ResultsThelinearrangewasintherangeof50.3～1006μg/ml(r=1.0000),andthemeanrecovery(n=9)was100.1%(RSD=0.8%).ConclusionThemethodisrapid,simpleandaccuratetodeterminethecontentofazithromy

4、cinpowder.　　KEYWORDSHPLC;Azithromycinpowder;Contentdetermination　　阿奇霉素为氮杂内酯类抗生素，日抗基和《中国药典》2005年版［1］均采用微生物检定法测定其含量，《欧洲药典》4.6版和USP26版中均采用HPLC法，专属性较强，试验周期短，但均使用的是聚合物极性柱，《欧洲药典》柱温为70℃，USP采用电化学检测器，其采用的设备在我国药检部门尚未普及［2］。抗生素微生物检定法操作较为复杂，试验周期长，影响因素多，误差较大。本文采用HPLC法测定阿奇霉素散剂含量，可使

5、阿奇霉素与其有关物质得到较好的分离，方法简便、快速、准确。　　1仪器与试药　　Aglient1100高效液相色谱仪/DAD检测器，Aglient化学工作站。试药：阿奇霉素对照品(130352200304，946u/mg)及红霉素对照品(130307200215，923u/mg)均由中国药品生物制品检定所提供；阿奇霉素散剂规格为0.25g(以阿奇霉素计，批号030601，030602，030603)由安徽安科药业股份有限公司生产；纯化水，乙腈(色谱纯)，磷酸二氢铵(分析纯)。　　2色谱条件　　色谱柱：EclipseXDBC8

6、柱(4.6mm×150mm，5μ4m)；流动相：0.045mol/L磷酸二氢铵溶液∶乙腈(2∶1)(用三乙胺调pH至7.35)；流速：1ml/min，检测波长：210nm，柱温：40℃。在上述色谱条件下，十六醇、蔗糖等辅料、阿奇霉素对照品、供试品及阿奇霉素与红霉素对照品溶液的色谱图见图1。　　3方法与结果　　3.1方法的专属性考察　　精密称取阿奇霉素对照品20mg，分别置10ml容量瓶中，进行如下破坏试验：①酸破坏：加入0.1mol/L的盐酸溶液溶解并稀释至刻度，室温放置2h；②碱破A：辅料空白；B：阿奇霉素对照品；C：供试品；

7、D：阿奇霉素与红霉素对照品(1：阿奇霉素；2：红霉素)　　图1HPLC色谱图　略　　坏：加入0.1mol/L氢氧化钠溶液溶解并稀释至刻度，制成约2mg/ml的溶液，室温放置2h；③氧化破坏：加入5%双氧水溶解并稀释至刻度，室温放置2h；④热破坏：60℃加热破坏6h，加流动相溶解并稀释刻度。按上述色谱条件进样记录图谱(图2)，结果表明阿奇霉素对热较稳定，其它条件均不稳定，破坏产生的各相关杂质峰与主峰均能基线分离，说明该色谱条件能准确测定阿奇霉素的含量。　　3.2线性关系　　精密称取阿奇霉素对照品，加流动相溶解并稀释，摇匀，制成2m

8、g/ml的储备液。精密量取储备液0.5、1、2.5、5、10ml分别置于10ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，在上述色谱条件下分别进样20μl，每一组浓度进样3次，记录峰面积。以阿奇霉素素对照品浓度x(μg/ml)对色谱峰面积y绘制标准曲线，其回归方程为：