hplc—elsd在天然药物分析中的应用

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1、HPLC—ELSD在天然药物分析中的应用唐英健柳仁风汤迎军(苏州大学附属儿童医院江苏苏州215000)【摘要】天然药物中的许多成分没有紫外吸收或为紫外末端弱吸收，ELSD能够对其不经衍生进行检测。在这些天然药物分析中随着ELSD的发展和普及，HPLC-ELSD已逐渐取代了高效液相色谱法一紫外吸收检测器(HPLC—UV)和高效液相色谱法一红外吸收检测器(HPLC-RI)o木文将选取甾体皂甘类和银杏内酯两种药物进行综述并作出总结。【关键词】HPLC—ELSD阁体皂甘类和银杏内酯含量测定【中图分类号】R93【文献标识码】A【文章编号】2095-175

2、2(2013)10-0107-01【ABSTRACT】Manyofthenaturalmedicineingredientsnotultravioletabsorptionorfortheultravioletterminalabsorption,weaktoitsnottheELSDderivativefortesting.Inthesenaturaldruganalysis,withthedevelopmentandpopularizationofELSD,HPLC-ELSDhasgraduallyreplacedthehighperfor

3、manceliquidchromatography(HPLC.ultravioletabsorptiondetector,UV)andhighperformanceliquidchromatography(HPLCirdetector-Rl).ThisarticlewillselectsteroidalsaponinsIanclassesandginkgolactonestwodrugsreviewedinthisarticleandmakeasummary.【KEYWORDSlHPLC—ELSDsteroidalsaponinsIanclas

4、sesandginkgolactoneassay1、HPLC和ELSD的简介1.1HPLC的特点及原理HPLC是20世纪70年代发展起来的一项高效、快速的分离分析技术。HPLC是指流动相为液体的色谱技术。在经典的液体柱色谱法的基础上，引入了气相色谱的理论，在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，实现了分析快速化，分离效率高和操作自动化。它可用来做液固吸附，液液分配，离子交换和空间排阻色谱(即凝胶渗透色谱)分析。它具有高压、高速、高效、高灵敏度的特点。1.2ELSD的特点及原理ELSD是在90年代HPLC分析中的一种新型的通用型检测器，

5、主要适用于无紫外吸收，不能用紫外检测的组分，如糖类、脂肪酸、甘汕三酯及逛体等。它能对各种物质均有响应，且响应物质因子基本一致，它的检测不依赖于样品分子中的官能团，II可用于剃度洗脱。此外它还具有雾化器与漂移管易于清洗、流动池死体积不影响检测灵敏度、喷雾气体消耗少的等优点。样品组分从色谱柱后流出，进入检测器后，经历了雾化、流动相蒸发和激光束检测三个步骤。2、HPLC—ELSD测定皂甘类和银杏内酯的含量2.1测定甾体皂甘类的含量在HPLC—ELSD的应用中，此类药物含量的测定报道最多。饱和皂苷无紫外吸收或仅为末端吸收，ELSD能够对苏不经衍生进行检

6、测。主要有一次性分离测定黄芪中黄芪甲甙的含量；柴胡药材中的柴胡皂苷a和柴胡皂苻b的含量测定；荭叶心通软胶囊中三七皂苷R_1和人参皂苷Rg_l的含量分析；重楼商品药材中逛体皂甙的含量测定等。这些含量测定研究主要采用C18柱为固定相、乙晴与水作流动相，流速1011701^,柱温40°匕蒸发光散射(ELSD)参数：漂移管温度为110°C,气体流量为3.02〜3.05SLPM。因为不含共扼体系的甾体皂甘类一般无紫外吸收或仅为末端吸收，可以用ELSD直接测定苏多组分皂甘含量，研究结果显示该方法快速、简单、准确性好，灵敏度高(一般检测限低于3μg/m

7、l),线性关系良好，重现性和选择性好，它可以用于留体皂甘类药物的质量控制。但其平均冋收率都较底，表明这类药物中的杂质含量较多。2.2测定银杏内酯的含量银杏内脂属于二萜类天然药物，现已分离出银杏内脂A、B、C、M、J等，它可作为拮抗血小板活化因子来治疗因为血小板因素引起的休克等症状，所以银杏内脂是银杏制剂的主要有效成分。基于HPLC-RI方法测定银杏内脂所得基线难以稳定，测定银杏叶口腔崩解片的银杏内脂含量可以采用HPLC—ELSD。它以VP-0DSC18柱为固定相(150mm×4.6mm,5μm),流动相为正两醇-网氢呋喃-水(

8、1:15:84)，ELSD为检测器。结果显示该法准确、简单，灵敏度高，银杏内脂A、B、C和白果内脂的线性关系很好，重现性均佳，选择性强，RSD均低于3