HPLC分析在中药分析中的应用论文

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1、HPLC分析在中药分析中的应用摘要:IIPLC是一种非常有效并普遍实用的中药分析方法,可用于高分了、极性、离子和热不稳定化合物的分离分析。在屮药的定性、定量和杂质检测等方而都发挥了重耍的作用,该文综述了高效液相色谱技术在屮药材定性、定量分析屮的应用。关键词:高效液相色谱法沙罗了金银花一、HPLC法测定金银花不同部位中木犀草素的含量金银花是我国传统中药,为忍冬科忍冬属植物忍冬(LonicerajaponicaThunb)的干燥花蕾或待初开的花。其味甘,性寒,具有清热解毒、疏散风热,疏利咽喉、消暑除烦的作用,可治疗暑热症、泻痢、流感、疮吊肿毒、急慢性扁桃体炎、牙周炎等病。金银花主要含冇

2、挥发油、冇机酸类、黄酮类、三菇皂昔类、环烯瞇菇、昔类和其他无机元索等有效成分。其中,以木犀草素及木犀草苜为代表的黄酮类化合物,具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌等多种药理作用而备受关注。本文主要介绍了木犀草素在金银花不同部位中的含量。1.材料和方法1.1仪器和试剂美国Agilent1100型高效液相色谱仪,Agilent1100LC化学工作站;超声波提取机(上海思伯明仪器设备冇限公司);电子分析天平(北京赛得利斯公司)。甲醇、乙月青(色谱纯,天津四友);石油储、冰醋酸(分析纯,天津富宇);浓磷酸(分析纯,洛阳昊华);水为二次蒸惚水;木犀草素对照品(上海晶纯实业有限公司);木犀草昔对照品为

3、实验室自制,结构通过UV、IR、NMR等光谱学方法鉴定,纯度经HPLC峰面积归一化法测定大于99%,可做定量分析Z用。1.2实验方法1.2.1对照品溶液的配制精密称取木犀草素1.8mg,用甲醇定容至10mL的容量瓶中,配制成浓度为0.1800mg/mL的对照品溶液。用0.45um的滤膜过滤,备用。精密称取木犀草昔L0mg,用甲醇定容至10mL的容量瓶中,配制成浓度为0.1000mg/mL的对照品溶液。用0.45um的滤膜过滤,备用。1.2.2供试品溶液的制备精密称取干燥恒重的金银花4个部位(花、叶、茎的表皮、茎)的样品各5g,每个平行4份,置索氏提取器中,加入120mL的石油瞇,浸

4、泡12h,70°C水浴中提取至溶液显无色,挥发干石油醯,之后加A100mL甲醇,超声提取3次,过滤、浓缩提取液,定容至5mL的容量瓶中,即为测定木犀草索的供试品溶液。用0.45um的滤膜过滤,备用。精密称取上述4个部位的样品,同样的制备方法,最后浓缩提取液,定容至10mb的容量瓶中,即为测定木犀草苜的供试品溶液。用0.45urn的滤膜过滤,备用。2.结果2.1木犀草素的含量测定2.1.1色谱条件的选择色谱柱为AglientZorbaxSB-Cis柱(2.1mmxl50mm,5um);流动相为甲醇((p=0.02%)—磷酸溶液((p=50%);流速为0.3mL/min;检测波长350

5、0nm;柱温30°C。在此色谱条件下,木犀草索对照品和金银花4个部位的木犀草索供试品溶液分别进样,金银花、叶和茎的衣皮中木犀草索都能达到基线分离,但茎中没有检测到木犀草素.其色谱图见图1—图5.finin图1对照品木犀草素HPDC图Fig.1HPLX3chromatogramofluteolin图2金银花HPLCFig.2HPI^CchromatogramofI.onicerajaportica02468r/niiii图3叶HPLC图Fig.3HPLCchromatogramofleaf力mm茎的表皮HPU3Fig.4HPLCchromatogramofepidermalstem0

6、246810r/tnin图5茎HPUD图Fig.5HPLCchromatogramofstem2.1.2线性关系考察精密吸取浓度为0.1800mg/mL木犀草素对照品溶液0.40.60.81.01.21.41.6uL注入液相色谱仪屮,按上述色谱条件测定峰面积。以峰面积(Y)为纵坐标,木犀草素对照甜的含量(X)为横坐标,绘制标准曲线,其回归方程为Y二6.2442+5618.6X,尸0.9996。木犀草素的含量在0.0720〜0.288g范围内线性关系良好。2.1.3精密度实验精密吸取同一浓度的对照品溶液,重复进样5次,每次luL,测定木犀草索峰面积积分值的RSD为0.92%(n=5)

7、o2.1.4稳定性实验精密吸取同一浓度的对照品溶液,分别在0,1,2,4,8,12,16,24h进样luL,测定峰面积,结果RSD为1.2%(n=8)o2.1.5重复性实验精密称取5.0000g金银花样詁4份,按1.2样品制备方法得到木犀草素供试詁溶液4份,分别进样3uL,测定峰面积,结果计算金银花中木犀草索含量的RSD为0.38%。2.1.6回收率实验分别取已测知含量的金银花3个部位供试品溶液1.0mL,各平行4份,分别加入对照甜0.5mL,分别进样,进行含量测定,

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