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1、HBV感染患者外周血IL作者：冯美仙叶君倪超周欢【关键词】HBV IL-15参与单核/巨噬细胞与T、B淋巴细胞之间的调控。本研究对105例乙型肝炎病毒(HBV)感染患者血清IL-10、IL-15、HBVDNA和ALT进行检测,以探讨其在HBV感染慢性化中的意义。 1资料与方法 1.1一般资料 105例HBV感染患者为2006年9月至2007年10月，本院及台州市第二人民医院收治的慢性乙型肝炎52例、肝炎后肝硬化30例及原发性肝癌23例，男70例,女35例；年龄26～68岁。为HBV感染疾病组。肝炎后肝硬化诊断标准，参照2000年全国第10次(西安)传染病与寄生虫病会议修订的诊
2、断标准［３］,原发性肝癌诊断标准参照1999年第四届全国肝癌学术会议修订的原发性肝癌的诊断标准和临床分期标准［４］。各种肝炎病毒血清标志物均为阴性的健康体检者15例，为正常对照组。 1.2标本处理 受检对象取静脉血3ml,尽快低温离心,分离血清装2支试管,-80℃保存待测,预留取部分血清进行肝功能检测。待收集齐标本,由专人一次性检测IL-10、IL-15与HBVDNA。 1.3方法 (1)IL-10检测:采用双抗体夹心ELISA法,试剂为YESBiotechLaboratoriesLTD产品(Canada),LotNum:I10JA200-2,酶联物为辣根过氧化物酶。(2)I
3、L-15含量用双抗体夹心ELISA法检测,试剂盒由上海晶美公司提供。(3)HBVDNA定量PCR:采用实时FQ-PCR,连续检测反应体系中荧光信号变化。测定仪器为PE7700荧光定量基因分析仪(PerkinElmerUSA)。测定试剂由深圳匹基公司提供。(4)ALT用速率法在全自动生化分析仪(OLYMPUSAU640,日本)检测。以上均严格按说明书操作。 1.4统计学处理 采用SPSS10.0统计软件，两标本比较用t检验，多个样本均数比较用方差分析。 2结果HBV感染患者血清IL-10、IL-15水平与HBVDNA复制水平的关系见表1。HBV感染患者血清IL-10、IL-15与
4、ALT关系见表2。HBV感染不同阶段IL-10、IL-15水平比较见表3。表1HBV感染患者血清IL-10、IL-15水平与HBVDNA复制水平关系(略)注:与正常对照组相比较P<0.05表2HBV感染患者血清IL-10、IL-15与ALT关系(略)注:与正常对照组相比较P<0.05表3HBV感染不同阶段IL-10、IL-15水平比较(略)注：与慢性乙型肝炎及肝炎后肝硬化组比较*P<0.05 3讨论HBV感染的成年人中大约有5%～10%的人转为慢性,其慢性化机制在很大程度上仍不清楚。原发性肝癌与乙型肝炎病毒感染有很大关系,这也得到了很多学者的认可。而它的发病机制至
5、今却仍不很清楚,细胞因子可能参与了乙型肝炎的发生、发展及结局。Th1/Th2细胞失衡与乙型肝炎慢性化有关。研究认为:急性HBV感染恢复者的CD4+T细胞表现为Ⅰ型反应;而慢性HBV感染者T细胞克隆表现出占优势的Ⅱ型反应［５］。IL-10由Th2细胞、巨噬细胞、树突状细胞和B细胞等产生,是Th2型细胞因子中一个重要下调因子,是一种双抑制的反馈因子,对Th1细胞和Th2细胞增殖有双向调节作用［６］。HyodoN等［７］研究发现,抗原呈递细胞(APC)产生的IL-10可能是决定机体产生有效的免疫反应抵抗HBV感染的关键因子。IL-10合成增加将限制IFN-γ的合成,削弱IFN-γ杀灭HBV
6、的作用,导致HBV在体内持续存在。IL-15的组织来源非常丰富，许多组织均可以表达。IL-15是T淋巴细胞产生细胞因子及其受体的化学诱导剂，尽管活化T细胞表达的亲和力IL-2R比NK细胞表达的亲和力IL-2R高100倍，但是T细胞的活化只能在获得性免疫过程中方可产生，是机体免疫发育中的晚期事件，IL-15诱导的细胞免疫功能可启动局部的免疫反应，导致炎症的发生。本研究发现,HBV感染患者血清IL-10及IL-15水平明显增高,提示IL-10及IL-15合成增加，限制了机体对HBV的杀灭作用,可能在乙型肝炎慢性化的过程中有重要参与。在慢性肝炎患者中,ALT升高是肝炎活动的重要标志。乙肝病
7、毒感染的疾病发生主要取决于宿主的免疫应答,而病毒的异质性与复制程度也是免疫应答的重要因素。在慢性乙肝病毒感染中,可以由免疫耐受的高感染状态至免疫清除的低感染状态。免疫应答早期,HBV高水平复制,肝内存在复制型病毒;随着感染的持续,细胞毒性T细胞破坏感染的肝细胞、肝组织病变活动,病毒复制水平逐渐降低。本实验表明,慢性乙型肝炎患者血清IL-10及IL-15水平在HBV-DNA阳性组及ALT异常组明显升高,表明IL-10及IL-15水平升高不仅可抑制宿主抗HBV
