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1、葡聚糖硫酸钠致溃疡性结肠炎大鼠模型的建立论文赵平，董蕾，罗金燕，马卉，管海涛，商鹤玲【关键词】结肠炎Establishmentofdextransulfatesodiuminducedulcerativecolitismodelinrats【Abstract】AIM:Toestablishtheratmodelofulcerativecolitis(UC).METHODS:Therats(DSS)indrinkingentsofdistalcolonissionelectronmicroscopicobservati
2、ons.The,colon,thymusandspleenyeloperoxidase(MPO)activityofrectumeasured.RESULTS:Ratsreceiving40g/LDSSsolutionfor7ddevelopeddiarrheaandpositivefecaloccultblood.Inflammationofcolonmainlyinvolvedthemucousmembraneandsubmucosa.Focalerosionsoftheepithelium,gobletcell
3、sdepletion,destructionofcryptandneutrophilinfiltrationg/gvs(5.07±1.31)mg/g,P0.05］ptomsandcolonicpathologicalchangesofratsodelinratsappearstosharenearlyallthemorphologicalcharacteristicsanUC.【Keyodels,animal;colitis,ulcerative;dextrasulfatesodium【摘要】目的:建立大鼠溃疡性结肠
4、炎（UC）模型.方法：给SD大鼠饮用40g/LDSS溶液7d，然后改正常饮水10d.每日进行疾病活动指数(DAI)评分.于实验8,13和18d分别处死4～5只，行组织学大体评分、组织病理评分及透射电镜观察.计算盲肠、回盲部至肛门段结肠、胸腺、脾脏质量指数并测直肠髓过氧化物酶（MPO）含量.结果：大鼠饮用40g/L的DSS7d均出现腹泻、隐血试验阳性.可见炎症主要累及黏膜和黏膜下层.freelg/gvs(5.07±1.31)mg/g,.freel,DSS)诱导的UC动物模型与人类UC的病理形态极为近似，但不同物种及不同
5、浓度DSS所诱导的UC的病变特征不同.我们选用SD大鼠建立UC动物模型，并观察该模型不同时期的症状、病理等改变如下.1材料和方法1.1材料健康雄性SD大鼠26只，体质量180～200g，由西安交通大学医学院实验动物中心提供.葡聚糖硫酸钠Sigma公司生产,Mr5000,硫磺含量150～200g/kg.髓过氧化物酶（myeloperoxidas，MPO）检测试剂盒购自南京建成生物研究所.H600透射式电子显微镜由日本日立公司生产.1.2方法大鼠随机分为DSS模型组（n=20）和正常对照组（n=5），DSS模型组饮用40
6、g/LDSS溶液7d诱发急性结肠炎,然后改正常饮水10d.正常对照组大鼠正常饮水.DSS模型组每日记录大鼠体质量、大便性状、隐性或显性出血情况,进行疾病活动指数(DAI)评分［1］.于实验8（n=5）,13（n=5）和18d（n=4）用200g/L乌拉坦7mL/kgip麻醉，剖腹观察结肠外观，延系膜侧剖开结肠，行组织学大体评分［2］.取盲肠、回盲部至肛门段结肠、胸腺、脾脏称质量，计算体质量指数.取升结肠、横结肠、远段结肠各1.5cm,用40g/L甲醛溶液固定,切片,HE染色，行组织病理评分［3］.取距肛门3cm处直肠
7、黏膜行透射电镜观察.称取直肠黏膜100mg，-80℃保存，按MPO试剂盒说明进行检测.统计学处理：使用SPSS10.0软件行统计学处理.数据以x±s表示，采用One内,病变自下向上逐渐减轻.实验13d，结肠病变有所恢复，仍有局部充血、水肿和溃疡.实验18d，结肠病变基本恢复，溃疡愈合，仍有局部充血、水肿，结肠损伤评分较8d显著减低（P0.01,Tab1）.表1DSS所致结肠炎恢复过程中结肠损伤及组织损伤评分（略）2.1组织病理改变实验8d越近肛门侧病理改变越明显，与肉眼观察一致.光镜下可见炎症主要累及黏膜、黏膜下层，
8、部分表面上皮脱落，上皮内杯状细胞减少，隐窝破坏，浸润的炎症细胞以中性粒细胞为主,符合急性炎症的组织病理改变（Fig1A）.实验13d，光镜下可见较局限的隐窝破坏伴上皮再生修复及腺体增生，隐窝变形、排列紊乱.实验18d，黏膜基本恢复正常，仍有少量炎细胞浸润.升结肠、横结肠组织损伤评分各时间段差异无显著性(Tab1).电镜观察发现正常对照组结肠上皮
