三氧化二砷对肝癌hepg2细胞增殖的影响论文

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1、三氧化二砷对肝癌HepG2细胞增殖的影响论文.freelolL-1As2O3抑制程度明显强于1μmolL-1.5和1μmolL-1As2O3作用后细胞克隆形成率分别为（1.5±1.2）%和（12.3±2.2）%，明显低于对照组的（30.0±4.2）%（P0.01）.As2O3对肝癌细胞有较强的细胞毒作用，且呈明显剂量和时间依赖性，其对肝癌细胞的杀伤率高于5-氟脲嘧啶（5-FU）和丝裂霉素（MMC）.freel;arsenicals/TUAbstract:AIMToexploretheinhibitiveeffectofarsenictrioxid

2、e（As2O3）ontheproliferationofhumanlivercancercellline-HepG2.METHODSThemorphologicchanges，proliferationability，colony-formingrateofHepG2treatedbyAs2O3icroscopy，groingassay.ThecytotoxicityofAs2O3onHepG2inedbyMTTassay.RESULTSColony-formingrateofHepG2olL-1As2O3（1.5±1.2）%olL-1As2O3

3、（12.3±2.2）%，P0.01andmuchloark-ablecytotoxiceffectonHepG2andcytotoxiceffectedependent.ThecytotoxiceffectmolL-1，应用时用RPMI1640培养液稀释，4℃保存.肝癌细胞株HepG2由军事医学科学院分子病毒学研究所提供，RPMI1640培养液、小牛血清、台盼蓝、四甲基偶氮唑蓝（MMT）及二甲基亚砜（DMSO）均购于华美公司.1.2方法1.2.1As2O3对肝癌细胞生长曲线的影响取对数生长期的肝癌细胞5×104置于54个25mL的培养瓶中，待细胞

4、贴壁后，实验组加入1μmolL-1和5μmolL-1的As2O3，对照组加等体积的培养液，连续培养6d，每日各取3瓶，以台盼蓝拒染法计算活细胞数，取平均值，绘制生长曲线.1.2.2As2O3对肝癌细胞克隆形成的影响取对数生长期肝癌细胞，采用有限稀释法，以每孔100个细胞接种于6孔培养板中，实验组分别加入1μmolL-1和5μmolL-1As2O3，对照组加等体积的培养液，每个浓度设4个复孔，静止连续培养2olL-1As2O3，对照孔加等体积的培养液，每个浓度设4个复孔，分别培养24，48和72h，每孔加入5gL-1MTT10μL，再培养4h，弃去

5、上清液，加入DMSO100μL，振荡15min，在酶联仪570nm处测吸光度A值.杀伤率按以下公式计算.杀伤率（%）=（对照孔A值-实验孔A值）/对照孔A值×100%.1.2.4As2O3与5-FU，MMC对肝癌细胞的细胞毒作用比较采用MTT比色法，将对数生长期肝癌细胞1×104接种于96孔培养板，待细胞贴壁后，实验组分别加入As2O32μmolL-1，5-FU0.5gL-1，MMC4mgL-1，As2O32μmolL-1+5-FU0.5gL-1，As2O32μmolL-1+MMC4mgL-1，对照组加等体积培养液，按前述方法测吸光度A值，计算杀

6、伤率.2结果2.1As2O3对肝癌细胞生长的影响1μmolL-1和5μmolL-1均能明显抑制肝癌细胞的生长，随着药物浓度的增加，作用时间延长，抑制作用更明显，各浓度组和对照组之间活细胞数比较差异非常显著（P0.01，Fig1）.3对肝癌细胞克隆形成的影响1μmolL-1和5μmolL-1As2O3均能明显抑制肝癌细胞的克隆形成，克隆形成率分别为（12.3±2.2）%和（1.5±1.2）%，5μmolL-1组的抑制作用明显强于1μmolL-1组（P0.01），但两组与对照组（30.0±4.2）%比较差异均非常显著（P0.01）.2.3As2O3对

7、肝癌细胞的细胞毒作用As2O3对肝癌细胞有较强的细胞毒作用，随着药物浓度的增加，作用时间的延长，杀伤率明显升高，各组间差异显著（Tab1）.表1As2O3对HepG2细胞的细胞毒作用（略）3与5┐FU，MMC对肝癌细胞的细胞毒作用比较As2O3对肝癌细胞的杀伤率高于5-FU及MMC，但差异不显著，As2O3与5-FU及MMC有协同效应，联合应用后杀伤率明显提高（Tab2）.表2As2O3与5-Fu及MMC对HepG2细胞的细胞毒作用比较（略）3是中药复方青黛、吡霜等的主要有效成分，具有强烈的毒性，长期以来被认为是一种致癌剂，能抑制细胞DNA和RN

8、A的合成，干扰细胞代谢，致染色体畸变，因此，用之十分谨慎.但在我国传统医学中，人们应用砷剂治疗牛皮癣、风湿病和梅毒等疾病的历史悠久.实验