恩诺沙星（enrofloxacin）elisa试剂盒

《恩诺沙星（enrofloxacin）elisa试剂盒》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、恩诺沙星（Enrofloxacin）ELISA试剂盒一、概要恩诺沙星（ENR）作为一种氟喹诺酮类物质，能抑制细菌DNA螺旋酶活性，常用于治疗家畜禽感染性疾病。随着ENR的大量使用，残留于畜禽可食组织中的ENR及其代谢产物环丙沙星（CIP）引发了严重公共卫生问题。恩诺沙星ELISA检测试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品，能最大限度地减少操作误差和工作强度。二、试验原理恩诺沙星ELISA检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被恩诺沙星抗原，样本中残留的恩诺沙星和微孔条上预包被的抗原竞争抗

2、恩诺沙星抗体，加入酶标二抗后，经TMB底物显色，样本的吸光值与其残留物恩诺沙星的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中残留物恩诺沙星的含量。三、适用范围恩诺沙星ELISA检测试剂盒可定性、定量检测肌肉、肝脏、蜂蜜等样本中恩诺沙星的残留量。四、交叉反应率恩诺沙星………………………………………………100%五、检测步骤测定前应须知：1、使用之前将所有试剂和需用板条的温度回升至室温（20～25℃）。2、使用之后立即将所有试剂放回2～8℃。3、在ELISA分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的

3、一致性，正确的洗板操作是ELISA测定程序中的要点。4、在所有恒温孵育过程中，避免光线照射，用盖板膜封住微孔板。操作步骤：1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）回温30min以上，注意每种液体试剂使用前均须轻轻摇匀。2、取出所需数量的微孔板，将不用的微孔放入带有干燥剂的锡箔袋中，保存于2～8℃。3、洗涤工作液在使用前也需回温。4、编号：将样品和标准品对应微孔按序编号，每个样品和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样品孔所在的位置。5、加标准品/样品：加标准品/样品50ml/孔到对应的微孔中，然后加入

4、抗试剂50ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应30min。6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液250ml/孔，充分洗涤4~5次，每次间隔10~20s，用吸水纸拍干（拍干后若有气泡可用未使用过的枪头戳破）。7、加酶标物：加入酶标物100ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应30min，取出重复洗板步骤6。8、显色：加入底物液A液50ml/孔，再加底物液B液50ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应15～20min。（如颜色较浅可适

5、当延长此步的反应时间）9、测定：加入终止液50ml/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630nm检测，请在5min内读完数据），测定每孔OD值。(若无酶标仪，则不加终止液用目测法可进行判定)。六、检测方法灵敏度、准确度、精密度试剂盒灵敏度：0.5ppb样品最低检测限：肌肉样品………………………………………1ppb肝脏样品………………………………………2ppb蜂蜜样品……………………………………………2ppb回收率：肌肉样品………………………………………80±10%肝脏样品………………

6、………………………75±15%蜂蜜样品………………………………………85±10%精密度：试剂盒的变异系数均小于10%七、注意事项1、室温低于20℃或试剂及样品没有回到室温（20～25℃）会导致所有标准的OD值偏低。2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。3、每加一种试剂前需将其摇匀。4、反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。5、不要使用过了有效日期的试剂盒；也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂，掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度

7、的降低；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。6、储存条件保存试剂盒于2～8℃，不要冷冻，将不用的酶标板微孔板放进锡箔袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。7、试剂变质的迹象发色试剂有任何颜色表明发色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。8、在加入底物液A液和底物液B液后，一般显色时间为15～20min即可。若颜色较浅，可延长反应时间到30min，但不得超过30min。反之，则减短反应时间。9、恩诺沙星ELI

8、SA快速检测试剂盒最佳反应温度为25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。八、贮藏条件及保存期贮藏条件：保存试剂盒于2~8℃。保存期：该产品有效期为12个月。