6ckine修饰的树突状细胞促进t淋巴细胞增殖和分化的作用

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1、中国生物制品学杂志2009年8月第22卷第8期ChinJBiologicalsAugust2009,Vol.22No.8··743中国图书分类号R373.1文献标识码A文章编号1004-5503(2009)08-0743-05【基础研究】6Ckine修饰的树突状细胞促进T淋巴细胞增殖和分化的作用薛刚1程莹2王培红1曹永宽1田伏洲1黄文林3【摘要】目的研究次级淋巴组织趋化因子(6Ckine)修饰的树突状细胞(DC)对T淋巴细胞增殖和分化的影响。方法用携带人6Ckine基因的重组复制缺陷型腺病毒(Ad-6Ckine)感染人外周血单个核细胞来源的DC,检测Ad-6Ckine-DC对6Ckine的

2、表达及细胞因子分泌的影响,并观察其吞噬功能和表型的变化及对自身T淋巴细胞的趋化作用。用结肠癌LoVo细胞抗原致敏Ad-6Ckine-DC,将该DC与自身T淋巴细胞共同培养,分别用H掺入法、RT-PCR和ELISA检测Ad-6Ckine-DC对3T淋巴细胞增殖和分化的影响。结果在Ad-6Ckine转染后24h内,DC的吞噬功能几乎不受影响。转染的6Ckine基因能在DC中表达,表达的6Ckine能促进其表达CD83和CCR7,上调RANTES的表达。Ad-6Ckine-DC对自身T淋巴细胞有明显的趋化作用,抗原致敏的Ad-6Ckine-DC能显著促进T淋巴细胞的增殖,并增强其表达T-bet和

3、IL-2的能力。结论6Ckine基因的修饰能在一定程度上促进DC的成熟,并募集T淋巴细胞于DC周围,有利于DC向T淋巴细胞传递抗原和第二信息,增强DC促进T淋巴细胞增殖的作用并使其向Th1分化,诱导细胞免疫,将成为制备肿瘤疫苗的一种良好选择。【关键词】次级淋巴组织趋化因子;树突状细胞;T淋巴细胞;增殖;分化6Ckine-ModifiedDendriticCellsPromotesProliferationandDifferentiationofTLymphocytes,CHENGYing,WANGPei-hong,etal(△△XUEGangDepartmentofGeneralSurge

4、ry,ChengduMilitaryGeneralHospital,Chengdu610083,China)【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofdendriticcells(DCs)modifiedby6Ckine,asecondarylymphoidorganchemokine,ontheproliferationanddifferentiationofTlymphocytes.MethodsHumanPBMC-derivedDCswereinfectedwithrepli-cation-defectiverecombinantadeno

5、virus(Ad-6Ckine)carryinghuman6Ckinegene.Theeffectonexpressionof6Ckineandsecretionofcytokines,phagocyticability,phenotypeaswellaschemotacticactivitytoTlymphocytesofAd-6Ckine-DCswereinvestigated.Ad-6Ckine-DCsweresensitizedwithcoloncancerLoVocellsandco-culturedwiththeirautologousTlymphocytes,andtheef

6、fectsonT3lymphocyteproliferationanddifferentiationwerestudiedbyHincorporation,RT-PCRandELISA.ResultsLittleeffectonthephagocyticabilityofDCswasobservedwithin24haftertransfectionwithAd-6Ckine.6CkinewasexpressedinDCs,whichpromotedtheexpressionsofCD83andCCR7andup-regulatedtheexpressionofRANTES.Ad-6Cki

7、ne-DCsshowedsignificantlychemotacticac-tivitytoTlymphocytes.Theantigen-sensitizedAd-6Ckine-DCspromotedtheproliferationofTlymphocyteaswellastheexpressionsofT-betandIL-2.ConclusionThemodificationwith6Ckinegenepromo

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