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1、成年及新生大鼠面神经结扎后NADPH论文【关键词】大鼠；面神经；结扎术；NADPH脱氢酶；组织化学DifferentexpressionpatternsofNADPHdpositiveneuronsafterfacialnerveligationinneonatalandadultrats【Abstract】AIM:ToestablishtheneonatalandadultratmodelsoffacialnerveligationandobservethedynamicchangesofNADPHdpositiveneuronsinthefacialnucl
2、eusafterligation.METHODS:Theneonatalandadultratsfacialnerveastoidforamen.Braintissues3,7,14,21,28,56,84dafteroperationrespectivelyorphologicalchangeoffacialmotoneurons(FMN).RESULTS:ThenumberofNADPHdpositiveFMNincreasedsignificantlyinadultratsfrom3dto12berofNADPHdpositiveFMNincreasedi
3、nboththeneonatalandtheadultrats,istry【摘要】目的：研究新生及成年大鼠面神经结扎后，面神经核运动神经元（FMN）NADPHd阳性细胞的动态变化.方法：于新生及成年大鼠茎乳孔处结扎面神经，于3,7,14,21,.freelg/kg)大鼠，暴露左侧茎乳孔及面神经干，使用手术线于距茎乳孔1.5mm处结扎面神经，右侧为正常对照.新生SD大鼠42只(第四军医大学实验动物中心提供),全部产自7只母鼠，于出生后7d，低温麻醉（-20℃,20~30min），在其左侧面部的腮腺下方暴露面神经，结扎其主干［4］.术后新生鼠与其母鼠以12h∶12h
4、间隔喂养.全部动物按时给予食物和水，并经不同存活时间，在10g/L戊巴比妥钠(40mg/kg)ip麻醉下开胸，左心室升动脉插管，灌注温生理盐水100mL冲净血液，然后用预冷的40g/L多聚甲醛固定液（pH7.4）500mL灌注，固定完毕，参照文献［5］定位面神经核，水平面切取一块5mm脑干(以桥延沟为中心)后固定2h,入200g/L蔗糖溶液4℃过夜，至组织块下沉，冰冻冠状切片14μm.1.2方法切片经10mmol/LPBS漂洗3×5min后，在含有TritonX100,0.6g/LNADPHd和0.5g/L硝基四氮唑蓝（NBT）的PB液(pH8.0)中37℃孵育
5、40～60min,10mmol/LPBS终止反应.并使用中性红复染，贴片，脱水，透明，封片.每只动物随机取5张切片，在BX60（X100）下计数面神经核团内神经元（FMN）.左右两侧面神经核团中中性红阳性神经元数目之比（L/R）为存活率.损伤侧NADPHd染色阳性神经元于同侧中性红阳性神经元数目之比为相对阳性率，损伤侧NADPHd染色阳性神经元于对照侧中性红阳性神经元数目之比为绝对阳性率.统计学处理：实验结果用x±s表示，采用Origin7.0软件，组内比较统计学处理用t检验，P0.05表示差异具有统计学意义.2结果2.1成年大鼠面神经切断后1.图2成年大鼠面神
6、经结扎后面神经核内的NADPHd阳性神经元（略）A：3d;B:1.图3新生大鼠面神经结扎后面神经核内的NADPHd阳性神经元（略）表1面神经结扎后核团内NADPHd阳性神经元的变化（略）3讨论我们发现，幼年大鼠从损伤后3d开始就有大量的神经元死亡，而成年大鼠则从1entofnitricoxidesynthaseinthephysiologyandpathophysiologyoffacialnervefunctionanddysfunction［J］.EurArchOtorhinolaryngol,2000,257(4):188-192.［2］RuanRS,Le
7、ongSK,YeohKH.Theroleofnitricoxideinfacialmotoneuronaldeath［J］.BrainRes,1995,698(12):163-168.［3］RuanRS,LeongSK,YeohKH.ExpressionofNADPHdiaphoraseactivityinthefacialmotoneuronsafterpressionofthefacialnerveinthealbinorat［J］.BrainRes,1994,652:350-352.［4］MoranLB,GraeberMB.Thefacialnerveax
8、otomymodel［J
