超临界二氧化碳萃取灵芝总三萜的工艺研究论文

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1、超临界二氧化碳萃取灵芝总三萜的工艺研究论文杨军,余德顺,罗俊,罗喜荣【摘要】目的探讨超临界CO2萃取灵芝总三萜的优化工艺条件。方法采用响应曲面法考察萃取压力、萃取温度、夹带剂用量对灵芝总三萜萃取率的影响。结果优化萃取条件为：萃取压力30MPa，萃取温度51℃，夹带剂用量2.2ml/g。结论该方法简便准确，预测性好。【关键词】灵芝;总三萜;超临界二氧化碳萃取;响应曲面法Abstract:ObjectiveToinvestigatetheoptimumextractionoftotaltriterpenoidsfromGanodermalucidumbysupercriticalc

2、arbondioxideextraction．MethodsTheresponsesurfacemethodologyeterssuchasextractionpressure，extractiontemperatureandentainerdosage.ResultsTheoptimalextractionconditionsperature51℃,entainerdosage2.2ml/g.ConclusionTheresponsesurfacemethodologyusedinthisstudyisabletopredicttheoptimalextractioncond

3、itionsforthetotalyieldoftotaltriterpenoidsinGanodermalucidum.Keyalucidum;Totaltriterpenoids;SupercriticalCO2extraction;Responsesurfacemethodology灵芝(Ganoderma)为层菌纲非褶菌目灵芝菌科灵芝属真菌的总称。习惯所称灵芝是指灵芝属中赤芝Ganodermalucidum(Leyss.ExFr.)Karst.的子实体部分，其主要成分之一是三萜类化合物，由赤芝中发现的三萜类化合物已有135种，如赤芝酸A.freell)/灵芝原料重量(g

4、)〕为自变量，以灵芝总三萜萃取率为响应指标设计三因素三水平实验方案，实验因素编码及水平设计见表1。表1实验因素编码及水平（略）取赤芝粉200g置于超临界萃取器，设定萃取时间为1h，CO2流量为20L/h,解析压力为5MPa，解析温度为60℃。当达到预定温压条件，启动夹带剂泵，定量打入95%乙醇，萃取过程中从解析器收集萃取液，实验结束后减压回收乙醇，真空干燥得红褐色固体。2.2灵芝总三萜含量的测定采用分光光度法［4,5］，以熊果酸为对照品，5%香草醛-冰醋酸和高氯酸为显色剂，60℃水浴15min，在最大吸收波长540nm处测定吸光度，绘制浓度和吸光度的标准曲线，得回归方程：Y=3

5、.628X-0.094，r=0.9994，线性范围0～0.25mg/ml。精密称取灵芝超临界萃取物样品50mg，同法显色测定，根据标准曲线计算总三萜含量及萃取率(Y)。Y(%)=萃取物中总三萜含量(g)/灵芝原料重量(g)×100%3结果与讨论3.1实验结果及模型方程的建立灵芝总三萜的超临界CO2提取响应曲面实验设计方案与实验结果见表2。表2实验数据进行多元回归拟合，得响应曲面二次多元回归模型：Y=-0.5633+0.0573X1+0.0438X2-0.2113X3-0.0011X12-0.0005X22+0.0183X32+0.0001X1X2+0.001X1X3+0.002

6、X2X3表2实验设计方案及结果（略）对该模型进行方差分析结果见表3，回归模型系数显著性检验结果见表4。由表3可知模型P=0.0020.01表明该模型极显著，失拟项P=0.2460.05不显著，r2=0.9720说明该模型拟合程度良好，试验误差小，可以用此模型对灵芝总三萜的超临界CO2提取进行分析和预测。由表4可知模型中一次项X1、二次项X12和X22显著，其他项不显著。表3回归模型的方差分析（略）表4回归模型系数显著性检验（略）3.2响应曲面分析与优化模型响应曲面图见图1～3。由图1可知保持萃取压力不变，随着萃取温度升高灵芝总三萜萃取率逐步增加；保持萃取温度不变，随着萃取压力增

7、加灵芝总三萜萃取率快速增加。由图2可知保持萃取压力不变，随着夹带剂用量增加灵芝总三萜萃取率逐步增加；保持夹带剂用量不变，随着萃取压力增加灵芝总三萜萃取率快速增加。由图3可知保持萃取温度不变，随着夹带剂用量增加灵芝总三萜萃取率逐步增加；保持夹带剂用量不变，随着萃取温度升高灵芝总三萜萃取率逐渐增加，达到峰值后缓缓下降。对模型方程解逆矩阵得灵芝总三萜最佳提取工艺条件为：萃取压力29.30MPa，萃取温度51.09℃，夹带剂用量2.18ml/g。为检验响应曲面法所得结果的可靠性，采用上述优化提取条件