茉莉酸甲酯对丹参茎叶丹酚酸和丹酚酸b含量的影响

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1、茉莉酸甲酯对丹参茎叶丹酚酸和丹酚酸B含量的影响【摘要】  目的探讨茉莉酸甲酯(methyjasmonat,MJ)对栽培丹参的药效成分影响,并为丹参地上部分的开发利用提供一定的研究依据。方法采用比色法和HPLC法,以丹酚酸和丹酚酸B为检测指标,对茉莉酸甲酯处理的丹参茎叶样品进行检测。结果丹参种苗经茉莉酸甲酯喷施处理后的48h内,其茎叶中丹酚酸和丹酚酸B含量均高于对照,在所测试范围5×10-9~5×10-3的浓度中,随浓度的升高而含量增加。结论外施茉莉酸甲酯能促进丹参茎叶中的丹酚酸和丹酚酸B含量的积累,可以考虑在生产中加以应用,并注意今后在

2、丹参的种植及采收中地上部分的利用。【关键词】丹参茉莉酸甲酯丹酚酸丹酚酸B  Abstract:ObjectiveTostudytheeffectofmethyljasmonate(MJ)onmedicinepositionofcultivarSalviamiltiorrhiza,andprovidesomereferencefortheexploitationandutilizationoftheleavesandstemsinSalviamiltiorrhiza.MethodsTheleavesandstemsofSalviamilt

3、iorrhizaethodsofcolorimetryandHPLC.ResultsJsofSalviamiltiorrhizacanbepromotedbyMJ,andutlizationincultivatedplantingofSalviamiltiorrhizashouldbeconsidered.  KeyiltiorrhizaBge.;Methyljasmonate;Salvianolicacid;SalvianolicacidB丹参SalviamiltiorrhizaBge.为唇形科植物丹参的干燥根及根茎,其有效成分包括水

4、溶性和脂溶性两大类。脂溶性成分主要是二萜醌类化合物(包括丹参酮、隐丹参酮等),水溶性成分主要为酚酸类化合物[包括丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸、咖啡酸、丹酚酸(salvianolicacidA、B等)]。丹参的水溶性酚酸类化合物,引起了医药学家的极大重视,也由于丹参的传统应用方式为水煎液,近些年来,对于其水溶性酚酸类化合物的研究较多[1,2]。丹酚酸B是目前研究较多的丹酚酸之一,在治疗心血管疾病、慢性肝炎,抗肝纤维化、抗动脉粥样硬化和改善记忆功能障碍等方面发挥着重要作用[3]。最新研究表明,丹参叶中的酚酸类含量与根中相似,有些甚至高

5、于根部[4,5]。茉莉酸甲酯(MJ)是植物响应病原物、害虫等多种环境胁迫的共同信号分子,广泛存在于高等植物体内,并作为新型的植物激素,在调节植物生长发育、光合作用、抗逆反应等方面起着重要的作用,外施到植物体可以达到一定的逆境胁迫和调节效应[6,7]。有报道外源性MJ类化合物能有效刺激植物次生代谢物的生物合成,可引起多种植物次生产物的迅速积累[8]。目前有利用MJ研究诱导丹参毛状根中的有效成分的积累的报道[8],本研究旨在利用MJ作为诱导子,在丹参的生产中进行田间喷施实验,探索MJ对丹酚酸B的调控机制,以及MJ在丹参生产中的应用及丹参地上

6、部分的进一步合理开发提供研究依据。  1材料供试材料为丹参SalviamiltiorrhizaBge种苗,购于山东菏泽丹参种植基地,茉莉酸甲酯(MJ)为美国Sigma公司产品。实验地位于广东药学院大学城校区药用植物实验园。  2方法  2.1实验设计及处理实验设5个处理:(Ⅰ)对照(丹参喷清水);(Ⅱ)喷施MJ5×10-9mol/L;(Ⅲ)喷施MJ5×10-7mol/L;(Ⅳ)喷施MJ5×10-5mol/L;(Ⅴ)喷施MJ5×10-3mol/L。小区面积1m2,4次重复,随机区组实验设计。MJ和清水均在出齐三片复叶时喷施,将配好的各种浓

7、度的MJ溶液用喷壶均匀地喷到对应各组叶片上,以喷满全部叶片为度,喷后立即套上保鲜袋。喷施后48h取样,取每株苗的全部小叶片,将叶置60℃烘干箱烘6h,取出粉碎,过50目筛后用棕色广口瓶保存。  2.2丹参总酚酸含量测定  2.2.1原儿茶醛标准曲线制定精密称取原儿茶醛8.50mg,加水溶解并定容至20ml(425μg/ml),作为对照品溶液。分别精密吸取原儿茶醛对照品液0.4,0.8,1.2,1.6,2.0ml加水至2ml,分别加0.5%NaNO25.0ml放置5min,加入10%Al(NO3)30.5ml,放置5min,加入1mol/

8、LNaOH液5.0ml,放置10min后,以显色剂为空白,在500nm处测得吸光值。以浓度X为横坐标,吸光值Y为纵坐标,方程为Y=0.0014X+0.0004,r=0.9991,线性范围为26~130μg/

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