QBT 2409-1998 化妆品中氨基酸含量的测定

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1、QB/T2409一1998前言本标准是按GB/T1.1-1993《标准化工作导则第1单元:标准的起草与表述规则第1部分:标准编写的基本规定》进行编写。本标准是根据氨基酸在一定pH条件下,与苟三酮反应生成蓝紫色化合物进行比色定量原理而制定的。本标准由国家轻工业局行业管理司提出。本标准由全国化妆品标准化中心归口。本标准起草单位:上海市日用化学工业研究所。本标准主要起草人:甘平平、孔佳华、潘海燕、汤智凌中华人民共和国轻工行业标准QB/T2409一1998化妆品中氨基酸含量的测定1范围本标准规定了化妆品中氨基酸含量的

2、苟三酮比色测定法。本标准适用于化妆品中蛋白质及其水解液、氨基酸含量的测定。本方法最小检测浓度为0.01环。2引用标准下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T8170-1987数值修约规则3原理蛋白质物质经水解成氨基酸,而氨基酸在一定的pH条件下,与苟三酮反应生成蓝紫色化合物,对其进行比色定量测定,从而计算出相应的氨基酸含量。4试剂分析中应使用分析纯(AR)试剂,试验用水应为蒸馏

3、水或纯度相当的水。4.120o苟三酮溶液称取苟三酮(HG3-984)1.Og,溶于一定量热水中,待冷却后定容至50ml。该溶液每隔(2-3)天需重新配制。4.2磷酸盐缓冲溶液(pH=8.04)4.2.11/15mol/L磷酸二氢钾溶液称取磷酸二氢钾(GB/T1274)9.070g,溶于水中后定容至1L,4.2.21/15mol/L磷酸氢二钠溶液称取磷酸氢二钠(GB/T1263)23.876g,溶于水中后定容至1L.4.2.3取4.2.1溶液5.OmL于100mL容量瓶中,用4.2.2溶液稀释至刻度,摇匀。4.

4、3盐酸(GB/T622)6mol/L溶液4.4氨基酸标准溶液(200pg/mL)准确称取白氨酸(L-Leucine含量不小于98%)0.2000g,用水溶解并定容至100mL,摇匀后再吸取lOmL于l00ml容量瓶中加水稀释至刻度。4.5蜡块蜂蜡与石蜡之比为1:9。5仪器5.1分光光度计:波长范围400nm-700nm.国家轻工业局1998一11一25批准1999一06一01实施109Qs/T2409一19985.n了酸度计:分度值。.02.5.,J电磁搅拌器。5月月容量瓶:100,1000ml。5.‘︺移液

5、管:1,2,5,1OmL.5﹃卜U水浴锅。5.,1试管:30mmX200mm,5.OU分析天平:分度值。.OOOlg,5.OJ刻度试管:25,100mLo魂n..U烧杯:IOOmL,6侧定步班61标准曲线的绘制准确移取氨基酸标准溶液0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.OmL(相当于氨基酸0,40,80,120,160,200pg)分别里于25mL刻度试管中,加水补充至4mL,然后各加人2肠市三酮溶液和礴酸盐缓冲溶液各1mL,摇匀。置沸水浴中加热15min,取出冷却至室温,加水至刻度,摇匀。静215mi

6、n,用分光光度计在570nm波长下以水作参比,用lcm比色皿侧定试液的吸光度,绘制吸光度对氮基酸含#(pg)的标准曲线。6.2样品前处理准确称取样品约5g(准确至0.OOlg)于试管,加人6mol/L盐酸溶液约lOmL-20mL于沸水浴中水解约6h(对乳化体可先将试样里于沸水浴中破乳lh-2h)。加人约lg-2g蜡块约30min后,取出试管冷却。去除蜡块,将溶液移至100mL烧杯中,在酸度计上用俄液调节pH至7.5-8.0,再将溶液移人100MI容量瓶中并加水稀释至刻度,摇匀待用。6.3测定移取试液(6.2)

7、lml.-4mL置于25mL刻度试管中,以下按6.1侧定步吸进行。侧得吸光度,通过标准曲线计算氨基酸的含量,同时做一空白样。7结果衰示样品中氨基酸含a(以白氨酸计)按式(1)进行计算:(C,-Co)X100/V氮基酸含t(%)=X100“···⋯⋯。⋯”。二。。“二。”。(1)加Xlo,式中:C,—从标准曲线上查得样品的氛基酸的jt,pg;Co—从标准曲线上查得空白样的数值,P9,V—移取样品溶液的f,mL:m—样品量,9。所得结果按GB/T8170修约用两位小数表示。8精密度两次平行测定结果之差应不大于其平

8、均值的10%.

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