芒果苷原料药中杂质高芒果苷的含量测定论文

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1、芒果苷原料药中杂质高芒果苷的含量测定论文冯旭邓家刚覃洁萍席加喜钟伟东王胜波【摘要】目的分析测定芒果苷原料药中高芒果苷的含量。方法采用C18柱(大连依利特分析仪器有限公司,HypersilODS5μm,4.6mm×250mm),流动相为甲醇-0.1%磷酸(32∶68),流速1ml/min,检测波长258nm。结果高芒果苷在0.0424~0.848μg范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为97.8%,RSD=2.2%(n=6)。结论该方法简便.freelineHomomangiferini

2、nraedicineofMangiferinbyHPLC.MethodsHomomangiferincolumn(4.6mmID×250mm)obilephaseofmethanol-0.1%phosphoricacidsolution(32∶68)anddetectedata.ResultsThecalibrationcurveethodissimple,sensitiveandprecise.ItcanbeusedforthedeterminationofHomomangiferininraedicineofMa

3、ngifierin.KeyedicineofMangiferin;ThecontentofHomomangiferin;HPLC芒果苷(mangferin)是一种四羟基吡酮的碳糖苷,属双苯吡酮类黄酮类化合物,在多种植物中存在,如漆树科芒果树(Maniferaindica),扁桃树(Mangiferaperiscformis)的叶、果实、树皮等。现代药理研究表明,芒果苷具有抗氧化、抗细菌、抗病毒、免疫调节及抗肿瘤等多方面的生理活性和药理作用[1,2]。目前,“广西特色药用资源芒果叶深加工关键技术及产品的研究”已经被列入

4、国家科技攻关“西部开发”计划项目。芒果苷原料药是从芒果叶中提取的高纯度芒果苷,拟进一步开发成具有抗病毒等作用的新药。在进行芒果苷原料药的成分分析时,在其高效液相色谱图中除芒果苷峰外,还有一个在各批次原料药中反复出现的杂质色谱峰,其峰面积占相当比例且保留时间固定。该杂质经制备色谱分离纯化,并用紫外光谱、红外光谱、核磁共振波谱、质谱等方法确定其结构为高芒果苷(Homomangferin),其分析方法将另文发表。本文采用HPLC法分析测定芒果苷原料药中杂质高芒果苷的含量,为控制芒果苷原料药的质量提供实验依据。1仪器与试药美

5、国Agilent1100Series高效液相色谱仪:四元泵、在线脱气机、自动进样器(G1313A)、柱温箱、可变波长检测器,超纯水系统(MILLIPORE),SB3200-T超声清洗仪(功率:250R,MS鉴定为高芒果苷,经HPLC按峰面积归一化法检查纯度为100%)。芒果苷原料药从芒果叶中提取得到,为本院自制。2方法与结果2.1色谱条件C18柱(大连依利特分析仪器有限公司,HypersilODS5μm,4.6mm×250mm),流动相:甲醇-0.1%磷酸(32∶68),流速1ml/min,柱温30℃,检测波长258

6、nm。进样量10μl。理论塔板数以高芒果苷峰计应不低于2000。结果见图1~3。2.2对照品溶液的配制精密称取高芒果苷对照品10.60mg,置25ml量瓶中,加40%甲醇溶解并定容至刻度,即得高芒果苷对照品储备溶液。2.3供试样品溶液的制备取芒果苷原料药粉末约15mg,精密称定,置25ml量瓶中,加入40%甲醇溶解,稀释至刻度,摇匀,0.45μm滤膜滤过,即得。2.4线性关系考察精密吸取高芒果苷对照品储备液各0.1,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0ml置10ml量瓶中,加40%甲醇稀释至刻度,配置成系列浓度对照

7、品液,按“2.1”项下色谱条件测定峰面积。以峰面积A对进样量m(μg)进行回归,得标准曲线:A=4141.08m-0.810,r=0.9999,其线性范围为0.0424~0.848μg。2.5精密度实验取对照品溶液,连续进样6次,对峰面积进行考察,峰面积的RSD为0.11%,说明仪器精密度很好。2.6稳定性实验取同一份供试品溶液,分别于0,1,2,4,6,12h不同时间间隔点进样分析,对峰面积进行考察,峰面积的RSD为0.13%,结果表明样品溶液在12h稳定。2.7重复性实验取同一芒果苷原料药粉末6份精密称定,分别按

8、“2.3”项下供试品溶液的制备方法制备供试品溶液,在上述色谱条件下分别测定其色谱图,并计算其高芒果苷的含量,结果高芒果苷的平均含量为72.3mg/g,RSD为1.3%(n=6),说明该法重复性较好。2.8加样回收率实验精密称取已知高芒果苷含量的芒果苷原料药粉末6份各7.5mg,分别精密加入高芒果苷对照品储备液1.25ml,其余操作同“2.3”项

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