食管鳞状细胞癌中pinch蛋白的表达及意义论文

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1、食管鳞状细胞癌中PINCH蛋白的表达及意义论文朱振龙，杨艳红，张钰，王政民，崔冬生，张金廷王铭维，孙晓峰，AnnRearden【摘要】目的探讨PINCH蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组化ABC法检测10例正常食管粘膜组织和64例食管鳞状细胞癌组织中PINCH蛋白的表达.freelousCellCarcinomaKeyouscellcarcinoma;Esophagus;Immunohistochemistry在信号传导中，接头蛋白通过蛋白相互反应结构域而发挥作用，其中一个重要的结构域是一种双锌指结构，该结构是LIM（Lin11,Isl1andMec3Pro

2、teins）家族的特征1，2。PINCH（Particularyinterestingne连续切片，常规HE染色和免疫组织化学ABC法染色。所用兔抗人PINCH蛋白多克隆抗体由Prof.AnnRearden惠赠（DepartmentofPathology,UniversityofCalifornia,U.S.A.），二抗、三抗购自福州迈新生物技术开发有限公司。免疫组织化学主要染色过程：①切片脱蜡水化；②3%H2O2甲醇灭活内源性过氧化物酶；③依次滴加一抗、二抗和三抗；④DAB显色；⑤苏木精复染；⑥常规脱水，透明、封片。用已知阳性的乳腺癌组织作为阳性对照。1.4染色结果判断以组织间质中纤维母

3、细胞样细胞的胞膜及胞质出现棕黄色颗粒为阳性细胞。每例随机选出10个不重复、不重叠的高倍镜视野（10×40），计数阳性细胞数及所有细胞数，计算阳性细胞率=∑阳性细胞数/∑细胞数×100%。根据阳性细胞率进行分级，PINCH（），阳性细胞率＜20%；PINCH（+），阳性细胞率20%～50%；PINCH（++），阳性细胞率＞50%。1.5统计学分析用χ2检验进行统计学处理，P＜0.05为差异有显著意义。2结果2.1PINCH蛋白在正常食管粘膜组织中的表达在10例正常食管粘膜组织中，除1例在上皮层下1/3有灶性阳性表达外，见图1，其余所有被检组织，无论是上皮、还是间质，均无阳性表达。且这1例的

4、阳性表达部位主要在基底层细胞连接处和棘细胞层下1/3的细胞间连接处特别在棘细胞层细胞连接处表达明显，见图2。2.2PINCH蛋白在食管鳞癌组织中的表达在64例被检癌组织中，有36例PINCH蛋白在肿瘤间质中阳性表达，见图3。此外，尚发现有少量癌细胞的胞质及胞膜上有PINCH阳性表达，强度较弱，见图4。高倍镜下，阳性表达部位在癌细胞间的细胞间桥上，见图5。在36例间质阳性表达病例中，发现PINCH蛋白的表达呈明显异质性，同一切片不同区域阳性细胞多少不一，分布不均，阳性反应染色深浅不一；特别是其中的13例肿瘤中，在肿瘤浸润的边缘间质组织中PINCH蛋白表达更显著，见图6。统计学分析表明PINC

5、H蛋白在食管鳞癌间质中的阳性表达率为56.25%（36/64）明显高于正常食管粘膜组织0（0/10），二者差异有显著性（P＜0.05）。2.3PINCH蛋白表达与患者临床病理特征的关系研究结果显示，PINCH蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达与患者性别、年龄及肿瘤的组织学分级无明显相关性（P＞0.05）；但在淋巴结转移组其阳性表达率为90.00%，明显高于淋巴结无转移组40.91%，二者相比差异有显著性（P＜0.05），见表1。表1PINCH蛋白表达与食管鳞癌患者3讨论PINCH蛋白是一种含有5个LIM结构域的配体蛋白（adaptorprotein）蛋白，免疫印迹结果表明其单体相对分子质量为3.

6、7×1044。它与整合素一起参与了细胞的粘附作用，调节细胞的形态改变和迁移。然而PINCH并不是直接与整合素相结合，而是借其LIM结构域的第一个双锌指结构与ILK（integrinlinkedkinase,ILK）N端的ANK序列相结合，而ILK的C端则与整合素的胞质域相结合，这样它们三者共同形成了信号复合物来参与整合素的信号传导通路5。新近研究发现，PINCH蛋白还参与生长因子信号传导系统，其借助它的LIM结构域的第4个双锌指结构与Nck2相结合。Nck2是一种结合蛋白，它含有SH2/SH3结构域，其中SH3结构域能与胰岛素效应底物1（IRS1）相结合，另外它的C端SH2结构域

7、能识别配体激活的EGF和PDGFβ受体而参与生长因子信号传导系统6。由此可看出，PINCH通过它的第1和第4个LIM结构域而把ILK和Nck2连接起来，参与了整合素和生长因子的信号传导系统，在整合素和生长因子信号传导通路中PINCH蛋白处于一个关键的“十字”交汇点处，相当于一个“三通管”的作用。所以在肿瘤的发生、发展中可能起着十分重要的作用。Jessica等4应用免疫印迹法和免疫组化法对33例乳腺癌（21例导管癌，6