石韦醇提物抑菌活性的初步研究论文

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1、石韦醇提物抑菌活性的初步研究论文李雁群，黎桦，陈超君，覃锋，王爱勤，黄荣韶，林伟国【摘要】目的研究石韦地上部醇提物的石油醚、醋酸乙酯、正丁醇和水4个极性部位对大肠杆菌、普通变形杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、藤黄八叠球菌、黄曲霉、青霉、黑曲霉等8种常见菌的抑制作用。方法采用纸片扩散法进行抑菌试验，观察并测量抑菌环的大小。结果石韦醇提物的醋酸乙酯、正丁醇和水相萃取物对供试细菌均有不同程度的抑制作用。其中正丁醇相萃取物和水相萃取物的抑菌效果较好。石油醚相萃取物对这8种供试菌均无明显抑菌效果.freel的石壁

2、或树干上。据研究，石韦的主要药用成分是芒果苷（具抗菌、抗单纯疱疹病毒）、异芒果苷（镇咳祛痰、抗单纯疱疹病毒作用）、绿原酸（抗菌、兴奋中枢神经等作用）［2～4］，但有关石韦化学成分的抑菌性研究却很少，药用状况复杂，为深入开发这一丰富自然资源，本文对石韦地上部醇提物石油醚、醋酸乙酯、正丁醇、水不同极性溶剂得到的各部位提取物进行抑菌活性研究，以期探明石韦主要抑菌活性成分的极性部位和适宜的提取溶剂，并为石韦的合理开发提供依据。1仪器与材料1.1仪器与材料超净工作台、手提式灭菌锅、恒温控制箱、冰箱、游标卡尺、镊子、接

3、种针、三角瓶等；石油醚、醋酸乙酯、乙醇、正丁醇等试剂均为分析纯。实验材料于200711采自广西武鸣大明山国家级水源林保护区海拔1200m的沿路石壁上或乱石堆环境中，经广西大学植物分类学黎桦副教授鉴定为石韦P.lingua，将地上部洗净，自然风干后磨成粉末，过40目筛备用。1.2供试菌种供试细菌：大肠杆菌Escherichiacoli，普通变形杆菌Proteusvulgaris，金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus，枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis，藤黄八叠球菌Sarcinal

4、utea。供试真菌：黄曲霉Aspergillusflavas，青霉Penicilliumsp.，黑曲霉Aspergillusniger。以上菌种均由广西大学农学院植物保护系微生物学实验室提供。1.3培养基细菌用营养琼脂培养基培养，真菌用马铃薯培养基［5］培养。2方法2.1菌悬液或孢子悬液制备采用平板菌落计数法［5］。将受试菌在斜面培养基活化2～3代后，用接种环从斜面上刮菌苔两环，分别收集到内盛有100ml无菌水的250ml的三角瓶中，将受试菌配成终浓度0.1×107个/ml的菌悬液，备用。2.2样液制备石韦

5、地上部醇提取物不同极性部位的制备：称取粉碎好的石韦样品4kg，用体积分数90%乙醇将样品浸泡3次（料液比1∶15），每次7d，提取液在40°C下减压蒸馏，回收溶剂，得乙醇浸膏。将乙醇浸膏悬浮于蒸馏水，先后用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇和蒸馏水萃取，分别得石油醚、醋酸乙酯、正丁醇和水4部分萃取物，同前浓缩，即得各极性部位。2.3石韦抗菌作用的检测方法采用纸片扩散法进行抑菌试验［6］。在超净工作台上将灭菌后的牛肉蛋白胨培养基倒入培养皿中，每皿15ml，放置冷却。用无菌移液管取0.1ml细菌液加于平皿中均匀涂布于平板

6、（内径90mm）表面后。取经灭菌的标准滤纸（直径6mm），分别蘸取石韦醇提物的不同极性部位并贴于平板表面，每个培养皿放3片滤纸，以蒸馏水、石油醚为对照液。细菌于37℃培养24h、真菌于28℃培养48h后，检测抑菌环的有无并测量抑菌环直径，每种提取液对8种供试菌重复测定3次，结果取平均值。出现抑菌环的菌株才作MIC检测。2.4最小抑菌质量浓度的检测采用纸片扩散法方法同“2.3”，将各溶液稀释成100，50，25，12.5，6.25，3.125mg/ml的质量浓度梯度，以未见抑菌环的最高质量浓度为MIC。3结果

7、3.1不同极性部位的抑菌活性的比较对石韦地上部醇提物不同极性部位的抑菌活性进行比较,这4种溶剂极性大小为：石油醚＜醋酸乙酯＜正丁醇＜水。从表1可以看出，石韦醇提物的不同极性部位对5种细菌的影响作用不同，并存在一定的差异，而且同一极性部分对不同种细菌的抑制效果也不同。对5种细菌抑菌效果以极性较强的提取物较为突出，正丁醇相和水相对藤黄八叠球菌抑菌较强（见表1），这可能是由于正丁醇相和水相含有活性较高的抑菌成分，化学成分较为多样且含量高。可见,石韦地上部醇提物不同极性部位抑菌活性因萃取溶剂不同、菌种不同而有所差异

8、,这是由于不同极性提取物所含化学成分的类别和含量不同所致。这4部分对金黄色葡萄球菌均无明显抑菌作用，对大肠杆菌抑制作用较弱，而石油醚相对这5种供试菌均无明显抑菌作用。醋酸乙酯相对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌没有抑菌作用，正丁醇相对金黄色葡萄球菌也没明显抑菌作用。对照实验均无明显抑菌环，地上部醇提物不同极性部位对霉菌均无明显抑菌作用。表1石韦地上部醇提物不同极性部位对8种菌的抑制作用（略）3.2最小抑菌浓度比较由表2可