资源描述：
《超高效液相色谱法测定龙胆药材中的獐芽菜苦苷和龙胆苦苷论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、超高效液相色谱法测定龙胆药材中的獐芽菜苦苷和龙胆苦苷论文曹悦，左代英，吴晓兰，刘敬武，孙启时【摘要】目的建立超高效液相色谱（UPLC）法测定龙胆药材中活性成分的方法。方法采用L9（34）正交表安排实验，确定最佳提取条件。色谱柱：ShimadzuC18（3.0mm×75mm,1.7μm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸（V∶V=5.5∶94.5），流速0.80ml/min；检测波长235,270nm；柱温为40℃。结果獐芽菜苦苷、龙胆苦苷分别在0.1548～1.8580mg/ml，0.322～5.152m
2、g/ml范围内呈良好的线性关系.freelethodforthedeterminationofsarinandgentiopicrosideinrootofGentianascabraBge.byUPLC.MethodsByL9（34）orthogonaldesign,anoptimalconditioned.TheseparationedonShimadzuC18（3.0mm×75mm,1.7μm）column,themobilephasel/min,thedetection,270nm,andt
3、hecolumntemperatureethodhadgoodlinearityintherangeof0.322～5.152mg/ml,andtheaveragerecoveryarin.Ithadgoodlinearityintherangeof0.1548～1.858mg/ml,andtheaveragerecoveryethodissimple,accurate,.freelarin;Gentiopicroside龙胆为龙胆科植物条叶龙胆GentianamanshuricaKitag．，龙胆
4、GentianascabraBge．，三花龙胆GentianatrifloraPall．或坚龙胆GentianarigescensFranch．的干燥根及根茎。具有清热燥湿，泻肝胆火的作用。用于湿热黄疸，阴肿阴痒，带下，强中，湿疹瘙痒，目赤，耳聋，胁痛，口苦，惊风抽搐［1］。龙胆的主要有效成分为环烯醚萜类化合物，有龙胆苦苷（Gentiopicroside）、獐牙菜苦苷（Sarin）及獐牙菜苷（Sin。2.2检测波长的选择取獐芽菜苦苷和龙胆苦苷对照品适量，加甲醇制成浓度为0.1mg/ml的溶液，在20
5、0～400nm进行紫外扫描，结果獐芽菜苦苷的最大吸收波长在235nm，龙胆苦苷的最大吸收波长在270nm。2.3对照品溶液的制备分别精密称取獐芽菜苦苷和龙胆苦苷对照品适量,加甲醇制成0.15mg/ml和0.3mg/ml的溶液。2.4供试品溶液的制备取龙胆药材，粉碎成中粉，取1g置具塞三角瓶中,精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理30min（严格控制水温，15min停1次），冷却至室温，以甲醇补足减失的重量，摇匀，经0.45μm微孔滤膜滤过，作为测定獐芽菜苦苷的样品溶液，精密吸取上述溶液5ml，置
6、25ml量瓶中加甲醇溶液稀释至刻度，作为测定龙胆苦苷的样品溶液。2.5色谱条件色谱柱ShimadzuC18（3.0mm×75mm,1.7μm）；流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液（5.5∶94.5），流速0.8ml/min，检测波长分别为235nm和270nm，柱温40℃，进样量4μl。2.6线性关系分别精密量取獐芽菜苦苷对照品溶液（c=0.1548mg/ml）1，2，4，6μl、母液（c=0.3097mg/ml）4，6μl注入液相色谱仪中，测定峰面积；分别精密量取龙胆苦苷对照品溶液，（c=0.322m
7、g/ml）1，2，4，8μl、母液（c=0.644mg/ml）6μl、8μl注入液相色谱仪中，按照“2.5”项的方法测定峰面积，结果表明，獐芽菜苦苷、龙胆苦苷质量浓度（X）在0.1548～1.8580mg/ml和0.322～5.152mg/ml与峰面积（Y）呈线性关系。回归方程分别为Y=889751X-9916.5，r=0.9998;Y=805953X+25881,r=0.9998。2.7精密度实验精密吸取同一供试品溶液4μl，连续进样5次，獐芽菜苦苷和龙胆苦苷的峰面积RSD分别为1.92％,0.3
8、2％（n=5）。2.8重复性实验精密称取龙胆中粉1g,按“2.4”项制备6份样品溶液，测定，计算獐芽菜苦苷和龙胆苦苷的含量，其RSD分别为0.79％,2.0％（n=6）。2.9稳定性实验取同一供试品溶液分别在0，2，4，6，8，12，16h测定，结果表明獐芽菜苦苷和龙胆苦苷在16h内稳定性良好，峰面积RSD分别为1.65％,0.31％。2.10回收率实验分别精密称取已知质量分数的龙胆药材粉末，獐芽菜苦苷0.5g,龙胆苦苷0.1g,制备样品溶液，测定，结果獐芽菜苦苷的平
