正交实验法优选当归补血汤提取工艺的研究论文

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1、正交实验法优选当归补血汤提取工艺的研究论文【摘要】目的优选当归补血汤的最佳提取工艺条件。方法以当归补血汤中阿魏酸含量为指标,对影响提取的重要因素A提取时间，B加水量，C提取次数进行L9(34)正交实验设计。结果最佳提取工艺为药材加12倍量水，提取两次，提取2h/次。结论优选得到的提取工艺稳定可行。【关键词】当归补血汤阿魏酸正交实验Abstract：ObjectiveTostudythebestextractionprocessofTangkueiBlood-supplementingdecoction.MethodsUsingtheorthogonaldesignoun

2、tofes,extractedhour)and3levelstodeterminethecontentofferulicacidastheindexofevaluation.ResultsTheoptimumconditionsfortheextractionofferulicacidesofelasted2hours.ConclusionTheextractionprocessforferulicacidfromTangkueiBlood-supplementingdecoctionentingdecoction;Ferulicacid;Orthogonaldesig

3、n当归补血汤出自李东垣《内外伤辨惑论》。该方由当归、黄芪两味药按1∶5的比例组成，是经典的气血双补名方，主治劳倦内伤、气弱血虚、阳浮外越、妇人经行、产后血虚发热头痛，以及疮疡溃后久不愈合等症。阿魏酸是中药当归中的主要有效成分之一.freelmit高效液相色谱仪系列（P680型四元低压梯度泵，UVD170U型紫外检测器，CHROMELEON6.60色谱工作站）；旋转蒸发仪RE52-99（上海亚荣生化仪器厂）；TDL80-2B台式离心机（上海安亭科学仪器厂）；BP211D电子分析天平（德国sartorius公司）。1.2药品与试剂阿魏酸标准品，购自中国药品生物制品检定所，批

4、号：0773-9910；黄芪（产地内蒙古）、当归（产地甘肃）饮片均购自南京市药业股份有限公司。甲醇（色谱纯），乙腈（色谱纯），纯净水，其余试剂均为分析纯。2方法2.1正交实验设计根据传统汤剂的提取方法以及药材所含成分的理化性质的需要,.freell的棕色容量瓶内，加入冰醋酸0.5ml，加蒸馏水定容至刻度，摇匀，定容，即得样品溶液。2.3阿魏酸含量测定方法2.3.1色谱条件色谱柱：KromasilC18（150mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇0.5％冰醋酸水溶液（35∶65）；流速：0.8ml/min；检测波长：322nm；柱温：40℃。2.3.2标准曲线的绘制

5、取干燥恒重的阿魏酸对照品适量，精密称定，加水溶解，稀释制成不同浓度溶液，各精密吸取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。以对照品浓度为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程为y=8.7963x+1.0913，r=0.9994。结果表明在2.908～23.264μg/ml范围内阿魏酸的浓度与峰面积呈良好的线性关系。2.3.3样品溶液的预处理及测定采用甲醇沉淀法，取样品溶液10ml，置50ml棕色容量瓶中，加甲醇定容至刻度；精密吸取定容后溶液10ml，3000r/min离心10min；取上清液，0.22μm微孔滤膜滤过，精密吸取20μl注入液相色谱仪，测定，

6、即得。结果见表2。表2正交实验结果（略）2.3.4回收率实验采用加样回收法，取已知阿魏酸浓度（10.768μg/ml）的样品溶液5份，分别加入精密称定的适量阿魏酸对照品，测定，结果平均回收率为97.63％，RSD为2.27％。2.3.5精密度实验取浓度为13.456μg/ml对照品溶液，按含量测定项下方法，重复测定6次，记录峰面积值，结果RSD为0.85％，表明本法精密度良好。2.3.6稳定性实验取已知阿魏酸浓度（10.768μg/ml）的样品，于室温下放置，分别于0，2，4，6，8h按2.3.3项下方法处理测定。结果RSD为2.85％，表明本溶液8h内稳定性符合要求。

7、2.3.7验证实验根据筛选得到的最佳工艺提取3批样品，测定阿魏酸含量。3结果3.1正交实验结果正交实验结果见表2，利用STATISTICA软件对正交实验结果作方差分析，所得方差分析结果见表3。表3方差分析（略）直观分析结果表明，在所考察的影响因素中，重要性依次为ACB。A因素中A3A2A1；B因素中B3B1B2；C因素中C2C3C1。方差分析结果表明：A因素、C因素的影响具有显著性意义（P0.05）；B因素的影响无显著性意义（P0.05）。因此，确定最佳提取条件为A3B3C2，即加12倍量水，提取2次，2h/次。3.2验证实验结果根据筛选