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1、关于龙葵果中原花青素优化提取试验研究 摘要以野生龙葵果为原料,以原花青素提取率为考察指标,研究提取溶剂浓度、料液比、提取温度、提取时间等因素对原花青素提取效果的影响。通过正交试验,确定野生龙葵果中原花青素的最佳提取工艺条件为:提取溶剂为60%的乙醇,料液比1∶15,提取温度25℃,提取时间80min。此优化条件下提取野生龙葵果中原花青素的含量最高,达0.0552%。 关键词龙葵果;原花青素;优化提取 中图分类号TS255.4Y=2.0458C+0.0093(R2=0.9953) 其中,Y为吸光度值;C为原花青素的浓度(μg/mL);R
2、为校正系数。 1.4.4原花青素含量测定。准确量取1mL提取液,加入5mL现配制的显色剂,在25℃条件下反应15min,以60%的乙醇和显色剂混合溶液为空白,在500nm处测定吸光度值[13]。 2结果与分析 2.1提取温度的选择 由图1可知,随着提取温度的升高,原花青素的提取效果增强。因为温度升高,分子运动速度加快,渗透、扩散、溶解速度加快,同时高温可以引起细胞膜结构的变化,使原花青素由龙葵果的外层细胞转移到溶剂中,但是高温也使原花青素的结构被氧化破坏,导致其提取效果下降。因此,提取温度以25℃为宜。 2.2提取溶剂料液比的
3、确定 由图2可知,在料液比为1∶(5~15)范围内,原花青素吸光度显著增加,料液比1∶15为原花青素吸光度最高点,当料液比增大到一定程度时,提取效果趋于稳定,即一定比例的溶剂已将有效成分基本溶出完全。因此,最适宜料液比为1∶15。 2.3提取溶剂浓度的确定 由图3可知,提取溶剂浓度在30%~60%(v/v)区间,原花青素吸光度随乙醇浓度的增大而提高,但当乙醇浓度大于70%(v/v)以后,原花青素吸光度开始下降。根据有机溶剂的相似相溶原理,原花青素的溶出度与其本身的极性及溶剂的极性相关,极性相似可以达到最大溶出度。试验过程中也发现低浓度
4、的乙醇提取溶液较浑浊,这主要是由于低浓度的乙醇液中含有更多蛋白的原因。本试验在乙醇浓度为60%(v/v)时,吸光度达到峰值,因此乙醇浓度控制在50%~70%(v/v)较好。 2.4提取时间的确定 由图4可知,原花青素提取效果随时间不同而不同。当提取达到一定时间时,龙葵果内外有效成分浓度达到平衡,提取效果最好;随着时间的进一步延长,其提取效果有所下降,因为原花青素在溶液中长时间受热可能使部分酚结构被破坏;但是,如果提取时间过短,原花青素则不能很快从龙葵果细胞中溶出。因此,提取时间以80min为宜。 2.5pH值的影响及提取次数的确定
5、 由图5可知,原花青素在偏酸性较稳定,在pH值为3或4左右提取效果较好,尤其是在3时达到最高点,以后随着pH值的增加,含量反而下降,故以pH值为3时提取效果最好。浸提次数过多原花青素会在乙醇水浴蒸发中损失部分,影响含量测定。原花青素为不稳定物质,随时间延长,原花青素会有部分衰减,稳定性减弱。综合考虑,以浸提2次为宜。 2.6正交试验确定最佳的提取工艺 由表2可知,各种因素对提取效果影响的主次顺序依次为提取温度>乙醇浓度>料液比>提取时间。故选用的最佳组合为A1B1C2D2,即料液比为1∶15,用60%乙醇,在25℃温
6、度下提取2次,每次提取时间80min。此时野生龙葵果中原花青素的百分含量最大,达到0.0552%。 3结论 龙葵果中原花青素优化提取试验结果表明,原花青素在料液比为1∶15,用60%乙醇,在25℃温度下提取2次,每次提取时间80min时获得的原花青素的百分含量最大,达到0.0552%。中国.l.编辑整理。 4
