苯酚硫酸比色法测定红毛五加皮多糖的含量论文

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1、苯酚硫酸比色法测定红毛五加皮多糖的含量论文钟世红,卫莹芳,古锐,黄小雪,谢武超,杨湘【摘要】目的建立红毛五加皮多糖的含量测定方法,对不同产地样品进行测定。方法采用苯酚-硫酸比色法。结果葡萄糖的线性范围为24.05~54.11μg/ml,平均加样回收率为97.80%.freelinethecontentofpolysaccharidesincortexacanthopanacisgiraldiifromdifferentregions.MethodsPhenol-sulfuricacidcolorimetryinethecontentofpolysaccharides.Result

2、sThelinearrangeofglucosel.Theaveragerecoveryethodisrapid,accurateandcanbeusedforthequantitycontrolofA.GiraldiiHarms.Thepolysaccharidescontentofbarkshouldnotbeloisvaluableinsomedegree.Keyetry  苯酚硫酸比色法测定红毛五加皮多糖的含量论文钟世红,卫莹芳,古锐,黄小雪,谢武超,杨湘【摘要】目的建立红毛五加皮多糖的含量测定方法,对不同产地样品进行测定。方法采用苯酚-硫酸比色法。结果葡萄糖的线性范围为

3、24.05~54.11μg/ml,平均加样回收率为97.80%.freelinethecontentofpolysaccharidesincortexacanthopanacisgiraldiifromdifferentregions.MethodsPhenol-sulfuricacidcolorimetryinethecontentofpolysaccharides.ResultsThelinearrangeofglucosel.Theaveragerecoveryethodisrapid,accurateandcanbeusedforthequantitycontrolofA.

4、GiraldiiHarms.Thepolysaccharidescontentofbarkshouldnotbeloisvaluableinsomedegree.Keyetry红毛五加皮为四川地区的习用药材和岷江上游羌民族特色药材,收载于《四川省中药材标准》1987年版,具有祛风湿、强筋骨、利关节之功效。作为红毛五加中的一类主要有效成分,红毛五加多糖(AGP)已被广泛证实具有提高免疫[1]、抗肿瘤[2]、抗病毒[3]等药理活性。因此,多糖含量是评价红毛五加皮质量的重要指标。本研究建立了以苯酚-硫酸比色法测定红毛五加皮中多糖的方法,并对不同产地样品进行了含量测定,以期为该药材的质量控

5、制提供科学依据。1仪器与试药1.1仪器UV1102紫外/可见分光光度计(上海天美),电子天平(SartoriusBS224S北京)。1.2试药试剂D-葡萄糖对照品(分析纯,成都市科龙化工试剂厂)。4%苯酚为182℃馏分加蒸馏水配制而成,乙醇、丙酮等试剂均为分析纯。水为蒸馏水。1.3样品自采或购买,经成都中医药大学卫莹芳教授鉴定为红毛五加AcanthopanaxgiraldiiHarms的干燥茎皮及木心。样品均粉碎为中粉。2方法与结果2.1红毛五加多糖的提取与精制称取红毛五加茎皮粉末60g,置索氏提取器中,依次用石油醚(60~90℃)、乙醚、80%乙醇回流提取至无色(各约8h)。残渣

6、挥干乙醇,每次加水800ml回流提取1h,共提取4次,趁热过滤,合并滤液,减压浓缩至约200ml。加95%乙醇使含醇量为80%,搅匀,冰箱中静置过夜,抽滤得粗多糖。加水配成1%粗多糖溶液,Sevage法脱蛋白[4]。加入30%H2O2脱色[5]。所得溶液减压浓缩至约200ml,加入95%乙醇使溶液含醇量为80%,搅匀,冰箱中静置过夜,抽滤得下层多糖。以无水乙醇、丙酮、乙醚依次洗涤多糖,60℃真空干燥,得黄白色的红毛五加精多糖粉末。2.2供试品溶液制备方法考察称取红毛五加茎皮粉末约1.0g,共4份,精密称定,置索氏提取器中,加入80%乙醇回流提取至无色。残渣挥干乙醇,每次加水适量回流

7、提取30min,其中2份提取3次,另2份提取4次,抽滤,合并滤液置500ml容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度。分别精密吸取各供试品溶液0.8ml,各加入1.2ml蒸馏水、4%苯酚溶液1.0ml,摇匀,加入浓硫酸5.0ml,40℃水浴加热15min,置冰水中冷却5min,于487nm测定吸光度。结果无明显差异。遂确定供试品溶液的制备方法为:精密称取样品粉末约1.0g,置索氏提取器中,加入80%乙醇回流提取至无色。残渣挥干乙醇,加水适量回流提取3次,30min/次,抽滤,合并

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