万年蒿提取物对小鼠肝损伤的保护作用

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1、万年蒿提取物对小鼠肝损伤的保护作用【摘要】目的探讨万年蒿超临界萃取物和水提液对小鼠肝脏损伤的保护作用。方法分别以万年蒿超临界萃取物和水提液灌胃小鼠,并以CCl4制成小鼠急性肝脏损伤模型，测定小鼠血清中门冬氨酸氨基转移酶(AST）和丙氨酸氨基转移酶(ALT）含量，观察万年蒿不同提取物对肝脏损伤的保护作用。结果和模型组相比，万年蒿水提液高剂量组和超临界萃取物高剂量组能够明显降低小鼠的AST，ALT含量(P<0.05或P<0.001)。结论万年蒿提取物具有较好的保肝作用。【关键词】万年蒿；四氯化碳；肝损伤；超临界萃取　　Abstract：ObjectiveTost

2、udytheprotectiveeffectsofsupercriticalfluidextraction(SFE)extractsandisiasacrorumLedeb.onacutehepaticinjuryinmice.MethodsThemiceousemodelofacutehepaticinjurylevelsofALTandASTofthemiceeasured.ResultsThehigh-dosegroupsofparedtomodelgroup(P<0.05orP<0.001).ConclusionTheextractsofArtemi

3、siasacrorumLedeb.haveprotectiveeffectsagainsthepaticinjury.　　KeyisiasacrorumLedeb;CCl4;Hepaticinjury;Supercriticalfluidextraction(SFE)　　万年蒿为菊科植物万年蒿ArtemisiasacrorumLedeb.干燥地上部分，也可为全草。有利湿退黄、凉血止血作用［1～3］。民间常用其治疗急慢性肝炎、妇女内寒证等。东北某些地区在治疗黄疸等肝炎症状时，更愿意选用万年蒿替代茵陈蒿作为首选药物。　　本文通过测定小鼠血浆中门冬氨酸氨基转移酶(AST）和丙

4、氨酸氨基转移酶(ALT）等的含量，研究了万年蒿的超临界萃取等四种提取物对CCl4所致小鼠肝损伤的影响，为进一步研究万年蒿的保肝作用打下了基础。　　1器材　　1.1药材与试剂万年蒿采集自吉林省延吉市溪洞，由延边大学药学院生药学教研室刘永镇教授鉴定为ArtemisiasacrorumLedeb.的地上部分；四氯化碳（天津开发区海晶精细化工厂）；试剂盒（ALT，AST）（北京北化康泰临床试剂有限公司）；羧甲基纤维素钠；吐温-80等。　　1.2仪器沈阳天诚超临界流体萃取仪（TC-SFE-50-5-5-120S）；紫外分光光度计（上海棱光技术有限公司，S22PC）；R2060旋转

5、蒸发仪（上海申生科技有限公司，R2060）；离心机（德国制造，型号：IGMA95308）；200μl移液器（pipetman,France）,1000μl移液器（XL3000i,Denville）。　　1.3动物昆明种小鼠,60只雄性，22～25g，由延边大学医学院动物科提供。　　2方法　　2.1提取方法　　2.1.1万年蒿水提法取500g万年蒿加入适量水中浸泡，1h后，加热至沸，提取两次，1h/次，合并滤液，用旋转蒸发仪浓缩。参考万年蒿的成人剂量，通过体表面积转换，配制成灌胃小鼠的低、高两个浓度，分别为：6.5g(相当于生药量)/kg，26.0g(相当于生药量)/kg

6、。　　2.1.2超临界萃取法投药800g万年蒿于超临界萃取仪里，分别进行了两次萃取。第一次没有提携剂，第二次以无水乙醇为提携剂。具体实验条件及结果如下。　　表1万年蒿超临界萃取条件（略）　　2.2超临界萃取物的配制取适量无水乙醇作为提携剂的超临界萃取物，用少量吐温-80和配制好的0.05g/ml羧甲基纤维素钠溶液作为溶剂配制成低、高两种浓度：0.45，0.90g/kg（这两个浓度均以超临界萃取物的质量绝对值进行计算）。　　2.3动物实验　　2.3.1实验方法从动物科取回小鼠后，放置于药学院动物室，使其适应环境数日。小鼠随机分成6组，每组10只：第1组：正常组;第2组：急

7、性肝损伤模型组;第3组：万年蒿的水提液低剂量组（6.5g/kg）;第4组：万年蒿的水提液高剂量组（26.0g/kg）;第5组：万年蒿超临界萃取物低剂量组(0.45g/kg);第6组：万年蒿超临界萃取物高剂量组(0.90g/kg)。正常组和模型组灌胃蒸馏水，其余各组分别灌胃上述剂量的相应药物，连续4d。第5天上午灌胃一次，过2h正常组腹腔注射相应的生理盐水，其它各组小鼠腹腔注射0.1%CCl4豆油溶液0.1ml/10g。24h后由小鼠颈动脉取血（取血前12h前开始禁食）,离心机3000r/min分离血清,根据试剂盒方法测定AST，ALT［4