正交法优选盐炙骨碎补的最佳炮制工艺

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1、正交法优选盐炙骨碎补的最佳炮制工艺【摘要】目的研究骨碎补盐炙最佳工艺。方法以柚皮苷的含量为指标选择盐用量、浸泡时间、砂烫温度3个因素，用L9(34)正交设计表，采用方差分析法，对骨碎补进行盐炙工艺优选。结果浸泡时间对骨碎补中柚皮苷含量影响显著，最佳炮制工艺为：每20g药材用30ml盐水（含4g盐），浸泡8h，在190℃下砂烫4min。结论优选了盐炙骨碎补的最佳炮制工艺。.L.编辑。【关键词】骨碎补盐炙正交实验柚皮苷骨碎补为水龙骨科植物槲蕨DrynariafortunEi（Kunze）J.Sm.的干燥根茎，具有补肾强骨、续筋止痛等功效，常用于治疗肾虚腰痛，耳聋耳鸣，牙齿松动，跌打闪挫

2、，筋骨折伤；外治斑秃，白癜风［1］。骨碎补的炮制最早载于南北朝刘宋时期雷敩的《雷公炮炙论》：“骨碎补，凡使，采得后，先用铜刀刮去黄赤毛尽，便细切，用蜜拌令润，架柳甑蒸一日后，暴干用”。现代药典收载的炮制方法为砂烫法，有研究表明，经砂烫后，可以使骨碎补中的活性成分柚皮苷［2］溶出率提高。河砂只是作为一种传热体，而用其他辅料炮制的作用如何？很少有人研究。宋代《圣济总录》记载“盐炒令黄”，元代《瑞竹堂经验方》曰：“去毛，盐炒”。现代在其它地方炮制规范上也有盐炙的方法如《四川省中药饮片炮制规范》收载了盐炙骨碎补。古人认为骨碎补盐炙走肾，益增补肾之功力［3］，但现代对盐炙法研究甚少，因此为了

3、探讨骨碎补盐炙后的炮制作用和化学成分变化，本文对其炮制工艺进行了优化，为进一步研究骨碎补的炮制作用提供了科学依据。　　1仪器与试药　　1.1仪器烘箱（l水溶解），拌匀闷润8h，砂烫至鼓起，迅速出锅，筛去砂，放凉，粉碎，过20目筛，备用。先烫后润品：取骨碎补生品20g，180℃砂烫至鼓起，将砂烫品加盐水（盐4g，用30ml水溶解），拌匀闷润8h，烘干，放凉，粉碎，过20目筛，备用。　　2.1.2柚皮苷含量测定对照品溶液的制备：取在110℃干燥至恒重的柚皮苷对照品3.22mg，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀,即得每毫升含柚皮苷0.0644mg的对照品溶液。供试品溶液的制备：分

4、别称取各炮制品粗粉约0.25g，精密称定，加甲醇30ml，至水浴锅上加热回流3h，放冷，滤过，滤液至50ml量瓶中，用少量甲醇分数次洗涤容器，加甲醇至刻度，摇匀，即得，备用。色谱条件色谱柱：shim-packVPODS（4.6mm×150mm）；流动相：甲醇醋酸水（35∶4∶65）；检测波长：283nm；柱温为室温；流速为1ml/min。结果见表1。表1盐制品与砂烫品柚皮苷含量比较（略）由表1可见，先润后烫品柚皮苷含量最高，因此确定先用盐水闷润再砂烫至鼓起的炮制方法，并对其具体工艺参数进行优选。　　2.2单因素实验考察　　2.2.1溶液用量的考察取生品骨碎补6份，各20g，放

5、入密闭容器内，分别加入已配好的盐溶液15，20，25，30，35，40ml，浸泡12h，结果见表2。表2溶液用量考察结果（略）由上表确定盐溶液的用量为每20g药材用30ml盐溶液浸泡。　　2.2.2盐用量的考察取生品骨碎补5份，各20g，放入密闭容器内，分别用不同盐用量配溶液30ml，浸泡12h后，进行砂烫，将温度固定为200℃，时间固定为4min，砂用量固定为药材的30倍。考察不同盐用量对评价指标的影响，见表3。表3盐用量考察结果（略）.L.编辑。结果表明不同盐用量下，柚皮苷的含量有所不同，说明盐用量是影响柚皮苷含量的因素。　　2.2.3浸泡时间的考察取生品骨碎补7份，各20g，

6、放入密闭容器内，分别加入已配好的含盐4g的盐溶液30ml，浸泡不同时间后，进行砂烫，将温度固定为200℃，时间固定为4min，砂用量固定为药材的30倍。考察不同浸泡时间对评价指标的影响。见表4。表4浸泡时间考察结果（略）结果表明不同浸泡时间下，柚皮苷的含量有所不同。说明浸泡时间是影响柚皮苷含量的因素。　　2.2.4砂烫温度的考察取生品骨碎补6份，各20g，放入密闭容器内，分别加入已配好的含盐4g的盐溶液30ml，浸泡8h后，进行砂烫，时间固定为4min，砂用量固定为药材的30倍。考察不同盐浸后砂烫温度对评价指标的影响。结果见表5。表5砂烫温度考察结果（略）结果表明不同砂烫温度下，柚

7、皮苷的含量有所不同,说明砂烫温度是影响柚皮苷含量的因素。　　2.3正交实验　　从单因素实验可见不同盐用量、浸泡时间、砂烫温度对评价指标有较大影响，故以盐用量、浸泡时间、砂烫温度为考察因素，按L9（34）正交实验表进行实验，其因素水平表见表6，正交实验设计表见表7，方差分析见表8。表6因素水平（略）表7正交实验设计（略）表8柚皮苷含量方差分析（略）由以上方差分析结果可得出，盐炙骨碎补的影响因素的主次顺序为：B（浸泡时间）>A（盐用量）>C（砂烫温度），且浸泡