中风芪红利水胶囊对脑缺血大鼠脑组织的影响

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1、中风芪红利水胶囊对脑缺血大鼠脑组织的影响作者：路永坤，冯国磊，关运祥，秦秀德，王新志【摘要】目的评价中风芪红利水胶囊对急性脑缺血大鼠脑组织中兴奋性氨基酸及水含量的影响。方法采用左侧大脑中动脉阻塞模型，72只清洁级雄性ethodsTheleftmiddlecerebralarteryocclusion(LLMCAO)modelployed.Seventytale-operationgroup,modelgroup,controlgroup(BuchangNaoxinTonggroup)andhighdose,mi

2、ddledose,loinisteredrespectively,tate),Asp(aspartate)easuredthroughthemethodofHPLC(highperformanceliquidchromatography).iddledosegroup,loiagroup(P=0.000,P=0.031,P=0.05respectively).Thecontentofiagroup(P<0.01).ConclusionQHLSChasbeneficialeffectsonacuteisch

3、emicbraininjury.ItsmechanismrelatedtothatQHLSCcanreducethecontentsofglutamate,aspartateandia;Rats;Excitatoryaminoacid;Brainedema;QHLSC谷氨酸、天门冬氨酸能够强烈兴奋神经元，因而被称为兴奋性氨基酸。左旋谷氨酸现在被认为是中枢神经系统中主要的兴奋性神经递质之一。谷氨酸等氨基酸的兴奋毒作用已公认在脑缺血急性期的细胞死亡以及灌注后神经元损害和迟发性神经元死亡中起主要作用。目前认为它们可能

4、经凋亡途径启动细胞死亡过程，兴奋性氨基酸的浓度可能决定了神经元死亡的类型、程度和进程［1］。AsitaS.Sarrafzadeh［2］认为微量渗析技术中的谷氨酸参数能最好地反映由正电子体层扫描所发现的局部脑血流量降低。此外，一些抑制性氨基酸被认为对缺血性脑损伤有重要的神经保护作用。　　然而，现在仍然缺乏有显著治疗效果的药物。而传统中医药有显著的治疗作用。中风芪红利水胶囊具有突出的临床疗效。它是在中医理论指导下组成的纯中药复方制剂，具有益气、活血、利水的功效。　　本实验采用左侧大脑中动脉阻塞模型，用高效液相仪测量

5、脑组织中谷氨酸、天门冬氨酸的含量，并且通过比较脑组织干重与湿重测定脑组织含水量，从而评价中风芪红利水胶囊的疗效。　　1材料与方法　　1.1药品中风芪红利水胶囊，0.5g/粒，由河南中医学院第一附属医院制剂室提供。不同组所用中药来源相同，制作加工过程完全相同。步长脑心通胶囊，咸阳步长制药有限公司中药厂生产，每粒含药量为0.4g。谷氨酸（Glu），天门冬氨酸（Asp）Sigma公司生产。1.2动物健康l的混悬液，置4℃冰箱备用。　　在大脑中动脉阻塞造模前，中风芪红利水胶囊低剂量组的中风芪红利水胶囊混悬液，按每天每1

6、00g体质量0.054g灌胃，两次/d，连续3d，造模成功2h灌胃一次。类似地，中风芪红利水胶囊中剂量组按每天每100g体质量0.108g给药，中风芪红利水胶囊高剂量组按每天每100g体质量0.162g给药,步长脑心通组按每天每100g体质量0.054g给药。用相同体积的生理盐水对缺血模型组和假手术组灌胃。相应的药物和生理盐水均分别于造模后2h灌胃1次。　　1.4模型制备［3］　　造模前缝合线在肝素中浸泡10min。大鼠用10%水合氯醛(0.35ml/100g)腹腔注射麻醉后，颈部正中偏左切口，分离肩胛舌骨肌动

7、脉，颈外动脉(externalcarotidartery,ECA)从周围筋膜和神经中分离，用电凝器将ECA分支烧断（甲状腺上动脉、枕动脉），在距ECA起始处1cm结扎并电凝ECA主干。将圆头的缝合线（直径为0.3mm长约5cm）插入颈外动脉，并推进到颈内动脉直到感到轻微的抵抗。抵抗表明栓线已经到达m。操作过程中通过红外线灯保持大鼠体温约37℃。假手术组，颈外动脉作插栓线的准备程序（结扎并灼断），但没有插入栓线，不阻塞大脑中动脉。　　1.5高效液相紫外探测　　系统及谷氨酸、天门冬氨酸的测定［4］左侧大脑中动脉造模

8、12h时后将大鼠处死，迅速剥离左侧局部缺血脑的脑组织，放入液氮内保存。组织置于1%的冰冻磺基水杨酸匀浆，之后组织匀浆被离心(15000r/min，10min)。然后，碱性条件下用2,4二硝基氟苯柱前衍生。色谱条件：Agilent-C18，2,4二硝基氟苯前置柱。流速为1ml·min-1，测定波长为360nm。流动相：流动相A，0.04mol·L-1六亚甲基四胺水溶液（用磷酸调pH=6.