杭白芷多糖体外抗氧化活性的研究

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时间:2018-11-24

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1、杭白芷多糖体外抗氧化活性的研究王德才高丽君高艳霞【摘要】  目的观察杭白芷多糖(PAD)体外抗氧化作用。方法羟自由基(·OH)由Fenton反应体系产生,超氧阴离子自由基(O2-·)由邻苯三酚自氧化法产生,硫代巴比妥酸法测定肝匀浆丙二醛(MDA)相对含量来反映PAD对脂质过氧化(LPO)的影响。结果PAD能清除·OH和O2-·,并抑制LPO,达到50%清除率或抑制率所需药物浓度(EC50)分别为250.9,2541.7和670.0mg/ml;维生素C清除·OH和O2-·以及抑制LPO的EC50分别为113.2,45.8和321.8mg/ml。结论PAD具有体外抗氧化作用,但其活性较维

2、生素C弱。【关键词】杭白芷;多糖;羟自由基;超氧阴离子自由基;脂质过氧化  Abstract:ObjectiveToinvestigatetheantioxidativeeffectsofpolysaccharidefromRadixAngelicaeDahurica(PAD)invitro.MethodsHydroxylfreeradical(·OH)inedbycolorimetryfortestingtherelativecontentofMDAinlivertissue.ResultsPADcouldscavenge·OHandO2-·,andinhibitlipidpero

3、xidationinlivertissue.Theconcentrationofscavengingorinhibiting50%(EC50)·OH,O2-·andlipidperoxidationofPADg/mlrespectively;EC50ofvitaminCg/mlfor·OH,O2-·andlipidperoxidationrespectively.ConclusionPADhasantioxidativeeffectsinvitro,andtheeffectsarenotsoobviousasthoseofvitaminC.  KeyRadixAngelicaeDah

4、urica,PAD)并对其体外抗氧化活性进行了研究。  1器材  1.1药材杭白芷购自安徽亳州药材市场,经本院生药学教研室周红英教授鉴定为伞形科植物杭白芷Angelicadahurica(Fisch.exHoffm.)Benth.etHook.f.var.formosana(Boiss.)ShanetYuan.的干燥根,粉碎成粗粉备用。  1.2试剂与仪器维生素C,天津市凯通化学试剂有限公司,批号060108;硫酸亚铁,天津市巴斯夫化工有限公司,批号040814;水杨酸,天津市凯通化学试剂有限公司,批号061108;30%过氧化氢(H2O2)溶液,天津市巴斯夫化工有限公司,批号061

5、222;Tris碱,夏斯生物有限公司,批号060517;邻苯三酚,天津市巴斯夫化工有限公司,批号050816;三氯乙酸,天津市永大化学试剂开发中心,批号051024;2-硫代巴比妥酸,国药集团化学试剂有限公司,批号041216。所用试剂均为分析纯。  752型紫外可见分光光度计,上海光谱仪器有限公司;LD-6型离心机,上海安亨科学仪器厂;DK-8D型电热恒温水槽,上海精密实验设备有限公司;DY89-1电动匀浆机,宁波新芝生物科技股份有限公司。  1.3动物昆明种小鼠,雄性,体重18~25g。山东省生物制品研究所提供,实验动物质量合格证:鲁动质字20030011。  2方法与结果  2

6、.1杭白芷多糖的提取与精制  取10%肝匀浆1.0ml于试管中,加入不同浓度供试液1.0ml混匀,于37℃水浴温孵1.5h后,加入10%三氯乙酸2ml,0.67%硫代巴比妥酸2ml混匀,沸水浴中反应15min后取出,流水冷却,4000r·min-1离心15min,取上清液,以生理盐水调零点,并在532nm处测定吸光度(Ax)〔7〕。模型对照组(Ao)用生理盐水1ml代替供试液,样本对照组(Axo)用生理盐水1ml代替10%肝匀浆。每个浓度组平行测定5份。测定结果以脂质过氧化抑制率(E)表示,E和EC50的计算方法同上。结果见表3。  3讨论  氧自由基的产生与机体许多功能障碍和疾病的

7、发生有密切关系,尤其心脑血管疾病、糖尿病、中枢神经系统慢性退行性疾病等。所以,抗自由基的药物研究近年来备受人们重视。机体在代谢过程中产生的氧自由基在某些病理条件下因代谢产物过量,对机体生物大分子如核酸、蛋白质、脂质等造成氧化性损伤。其中O2-·产生最早,·OH对细胞的危害最大,可直接作用于生物膜上的不饱和脂肪酸,使其发生脂质过氧化反应,损伤生物膜。丙二醛(MDA)是脂质过氧化反应的终产物之一,氧化损伤可引起MDA生成增加,肝脏是反映脂质过氧化较为敏感的器官

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