海带多糖的体外抗氧化活性研究的论文

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1、海带多糖的体外抗氧化活性研究的论文作者：周娟，吴宏，刘青，捷明【摘要】目的研究海带多糖体外抗氧化作用。方法　采用体外实验研究海带多糖对羟自由基、超氧阴离子的清除作用以及对h2o2诱导的红细胞氧化溶血和大鼠肝匀浆脂质过氧化的保护作用。结果　海带多糖体外可清除o-2·及·oh;抑制h2o2诱导的大鼠红细胞氧化性溶血;抑制小鼠组织mda的生成。结论　海带多糖体外具有清除自由基及抗脂质过氧化的作用。【关键词】海带多糖;氧自由基;脂质过氧化;抗氧化abstract:objectivetostudytheantioxidativeactivitiesoflami

2、narininvitro.methodstheantioxidantcapacityoflaminarininarinonoxygenradicalsanditsinhibitoryeffectonlipidperoxidationinarinonh2o2inducedhemolysisofraterythrocytesinarinexhibitedadosedependentinhibitoryeffectonthehydroxylfreeradicalandsuperoxideanionfreeradical.italsoshoogenate

3、softhemiceliverandheartinadosedependentmanner.theautohaemolysisofmiceredbloodcellsinarininadosedependentmanner.conclusionlaminarinshoentsinvitro.　　keyinarin;oxygenradical;lipidperoxide;antioxidation　海带属海带目海带科，含有多种生物活性成分，其大部分生物活性与其中的多糖成分密切相关[1]。.海带多糖(laminarin)是从海带中提取出来的多糖类化合

4、物。梁桂林[2]等对海带多糖进行体内抗氧化研究，结果表明海带多糖在体内具有抗氧化活性。本文对海带多糖的体外抗氧化作用进行了探讨。　　1材料与方法　　1.1材料　　海带多糖的提取、纯化及纸层析鉴定法按文献[3]制备。将市售干海带适度粉碎,用蒸馏水浸泡,加热提取,冷却离心,浓缩,浓缩液加入4倍体积的95%乙醇沉淀,沉淀物依次用无水乙醇、丙酮及乙醚洗涤,用蒸馏水复溶,透析,seveg法除蛋白,常规干燥得海带多糖。纸层析分析表明,海带多糖由葡萄糖、半乳糖、木糖等组成。硫酸-苯酚法测多糖含量为85%，考马司亮蓝法测定总蛋白含量。　　硫代巴比妥酸购自国药集团化学

5、试剂有限公司(批号：20080925);肝素为万邦医药(批号：0812111);抗坏血酸为福州海王福药制药有限公司产品(批号：0901042);硫酸亚铁、过氧化氢、三氯乙酸等均为市售分析纯试剂。　　752n紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司);tdl60b台式离心机(上海安亭科学仪器厂);bs124s分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);hhs数显恒温水浴锅(常州市国立试验设备研究所);xhc旋涡混合器(常州市国立试验设备研究所)。　　实验动物为昆明种清洁级小鼠10只，体质量18～22g，雌雄各半，由福州海王福药制药有限公司提供，许可

6、证号：scxk(闽)20050003。　　1.2方法　　1.2.1海带多糖清除·oh效果的测定根据smirnoff等的方法改进[4]，用feso4+h2o2产生·oh，以·oh氧化水杨酸所得产物的吸光值表示·oh的多少，吸光值越大，·oh越多。4ml反应体系中含9mmol/lfeso41ml，8.8mmol/lh2o21ml，9mmol/l水杨酸1ml(用50%乙醇作溶剂)及1ml不同浓度的海带多糖，最后加h2o2启动反应，37℃温浴1h，于510nm测吸光值。空白组以重蒸水代替水杨酸和海带多糖，对照组以重蒸水代替海带多糖。清除率以[a0-(ai-

7、ai0)]/a0×100%计算，其中a0为对照，ai为海带多糖某浓度时的吸光值，ai0为空白组的吸光值。　　1.2.2海带多糖清除o-2效果的测定[5]每支试管加trishcl缓冲液(ph8.2)4.5ml，25℃预热20min，加1ml不同浓度的海带多糖，再加10mmol/l的邻苯三酚0.4ml，立即摇匀，准确反应4min，立即加入8mol/lhcl0.1ml终止反应，325nm测吸光值。空白组以重蒸水代替邻苯三酚和海带多糖，对照组以重蒸水代替海带多糖。清除率以(a0-ai)/(a0-ai0)×100%计算，其中a0为对照，ai为海带多糖某浓度时

8、的吸光值，ai0为空白组的吸光值。　　1.2.3海带多糖对小鼠红细胞h2o2所致溶血的影响[6]小鼠颈总动脉