野生和林下种植金线莲的体外抗氧化活性研究

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1、野生和林下种植金线莲的体外抗氧化活性研究【摘要】目的：研究野生和林下种植金线莲的体外抗氧化活性。方法：采用紫外分光光度法，检测野生金线莲和林下种植金线莲水提液及醇提液对DPPH自由基的清除能力。结果：野生金线莲和林下种植金线莲对DPPH自由基具有一定的清除作用，其活性均为水提液优于醇提液；野生金线莲与林下种植金线莲对DPPH自由基的清除活性总体差异不大。结论：林下种植可以作为缓解金线莲资源紧张的重要途径。中国6/vie　　【关键词】金线莲；林下种植；抗氧化活性　　【中图分类号】R284【文献标志码】A【】1007-8517（2017）06-0015-03　　金线莲（Ano

2、ectochilusroxburghii）为兰科开唇兰属（Anoectochilus）地生型多年生草本植物，是民间常用的珍稀草药，享有“药王”、“金草”等美称。金线莲以全草入药，性平、味甘，具有清热、凉血、解毒、祛风除湿的功效[1]。现代研究发现金线莲具有降低低密度脂蛋白的氧化易感性、清除活性氧自由基等抗氧化活性[2-3]。　　金线莲的种子发芽率低，生长繁殖也较为缓慢，近年来掠夺式的开采使金线莲生长的植被遭到破坏，栖息地减少，导致金线莲野生资源锐减，处于濒危状态[4]。《国家重点保护野生植物名录》（第二批）将其列为二级保护植物[5]。金线莲的野生资源亟待保护，为了拯救濒危

3、植物，解决金线莲资源紧张问题。设施栽培、林下种植和盆栽等人工栽培模式被应用于金线莲的种植。林下种植金线莲是以林地资源为依托，利用林木枝叶适当的遮荫效果，形成有利于金线莲生长的环境进行栽培种植[6]。其具有充分利用林地资源空间，不占用粮食用田，单位生产成本较低等特点，林下种植金线莲正日益增多。本研究采用DPPH自由基清除法，以水和乙醇为提取溶剂，对野生和林下种植金线莲进行比较分析，评价抗氧化活性的差异。　　1仪器与材料　　11仪器UV-3200型紫外分光光度计（上海美谱达仪器有限公司）；AE240S电子分析天平（梅特勒-托利多上海有限公司）；L-530低速离心机（湖南湘仪实

4、验室仪开发有限公司）；KQ2200DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；恒温水浴锅（上海精宏实验设备有限公司）。　　12材料野生金线莲1号购于泉州叶之典生物科技有限公司；野生金线莲2号购于福建虎伯寮生物集团有限公司；林下种植金线莲1号产自仙游金线莲林下种植示范基地，林下种植6个月，购于仙游中青生物科技有限公司；林下种植金线莲2号产自武平梁野山林下种植金线莲基地，林下种植6个月，购于福建金草生物集团股份有限公司；1，1-二苯基苦基苯肼（DPPH）购于美国Sigma公司；L-抗坏血酸（VC）、乙醇均为分析纯，购于国药集团化学试剂有限公司。　　2方法　　21金线莲水

5、提液的制备称取金线莲5g，加水350mL浸泡10min，煎煮5min，过滤取上清液；药渣加水200mL，继续煎煮5min，过滤；第三次加少许水煎煮5min，最后合并滤液至500mL；即得浓度为001g/mL的金线莲水提液。　　22金线莲醇提液的制备称取金线莲1g，加入30mL乙醇浸泡30min，使药材与溶剂充分接触，超声提取2h后，离心（4000r/min，10min），取上清液，药渣重复提取2次，合并上清液，乙醇定容至100mL；即得浓度为001g/mL的金线莲醇提液。对醇提液进行浓缩，分别取上述制备的金线莲醇提液50mL，放入蒸发皿中，65℃水浴挥发浓缩，转移至10m

6、L容量瓶中乙醇定容，得到�舛任�005g/mL的金线莲醇提液。　　23清除自由基活性测定分别取金线莲水提取液00、300、600、900μL于具塞试管中，加水至1mL，分别加入DPPH溶液2mL，摇匀，得到金线莲水提液浓度分别为0、1、2、3mg/mL的待测样品溶液，室温下避光静置30min；分别取金线莲醇提液00、300、600、900μL于具塞试管中，加无水乙醇至1mL，分别加入DPPH2mL，摇匀，同样得到金线莲醇提液浓度分别为0、1、2、3mg/mL的待测样品溶液，室温下避光静置30min。用2mL无水乙醇代替2mLDPPH溶液作空白对照，采在517nm波长处测定

7、吸光度，以下式计算清除率。　　DPPH清除率计算公式：DPPH清除率=[A0-（A1-A2）]/A0×100%　　公式中Ao为空白对照吸光度；A1为样品溶液吸光度；A2为样品对照吸光度。　　3结果　　31野生和林下种植金线莲水提液对DPPH自由基清除活性的影响通过实验对4个金线莲样品水提液的DPPH自由基清除活性进行测定，结果见表1。在实验研究的质量浓度范围内，4种样品对DPPH自由基的清除能力随质量浓度的增大而上升。林下种植金线莲与野生金线莲水提液对DPPH自由基的清除活性相比相差不大，其IC50值均在2～3mg/mL。