金线莲主要成分kinsenoside的体外抗癌活性研究

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1、金线莲主要成分kinsenoside的体外抗癌活性研究作者：蔡金艳张锦文，唐菲，张小琼，徐江涛，张勇慧【摘要】目的对金线莲Anoectochilusroxburghii(Wall.)Lindl.中富含的主要成分kinsenoside进行抗癌活性研究。方法采用磺酰罗单明SulforhodamineB(SRB)法和MTT分析法。结果对3种敏感细胞株：人白血病细胞株(HL-60)、人肺癌细胞株(A-549)、人肝癌细胞株(BEL-7402)筛选结果10-5mmol/L的化合物kinsenoside时抑制率均小于85%，评定为无效。结论化合物kinsenoside的抗癌活性不显著。【关键词】金线莲;k

2、insenoside;抗癌　Abstract：ObjectiveToinvestigatetheinvitroantitumoreffectofkinsenoside,thehighyieldingconstituentfromAnoectochilusroxburghii(Wall.)Lindl.　　MethodsSRBassayandMTTcolorimetricassaywereemployed.ResultsTheexperimentaldataoftheinhibitingeffectofkinsenosideat10-5mmol/Lonthreekindsofhumanleukem

3、iacells(HL-60),humanlungcancercells(A-549)、humanhepaticcarcinomacell(BEL-7402)respectivelyresultedinarationomorethan685%,whichwasassessednosignificance.ConclusionKinsenosidehasnosignificantinhibitoryeffectoncancercells.　　Keywords：Anoectochilusroxburghii;Kinsenoside;Anticancer　　金线莲(HerbaAnoectochili)

4、为兰科开唇兰属植物花叶开唇兰Anoectochilusroxburghii(Wall.)Lindl.的干燥全草，是多年生珍稀中草药，有清凉解毒、滋阴降火、消炎止痛之功效，可用于治疗肺结核咯血、糖尿病、肾炎、膀胱炎、重症肌无力、遗精、风湿性及类风湿性关节炎、小儿惊风、妇女白带以及毒蛇咬伤等症;生于山地林下阴湿地，在我国分布于浙江、福建、台湾、江西、西藏等省区[1]，俗称“金草”“神药”“药王”“乌人参”等。化学成分方面除发现金线莲中氨基酸，微量元素及糖类的含量高外，还有黄酮类、甾体、三萜类等化合物分离鉴定的报道[2~4]。通过对野生金线莲的化学成分研究，鉴定了两个丁酸苷类化合物β-D-gluco

5、pyranosyl-(3R)–hydroxybutanolide(Ⅰ,kinsenoside),methyl4-β-D-glucopyranosyl-butanoate(Ⅱ)[5]，并发现kinsenoside含量很高。Kinsenoside作为开唇兰属多种植物含有的主要成分，其降血糖[6]、保肝护肝[7]、降血脂[8]等活性已多有研究。本实验选取3种敏感的肿瘤细胞株，对该化合物进行抗肿瘤活性测试。6　　1材料与试剂　　1.1肿瘤细胞株和培养基人白血病细胞株HL-60、人肺癌细胞株A-549、人肝癌细胞株BEL-7402(中国科学院细胞库)培养在含10%胎牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司

6、)的RPMI1640培养基(Gibco公司)中，培养条件为：37℃，饱和湿度，5%CO2的培养环境。　　1.2试剂3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide(MTT)(Sigma公司)溶解在过滤除菌的1×PBS(pH值7.4，NaCl0.8%，KCl0.02%，Na2HPO40.144%，KH2PO40.024%)，终浓度0.5mg/ml;SRB(美国Sigma公司)溶解在1%的乙酸，终浓度4mg/ml;SDS(北京鼎国生物技术发展有限公司)溶解在10mmol/L的盐酸中，终浓度为10%;注射用盐酸阿霉素(Adriam

7、ycin,ADM)购自浙江海正药业股份有限公司。受试药kinsenoside纯度经鉴定在98%以上;金线莲药材由福建省漳州市南靖县和溪镇供销社提供，由中国科学院武汉植物研究所王映明教授鉴定。　　2方法　　2.1MTT比色法体外抗肿瘤药物筛选取处于指数增长期细胞种在96孔板里(细胞浓度为20000个/ml，100μl/孔)，培养24h使细胞贴壁，去除上清，加200μ6l/孔带药新鲜培养基：化合物事先