血管内皮生长因子、雌激素受体、孕激素受体在乳腺疾病中的表达及意义

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1、血管内皮生长因子、雌激素受体、孕激素受体在乳腺疾病中的表达及意义【摘要】目的：对同一组乳腺肿瘤组织进行血管内皮生长因子（VEGF）、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）的检测，观察其分布及相互关系。方法：采用S-P免疫组化法对200例乳腺癌、100例乳腺增生、100例乳腺纤维腺瘤进行检测。结果：在200例乳腺癌中，VEGF表达68例呈阳性反应（34%），ER表达122例呈阳性反应（61%），PR表达116例呈阳性反应（58%）；而200例良性病变中：ER阳性者78例（39%），PR阳性者54例（27%

2、），VEGF阳性者4例（2%）。经X2检验：乳腺癌ER、PR阳性率显著高于乳腺良性病变（P＜0.05），而VEGF则更显著（P＜0.01）。在68例VEGF阳性者中，ER、PR阳性者各16例，其中三者均阳性者10例。经检验，乳腺癌中VEGF与ER和PR的表达呈负相关关系（P＜0.05）。结论：上述结果说明在乳腺疾病中VEGF、ER、PR联合检测，将起到互补作用，会进一步提高乳腺疾病的诊治水平。【关键词】VEGFERPR乳腺癌S-P免疫组化VEGF在肿瘤组织中的血管形成中发挥重要作用，与肿瘤生长、浸润和转

3、移密切相关。ER、PR在乳腺癌组织中的含量是肿瘤预后判断的2个积极参数。VEGF的表达与ER、PR的表达在某些肿瘤发生、发展、预后和治疗中起着重要作用。材料与方法研究对象：收集2003～2006年本院乳腺癌200例、乳腺增生病变100例、乳腺纤维腺瘤100例。试剂：VEGF单克隆抗体、ER单克隆抗体、PR单克隆抗体，S-P免疫组化试剂盒，均购自福州迈新公司。实验方法：采用目前国内先进的S-P免疫组化方法。步骤：石蜡切片4μm厚，常规脱蜡水化后，用PBS(pH=7.4)冲洗3次，每次5分钟(3×5')；加

4、100μl过氧化酶阻断溶液，室温下孵育10分钟；PBS(pH=7.4)冲洗3次，每次5分钟(3×5')；加100μl非免疫性动物血清，室温下孵育5分钟，PBS冲洗1次；加100μl第一抗体（VEGF抗体、ER抗体、PR抗体），室温下孵育60分钟；PBS(pH=7.4)冲洗3次，每次5分钟(3×5')；加100μl生物素标记的第二抗体，室温下孵育10分钟；PBS(pH=7.4)冲洗3次，每次5分钟(3×5')；加100μl链亲和素-过氧化物酶溶液，室温下孵育10分钟；PBS(pH=7.4)冲洗3次，每次5

5、分钟(3×5')；加2滴新鲜配制的DAB溶液显色5～6分钟；自来水冲洗，苏木素复染，中性树胶封固。结果判定：光镜下随机观察10个高倍视野，计数1000个细胞，以细胞核/浆出现黄色颗粒为阳性（VEGF定位于细胞浆，ER、PR均定位于细胞核），计算阳性细胞百分率，阳性结果分级标准：阳性百分率＜10%为阴性，10%～50%（+），＞50%（++）。统计学处理：采用X2检验。结果VEGF、ER、PR的总体阳性率：200例乳腺癌中VEGF阳性者68例（34%），ER阳性者122例（61%），PR阳性者116例（5

6、8%）；而200例良性病变中：ER阳性者78例（39%），PR阳性者54例（27%），VEGF阳性者4例（2%）。经X2检验：乳腺癌ER、PR阳性率显著高于乳腺良性病变（P＜0.05），而VEGF则更显著（P＜0.01）（见表1）。在68例VEGF阳性者中，ER、PR阳性者各16例，其中三者均阳性者10例。经检验，乳腺癌中VEGF与ER和PR的表达呈负相关关系（P＜0.05）。表1乳腺癌和乳腺良性疾病VEGF、ER、PR的阳性率（略）讨论肿瘤是典型的血管依赖性病变，即恶性肿瘤的生长和转移依赖于肿瘤的血管

7、新生，肿瘤血管新生对肿瘤的生长和转移有重要作用［1］。VEGF在肿瘤新生血管形成过程中起着重要作用，VEGF是肿瘤细胞分泌的最强的一种血管生成因子，其与肿瘤血管新生的研究已成为热点，在体内VEGF主要来源于肿瘤细胞，肿瘤细胞可分泌释放多种活性因子，这些因子均可刺激血管内皮的生长、迁移。许多研究表明，许多肿瘤组织中都有VGEF的较高表达，在肿瘤生长过程中，VEGF参与了其血管新生过程，对肿瘤生长和转移有重要意义，VEGF已用于乳腺癌、卵巢癌、胃癌等的研究，大多数研究表明VEGF阳性者预后不良，可作为判断恶

8、性肿瘤预后的一个指标［2］。ER、PR作为乳腺癌检验项目之一，与病人化疗方案的选择，内分泌治疗效果、预后亦密切相关［3］。本文应用免疫组化法对乳腺癌、乳腺增生病变、乳腺纤维腺瘤组织中VEGF、ER、PR表达的检测结果表明，乳腺癌中VEGF阳性率高于良性乳腺病变，差异显著（P＜0.01），VEGF在乳腺癌中的表达与ER、PR呈负相关关系（P＜0.05），而ER、PR是乳腺癌预后好的标志，VEGF则相反（P＜0.01）。综上所述，在乳腺疾病中V