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《异体骨结合骨髓间质干细胞移植治疗骨缺损》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、异体骨结合骨髓间质干细胞移植治疗骨缺损ok3骨缺损模型,随机选择同一只动物的一侧为实验侧,自体配对的另一侧为对照侧。将表面脱钙的同种异体骨和来源于受体的体外培养增殖的骨髓间质干细胞混合植入实验侧骨缺损,对照侧仅植入同样制作的异体骨。12周后,进行X线检查、生物力学检查和组织学检查,将结果进行对比。【结果】动物在术后12周,实验侧X线片光密度测量结果,破坏载荷时扭矩和扭角测量结果均优于对照侧;组织学评分中,实验侧骨痂量评分优于对照侧,骨连接成熟程度和骨髓发育程度两者没有明显差异。【结论】骨髓间质干细胞可以促进异体骨在移植后的成骨作用,在增多成骨量的同时不
2、影响骨组织发育。【关键词】异体骨;骨髓间质干细胞;移植;骨缺损Abstract:【Objective】Tostudythefeasibilityandresultoftransplantingboneallograftarrocellintreatmentofbonedefectinanimalexperiment.【Methods】FifteenNebonedefectmodelofbothradiuses.Randomly,oneradialsideodel,andtheothersideentalsideineralizedboneallogra
3、ftandbonemarrocellculturedinvitro.Thecontrolsidealsechanics,andhistology.Theresultsomentandangleinfailureloadtestandthescoreofcallusinhistologicalgradingprovedintheexperimentalside,paredaturedegreeofboneunionandgroarroarrocellcanenhancetheosteogenesisofboneallograftaftertranspla
4、ntation,ationentofbonetissue.Keyarrocell;allograft[JSUNYat-senUniv(MedSci),2007,28(5):515-519]骨移植是治疗骨缺损最主要的方法,同种异体骨以其生物学特性和形态结构与自体骨相近,可以长期保存等优点而已广泛应用于临床,但大段异体骨移植后,由于骨融解吸收的速度快于新骨形成,影响了大段异体骨结构性骨移植的远期疗效。已有实验证实骨髓间质干细胞(bonemarrocell,MSC)在一定诱导因素作用下能向成骨细胞分化,促进成骨[1,2],但将异体骨和骨髓间质干细胞混合移植后
5、的效果如何,目前未见报道。本研究应用异体骨混合骨髓间质干细胞植入动物体内进行实验性探索,希望通过骨髓间质干细胞的成骨作用,达到改善治疗效果的目的,为临床提供参考。1材料和方法1.1实验动物健康新西兰白兔15只,雌雄不限,体质量2.8~3.5kg,平均为3.1kg,兔龄5~10(S=7)月。1.2实验试剂和材料低糖型DMEM干粉培养基(Dulbecco’sModifiedEagleMedium):13.75g/包(美国Gibco公司)。胎牛血清(FBS;美国Hyclone公司)。0.25%胰蛋白酶(美国Sigma公司)。淋巴细胞分离液(天津TBD生物技术
6、中心),密度为1.077。PBS平衡盐溶液(美国Hyclone公司)。青霉素-硫酸链霉素双抗溶液:青霉素1万U+链霉素10mg/mL(美国Gibco公司)。异体骨:从健康5月龄新西兰白兔桡骨截取。1.3异体骨的制备从5月龄的健康新西兰白兔双侧取出桡骨,截去两段干骺端后得到直径均匀的长约5cm的骨段,将每段骨截成3段各长约1.5cm的骨段,在充分清除骨髓和软组织后,先用三氯甲烷∶乙醇=1∶1的溶液浸泡24h进行脱脂;用0.6mol/L的盐酸浸泡15min进行表面脱钙;用PBS溶液冲洗后,再用PBS溶液,37℃浸泡24h中和盐酸;测定浸泡后的溶液pH值约为
7、7.0~7.2后,用超纯水250mL+青霉素10万U+庆大霉素8万U+链霉素100?滋g浸泡24h,然后在超净台内晾干。将上述处理的异体骨分别装入2mL的冻存管内密封,在-80℃下深度冰冻2周;然后用2.0Mrads剂量的γ射线照射12h灭菌。再放入-80℃下深度冰冻保存备用。使用时,将异体骨放入约37℃的PBS中浸泡解冻后使用。1.4细胞培养对于骨髓间质干细胞的制备、原代培养和保存方法,具体见
