《体内药物分析》ppt课件

《《体内药物分析》ppt课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第五章体内药物分析生物样品特点1、被测定的药物和代谢物的浓度低；2、样品大多需要分离和净化；3、样品量少，连续测定时，很难再度获得完全相同的样品。4、工作量较大，5、要求很快地提供结果(毒物检测)样品制备：去除蛋白质、缀合物水解、化学衍生化、分离浓集（液液萃取、固相萃取等）；样品测定：光谱分析法、色谱分析法、免疫分析法、生物学方法方法验证：特异性、标准曲线和定量范围、定量下限、精密度与准确度、稳定性、提取回收率体内药物分析：第一节、常用体内样品的制备与贮藏一、体内样品的种类、采集与制备（一）血样：血浆、血清血浆：选用最多。因血浆中的药浓可反映药物在体内的状况。而且血浆中药物浓度的

2、数据报道较多，可供借鉴。血浆是全血在加肝素、枸橼酸、草酸盐等抗凝剂的全血经离心后分取，量约为全血的一半。血浆的制备：采集的静脉血液置含有抗凝剂的试管中，混合后，以25003000r/min离心510min使与血球分离，所得淡黄色上清液即为血浆。抗凝剂—最常用的是肝素（heparin），肝素是体内正常成分，因此不会改变血样的化学组成或引起药物的变化，一般不会干扰药物的测定。通常1ml血液需用肝素0.10.2mg或20IU(1mg126IU)。可不必准确控制其它抗凝剂EDTA、枸橼酸盐、草酸盐等，是与血液中的钙离子结合的试剂，它们可能引起被测组分发生变化或干扰某些药物的测定，

3、不常使用。血清的制备：采集的静脉血液置试管中，于37℃或室温放置30min1h。血液凝固后，用细竹棒或玻璃棒轻轻剥去试管壁上的血饼，再在25003000r/min离心510min，上层淡黄色液体即为血清。现文献所指血药浓度为血浆或血清中药物总浓度（游离的和血浆蛋白结合的总浓度）。血浆与血清的区别血清比血浆只是少一种纤维蛋白原一般血浆中药物浓度与血清中药物浓度相当血浆比血清的分离快，而且制取量约为全血的50%~60%（血清为全血的50%左右），多数用血浆进行分析。若血浆中含有的抗凝剂对药物浓度测定有影响时，则应使用血清样品。（二）尿样：尿样测定主要用于药物剂量回收研究、药物肾

4、清除率和生物利用度等研究，以及测定代谢物类型等。体内药物清除主要是通过尿液排出，药物可以原型（母体药物）或代谢物及其缀合物形式排出。尿样常需加入防腐剂。成人一日排尿量为15L。尿样包括随时尿、晨尿、白天尿、夜间尿及时间尿几种。因尿液浓度变化较大，所以应测定一定时间内排入尿中的药物总量。一般采集时间尿（规定时间内采集尿液体积和排入尿中的药物总量）。尿液中药物浓度的改变不能直接反映血药浓度，即与血药浓度相关性较差、尿液量较大不易保存等。（三）、唾液：唾液中的药物浓度通常与血浆浓度相关。样品易得，取样无损害，尤易为儿童接收。有些可从药物唾液浓度推定血浆中游离药物浓度。唾液由腮腺、颌下

5、腺和舌下腺三个主要的唾液腺分泌汇集而成前两者分泌量占总量90%。两者中浓度大致相当。取样：在潄口后15min，安静状态下采集口腔内然流出的唾液；也可在刺激下快速采样(需注意干扰)。如口嚼石腊片或将柠檬酸、维生素C等置于舌尖，弃去初始部分后采集。刺激后采集的为混合唾液。药物在脏器组织中的分布情况，常用胃、肝、肾、肺、心等。制备：测定之前一般需制成匀浆组织样品的处理：沉淀蛋白法、酸水解法、酶水解法（蛋白水解酶）（四）组织：（五）头发：应用—体内微量元素含量测定—用药史的估计—临床用药和药物非法滥用的区别—毒性药物检测头发样品的采集：采集枕部发样(带根部），微量元素在前额部位的头发中含

6、量最低，枕部含量最高。头发样品的洗涤：除去外源性污染物，推荐使用丙酮-水-丙酮；丙酮浸泡搅拌10min，自来水漂洗3次，再用丙酮浸泡搅拌，自来水、蒸馏水各洗3次。头发样品的处理：直接甲醇提取、酸水解、碱水解、酶水解（葡萄糖醛酸酶）三、体内样品的贮存与处理（一）冷藏与冷冻血浆和血清需采集后及时分离，一般最迟不超过2h，分离后再置冰箱或冷冻柜中保存（-20~-80℃）。尿样应立即测定，若收集24h的尿液不能立即测定时，可加入甲苯、氯仿、醋酸等防腐剂，一般可保存24~36h，也可加入叠氮化钠较长时间保存。唾液在保存过程中会放出二氧化碳使pH值升高。另唾液中含有粘蛋白，须离心后冷藏或冷冻

7、（二）去活性终止酶的活性方法：快速冷冻、微波照射、加入酶活性阻断剂等。分析方法与样品处理步骤的选择第二节、体内样品的的前处理一、体内样品预处理的目的1、使药物从缀合物及结合物中释放出来，以测定药物的总浓度。2、介质复杂，干扰物多，待测物浓度低，须分离干扰物质、富集待测药毒物3、为了适应和符合测定方法所要求的灵敏度4、为了防止分析仪器的污染、劣化，提高检测准确度、精密度和选择性等。二、常用体内样品预处理方法要考虑：药物的理化性质（极性、酸碱性、光谱特性、挥发性、稳定性），药物测定的