犬超数排卵与手术法取卵的分析

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1、-------学位论文独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文系本人在导师指导下独立完成的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标记和致谢的部分外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含本人为获得任何教育机构的学位或学历而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人如违反上述声明,愿意承担由此引发的一切责任和后果。研究生签名:日期:年月日学位论文使用授权声明本人在导师指导下所完成的学位论文,学校有权保存其电子和纸制文档,可以借阅或上网公布本学位论文的全部或部分内容,可

2、以向有关部门或机构送交并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的全部或部分内容。对于保密论文,按保密的有关规定和程序处理。本学位论文属于:1.保密£,在年解密后适用于本声明;2.不保密£。研究生签名:导师签名:日期:年月日-----------万方数据-----------延边大学硕士学位论文-摘要摘要本实验的主要内容分为犬的超数排卵技术、通过外科手术法获得成熟卵母细胞以及实验室镜检排卵情况三部分。犬的超数排卵技术是在外源性激素PMSG与hCG的联合应用下进行的,选用5只健康未发情母犬,体重约为5kg,实验第1天即给母犬注射PMSG,

3、1-8天连续每天肌肉注射200IUPMSG,隔3天即第11天肌肉注射2000IUhCG,隔10天即在第21天通过手术法进行取卵。手术法取卵是以经超数排卵后的母犬为基础,采用舒泰50进行麻醉,于脐后沿腹正中线做切口,切开皮肤和皮下组织,暴露腹腔,找到子宫、卵巢以及输卵管一并摘除,摘除后一并放入保温瓶中带回实验室。实验室镜检排卵情况是先以生理盐水清洗子宫、卵巢以及输卵管,剪掉多余组织,从宫管结合部用1mL的针头注入冲卵液(10mL冲卵液反复冲洗),另一端用平皿接收流出的液体,完成卵母细胞的收集。使用透明质酸酶机械地剥离卵丘细胞从而获得裸

4、卵,排出第一级体的细胞即为成熟卵母细胞。染色后可以更直观清晰的看见卵母细胞中的极体。实验成功获得成熟卵母细胞,卵母细胞的平均成熟率为85.11%(40/47)。本实验旨在非发情季节1月份通过注射PMSG与hCG对母犬进行超数排卵,进而手术法取卵从而获得成熟卵母细胞。关键词:犬;超数排卵;手术法取卵;成熟卵母细胞;舒泰50-----------I万方数据-----------延边大学硕士学位论文-AbstractAbstractThemaincontentofthisexperimentwasdividedintothreeparts

5、,thefirstpartwasthesuperovulationindogs,thesecondpartwastoobtainmatureoocytesbysurgery,thethirdpartwastoobservedoocytesbymicroscopyinthelab.ThesuperovulationofdogwasperformedundertheconditionofinjectionPMSGandhCG,chose5healthyanddiestrousbitches(weight:about5kg),thefir

6、stdayoftheexperimentwastoinjectthePMSGtothebitchesbycontinuousinjectionfor8daysatadosageof200IU/d.the11thdayinjectedthehCGatadosageof2000IU,the21thdaytocollecttheoocytesbythesurgery.Surgeryofcollecttingoocyteswasbasedonthesuperovulationofbitches,thebitcheswereanestheti

7、zedwiththezoletil50,alongmidlineofabdomenbehindthebelly,madeaskinincision,cuttheskinandsubcutaneoustissue,abdomenwasopenedwithmedianincision,findandremovedtheuterus,ovaryandoviduct,thenbroughtthemtothelabwithvacuumflask.Beforeofobservingoocytesbymicroscopyinthelab,wash

8、edtheuterus,ovaryandoviduct,cuttheredundanttissue,flushed(10mlliquid)withtheneedleof1mlfromthejunctionoftheuterusando

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