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1、微生物的培养基培养基（medium）是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。无论是以微生物为材料的研究,还是利用微生物生产生物制品，都必须进行培养基的配制，它是微生物学研究和微生物发酵工业的基础。一、配制培养基的原则1.选择适宜的昔养物质总体而言，所冇微生物生长繁殖均需耍培养基含冇碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源,但由于微生.物背养类型复杂，不同微屯物对背养物质的需求处不一样的，因此首先耍根据不同微z:k物的营养需求配制针对性强的培养:基。自养型微生物能从简单的无机物合成自身需要的糖、脂类、蛋白质、核酸、
2、维生素等义杂的有机物,因此培养自养型微生物的培养基完全可以（或应该）由简单的无机物组成。例如，培养化能闩养型的氣化硫硫杆菌（Thiobacillusthiooxidans）的培养基组成（见表6-9）。在该培养基配制过程屮并未专门加入其它碳源物质，而是依靠空气中和溶于水中的C02为氧化硫硫杆菌提供碳源。培养其它化能养型微生物与上述培养基成分基木类似，只是能源物质冇所改变。对光能&养型微生物而言，除需要各类营养物质外，还需光照提供能源。培养异养型微生物需要在培养基中添加有机物,而且不同类型异养型微生物的营养要求差别很大，因此其培养基
3、组成也相差很远。例如，培养大肠杆傳的培养基组成比较简单（表6-9），而宥些异养型微生物的培奍基的成份非常复杂，如肠膜明串珠菌需要生长因了•,若配制培养它的合成培养基时，需耍在培养基屮添加的生长因子多达33种，因此通常采用天然冇机物來为它提供生长所需的生长因子。就微生物主要类型而言，有细菌、放线菌、酵母菌、毐菌、原生动物、藻类及病毒之分，培养它们所需的培养基各不相同。在实验室中常用牛闵抒蛋白胨培养基（或简称普通肉汤培养棊）培养细蘭（表69）;用髙氏1号合成培养基培养放线菌（表6-9）;培养酵邛菌一般用麦芽汁培养基，它是将麦芽粉与4
4、倍水混匀，在58〜65°C条件下保温3〜＞1小时至完全糖化，调整糖液浓度为10o巴林，煮沸后用纱布过滤，调pH为6.0配制而成。麦芽粉组成复杂，能力酵母歯提供足够的营养物质;培养范歯则一般川齊氏合成培养基（表6-9）。2.营养物质浓度及配比合适培养基中营养物质浓度合适吋微生物才能生长良好，营养物质浓度过低吋不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长，反而起到抑制或系菌作州。另外，培养基屮各营养物质之间的浓度配比也直接影响微屯物的生长繁
5、殖和（或）代谢产物的形成和积軋其中碳鉍比（C/N）的影响较火。严格地讲，碳鉍比指培养:基中碳元素与铽元素的摩尔数比值,有吋也指培养:基中还原糖与粗蛋白之比。例如，在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1吋，傳体大量繁殖，谷氨酸积累少；当培养基碳氮比为3/1吋，蘭体繁殆受到抑制,谷氨酸产呈则大呈增加。再如,在抗生索发酵生产过程屮，可以通过抟制培养基屮速效氮（或碳）源与迟效氮（或碳）源之间的比例來控制菌体生长与抗生素的合成。3.控制pH条件培养:基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不NJ类型微生物的生长繁殖或产生代
6、谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的最适pH条件各不相同，一般來讲，细闕与放线闕适于在pH7〜7.5范围内生长，酵母茼和霉茼通常在PH4.5〜6范WA生长。值得注意的是，在微生物生长繁殖和代谢过程屮，由于昔养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累,会导致培养基pH发生变化，若不对培养SpU条件进行控制,往往导致微屯物生长速度和代谢产物产觉降低，因此，为f维持培养基pH的相对惊定，通常在培养基巾加入pH缓冲剂，常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐（如K::HP0,和KH,PO,）组成的混合物《K..HPO,溶液呈碱性，KH;:P0-
7、,溶液呈酸性，两种物质的等克分子混合溶液的pH位为6.8。当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加吋,H与弱碱性盐结合形成弱酸性化合物,培奍基pH不会过度降低;如果培养基屮0H浓度增加，0H_则与弱酸性盐结合形成弱碱性化合物,培养基pH也不会过度升高。但K2HP04/KII2P04缓冲系统只能在一定的pH范围（pH6.4〜7.2）内起调节作用。有些微生物，如乳酸菌能人量产酸,上述缓冲系统就难以起到缓冲作用，此吋可在培养基屮添加难溶的碳酸盐（如CaCO:,）来进行调节，CaCU难溶于水,不会使培养SpH过度升岛,但它可以不断屮和微生
8、物产生的酸，同时释放出C0_、将培养基pll控制在一定范围内。在培养基中还存在一些天然的缓冲系统，如氨基酸、肽、蛍白质都屌于两性电解质，也可起到缓冲剂的作用。4.控制氣化还原Hi位（redoxpotential）不同类型微生物生长对氧化还原电位（O）的耍求不一样
