外源糖对苹果果实山梨醇代谢相关酶活性的影响论文

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1、外源糖对苹果果实山梨醇代谢相关酶活性的影响论文摘要:以新红星苹果为试材,采用果实圆片孵育体系研究了外源糖对SDH和SOX活性的影响。结果表明:在整个发育过程中,苹果果实的SDH活性与葡萄糖、果糖和蔗糖含量间不存在显著的相关性;而SOX活性与葡萄糖和果糖含量间存在极显著的相关性。外源山梨醇和蔗糖均可提高发育前期和发育后期苹果果实的SDH和SOX活性,其中以山梨醇的诱导作用最为显著。外源葡萄糖对SDH活性的增加具有显著的促进作用,但抑制SOX活性,而外源果糖对苹果果实SDH和SOX活性的诱导效果与葡萄糖恰好相反。结果还表明,外源糖对发育前期苹果果实SDH和SOX的诱导作用均显著高于对发育

2、后期苹果果实的诱导作用。由此推断,苹果果实中山梨醇代谢相关酶的活性变化受到可溶性糖的调控。关键词:苹果果实;外源糖;山梨醇脱氢酶;山梨醇氧化酶EffectsofSolubleSugarsonRelatedEnzymeActivitiesofSorbitolMetabolisminDevelopingAppleFruitYECheng-rong,LIUGeng-sen,ES缓冲液混合(用100mmol·L-1甘露醇调节各反应液的渗透势),放入50mL的三角瓶中,在摇床上振荡反应16h(25℃),测定SDH和SOX的活性。3次重复。1.2.3酶液的制备及酶活性测定称取1g果肉于研钵内,加

3、少量石英砂和5mL的50mmol·L-1HEPES-NaOH(pH7.5),冰浴研磨匀浆,12000g,4℃离心20min。上清液用稀释10倍的提取缓冲液透析15h。参照Yamaki等5的方法测定SDH和SOX的活性。2结果与分析2.1发育过程中苹果果实山梨醇代谢相关酶活性及可溶性糖含量变化图1表明,发育前期,苹果果实的SDH和SOX活性均较低。从花后45d开始,SDH活性增加显著,到花后75d,SDH活性达到最高,之后随果实发育逐渐下降直至果实成熟。与SDH的活性变化相比,整个发育过程中SOX活性较低且变化较小。在发育前期,SOX与SDH活性差异不显著。从花后45d开始,SOX活性

4、缓慢上升,到花后120d达到最大值,但显著低于SDH活性。从图2可以看出,发育早期新红星苹果果实的果糖和蔗糖含量均较低,而葡萄糖含量在花后30d有一定增加。随着果实的发育,从花后60d开始,果糖和葡萄糖含量迅速增加,其中以果糖的积累最为显著。到果实发育后期,新红星苹果果实的果糖含量最高,葡萄糖含量次之。纵观苹果果实的整个发育过程,蔗糖含量仅在发育后期才有一定的增加,但最终含量仍较低,远低于果糖和葡萄糖的含量。2.2发育过程中苹果果实山梨醇代谢相关酶活性与可溶性糖含量间的相关性在整个发育过程中,苹果果实的SDH活性变化与葡萄糖、果糖和蔗糖含量间均不存在显著的相关关系(表1)。而SOX活

5、性与苹果果实的葡萄糖和果糖含量间存在极显著的正相关关系,相关系数分别为0.7891和0.9002。苹果果实的SOX活性与蔗糖含量间的相关系数虽达到0.6346,但经显著性测验表明,二者间并不存在显著的正相关关系。2.3外源糖对苹果果实山梨醇脱氢酶活性的影响图3表明,分别用浓度为100mmol·L-1的葡萄糖、果糖、山梨醇、蔗糖孵育果实圆片16h,可影响苹果果实的SDH活性,但不同糖种类间存在差异。从图3可以看出,山梨醇、葡萄糖和蔗糖可显著提高发育前期苹果果实的SDH活性,与对照相比,其活性分别增加了4.82,3.41,1.64倍;对于发育后期的苹果果实,其活性仅增加了1.32,0.7

6、6,0.54倍。而外源果糖处理均抑制发育前期和发育后期苹果果实的SDH活性,与对照相比,活性分别下降了0.56倍和0.49倍。2.4外源糖对苹果果实山梨醇氧化酶活性的影响从图4可以看出,与外源糖对SDH的诱导效果相类似,外源山梨醇和蔗糖也可显著提高发育前期和发育后期苹果果实的SOX活性。与对照相比,发育前期果实的SOX活性分别增加了4.79倍和1.70倍,而发育后期果实的SOX活性仅增加了1.38倍和0.44倍。图4还表明,苹果果实的SOX活性受到外源葡萄糖的抑制和果糖的促进。与对照相比,外源果糖处理,发育前期和发育后期苹果果实的SOX活性分别增加了3.38倍和1.37倍。而外源葡萄

7、糖处理,发育前期和发育后期苹果果实的SOX活性分别下降了0.59倍和0.52倍。3讨论众多研究结果表明,苹果果实中糖的积累受到果实库强、韧皮部卸载、跨膜运输、碳水化合物代谢及相关酶活性等方面的调控4,5,9。山梨醇作为苹果光合同化产物的主要输出和运输形式,在叶片中占可溶性总糖的80%,而在果实中仅占总糖的3%~8%,表明山梨醇可在果实内被迅速转化4,山梨醇经韧皮部卸载,在果实中被SDH和SOX转化成果糖和葡萄糖,参与果实的生长发育和品质形成4-5。由图1可

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