dna分子标记在山茶属植物中的应用

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1、DNA分子标记在山茶属植物中的应用山茶属（Camellia）是山茶科（Theaceae）中种类较多、系统较为原始的属，为雌雄同株、虫媒传粉的常绿灌木或小乔木［1］,是众多栽培茶花的野生祖先［2］。因其植株形态优美、花姿绰约、花色鲜艳缤纷、叶色浓绿光亮而受到世界园艺界的青睐，再宥重要的园林应用价值［3］。山茶是温暖地区重要的观赏树种和经济作物。我国是山茶属植物的分布中心，冇着极其丰富的茶花种质资源。早在1000多年前，屮岡和日木就把一些山荼属原种作为观赏植物进行栽培，并从野生种屮选出了许多著名的栽培品

2、种。山茶属约20组280种，分布于东亚北冋归线W侧，我W现有238种，以云南、广东、广西、四川最多［4］。现代人工栽培范围已经遍及我岡长江流域以南，北达胶东半岛，在口木、北美、西欧、大洋洲（澳大利亚、新西兰）等地区也广泛栽培。山茶属植物具冇很重要的经济利用价值，其种子含汕率高，是重要的食用油和工业用油；茶叶是世界流行的饮料，是国际贸易的重要商品；有少数种类还可供药用；大多数种类树形美观，花朵鲜艳，极具观赏性,是很好的园林绿化树种【7】。分子标记是继形态学标记、细胞学标记以及生物化学标记之G发展起来的

3、直接反应种质资源遗传物质水平多态性的一种遗传标记，具冇标记数量多、基凶组变异丰富、检测手段方便快捷、口标基冈的表达不受生物的生K:发育阶段及外界环境所影响等特点，是种质资源系统鉴定与育种研究的最高效的手段之一。因此，DNA分子标记技术在动植物研究屮已得到广泛的应用。不同类型的DNA分子标记机技术也广泛的应用于III茶的遗传育种研究中，在III茶的进化和系统发育、种质资源遗传多样性与亲缘关系鉴定、品种指纹图谱和遗传图谱的构建、0标性状基因定位与克隆等研究领域已广泛应用。木文综述了主要几种用于山茶属植物

4、研究的DNA分子标记技术的基本特点、原理及其应用现状。1应用于山茶属植物的DNA分子标记类型1.1RAPDRAPDKAPD（随机扩增多态性）标记，是一种以PCR为基础来测定未知物种序列基组多态性的显性分子标记技术。该标记是以基因组DNA为模板，一个随机核苷酸序列（一•般为9〜10个碱基对）为引物，进行PCR扩增，扩增产物的多态性反应其检测物种基因组的多态性。扩增所产生的条带数主要取决于物种基因组的复杂性。KAPD标记具冇可随机合成引物、无需预知被测物种的基因组的核苷酸序列、方法简便易行、所需模板DN

5、A量少、成本低等优点。该技术已广泛的应用于生物的系谱分析、系统进化关系、品种鉴定等的研究上。1.2AFLPAFLP（扩增片段L<:度多态性）标记，是一种以PCR技术为基础来扩增物种基因组DNA限制性片段的一种分子标记技术。该技术是通过引物诱导对基因组DNA进行选择性扩增來测定物种多态性。该技术结合了RAPD和RFLP标记技术的优点，具冇所需DNA模板量少、重复性好、多态性好及分辨率高等优点。0前已广泛的应用于动植物的遗传育种、基冈组遗传连锁图谱的构建、基因表达与调控、物种的进化与分类中。1.3SSR

6、SSR（简单重复序列、微卫星DNA）标记，是以一种特异引物PCR为基础的显性DNA分子标记技术。真核生物的基因组中微:T4星含量非常丰富，且随机分布在核DNA屮，因此，通过对种间或种内微卫星变异数□来测定其多态性，具有多态性高、数量丰富、信息量高、特异性强等优点，目前已广泛的应用于指纹图谱和遗传图谱的构建、目标基因定位等研究中。1.4TSSRISSR（简申序列重复间区）标记，是以一种锚定引物（SSR引物添加碱基）PCR为基础的分子标记。该技术是利用锚定引物与特定位点互补的重复序列问的DNA片段进行P

7、CR扩增，其产物的差异性表现为物种间（

8、々）的多态性，具有引物通用、多态性高、信息量大、检测方便等优点。目前该技术己广泛应用于植物遗传图谱和指纹图谱的构建、遗传多样性及亲缘关系的研究、物种进化及系统分类研究、品种鉴定等研究屮。1.5ESTEST（表达序列标签）标记，是指不同组织来源的互补DNA（cDNA）序列。其表达序列标签代表物种在特定生长发育时期和环境卜特定组织基因所表达的序列，该技术已被广泛的应用于基因组物理图谱的构建、新基因的探寻以及基因识别等研究领域屮。1.2SRAPSKAP（相关序列扩

9、增多态性）标记，是一种结合了RAPD、AFLP、RFLP等分子标记优点井克服其缺点的PCR标记系统的显性新型标记，是通过独特的双引物（17bp上游引物和18bp下游引物）设计对启动子或⑷含子区域进行特异扩増，其引物具有通用性。该标记是利用不同种质资源的扁动子、内含子与间隔区长度的不同而致使其种问和种内表现岀明显的多样性。SRAP分子标记具有多态性商、重复性好、笏操作、快捷方便、成本低、在基因组屮分布均匀、易对特定序列进行测序与相关基因的克隆等诸多优点。目前已成功应用丁