糖原合成酶激酶3β（glycogen syntheses kinase 3β，GSK3β.doc

《糖原合成酶激酶3β（glycogen syntheses kinase 3β，GSK3β.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、GSK3β促进TGF-β1诱导的肾小管上皮HK-2细胞纤维化赵凯1，2，龚如军3，陈姗1，何凤田1（400038重庆，第三军医大学基础医学部：生物化学与分子生物学教研室1，病原生物学教研室2；DivisionofKidneyDiseaseandHypertension，BrownUniversitySchoolofMedicine，Providence，RhodeIsland02903，USA3）[摘要]目的阐明GSK3β对于肾脏小管间质纤维化的作用。方法以TGF-β1诱导的体外肾小管间质纤维化模型为研究对象，通过以GS

2、K3β特异抑制剂LiCl处理细胞和不同GSK3β表达质粒（野生型GSK3β表达质粒GSK3β-WT；第9位点上丝氨酸突变为丙氨酸，由此不再能被磷酸化失活而具有固有活性的GSK3β突变质粒GSK3β-S9A；第85、86位点上赖氨酸突变为丙氨酸、失去激酶活性的GSK3β突变质粒GSK3β-KD）转染细胞，观察肾脏纤维化的标志性分子纤维连接素蛋白（fibronectin，FN）表达水平的改变，以及对TGF-β/Smad信号通路的作用。结果LiCl增加HK-2细胞GSK3β的磷酸化，抑制GSK3β的活性，同时降低了细胞基础水平

3、的和TGF-β1诱导的FN表达。过表达的GSK3β-WT增强TGF-β1诱导的FN表达，而这种效应在GSK3β-S9A转染细胞更为显著。反之，过表达GSK3β-KD则抑制TGF-β1诱导的FN表达。分析对TGF-β/Smad信号通路的作用，LiCl可以抑制TGF-β1诱导的Smad3磷酸化，而对Smad2磷酸化水平无影响。同时，LiCl也不改变Smad3的总蛋白表达。结论GSK3β通过TGF-β1/Smad3信号通路促HK-2细胞纤维化，抑制GSK3β可以抗纤维化。[关键词]肾脏纤维化；GSK-3β；TGF-β1；sma

4、d3；信号通路[中国法分类号]R692；R34[文献标志码]AGSK3βplayspro-fibrogenicactivitythroughTGF-beta/SmadsignalinginrenaltubularepithelialcellsKaiZhao1，2，RujunGong3，ShanChen1，FengtianHe1(DepartmentofBiochemistryandMolecularBiology1，DepartmentofDepartmentofPathogenicBiology2，CollegeofB

5、asicMedicalSciences，ThirdMilitaryMedicalUniversity，Chongqing，400038，China.；DivisionofKidneyDiseaseandHypertension，BrownUniversitySchoolofMedicine，Providence，RhodeIsland02903，USA2)[Abstract]Renalfibrosisisthefinalcommonpathwayformanykidneylesionsthatleadtochronicp

6、rogressiveorganfailure.Inourpreviousstudy，itwasobservedthatexpressionofglycogensynthasekinase-3beta（GSK3β），aserine/threoninekinasewithmultiplefunctions，issubstantiallyincreasedintransplantedhumankidneywithchronicallograftneprophathy.Andvalproate（VPA），aselectiveGS

7、K3βinhibitor，markedlyamelioratesrenalfibrosisinratswithunilateralurethralobstruction.ToaddresswhetherGSK3βplaysdirectrolesinrenalfibrosis，studyreportedherewascarriedout.Inourresults，GSK3βinhibitorLiCldecreasedthephosphorylationofGSK3β，andsuppressedboththebasaland

8、TGF-β1inducedfibronectin（FN）expressioninhumanproximaltubularepithelial（HK-2）cells.WhentransfectedwithexpressionvectorencodingwildtypeGSK3βoranmutantGSK3βS9A，wh