缺氮玉米根系切片制作及显微分析

《缺氮玉米根系切片制作及显微分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。缺氮玉米根系切片制作及显微分析　　摘要：通过石蜡制片法研究缺氮对玉米根系细胞结构的影响，分别以缺氮玉米及正常玉米的根系组织作为实验材料，利用传统石蜡切片法，对组织进行脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色等一系列处理，通过显微技术得到组织图片，获得了厚度为10μm且染色清晰、组织结构完整的缺氮和正常玉米根横切切片，通过本实验，明显可以观察到三叶一心的玉米经缺氮处理后其根部通气组织有明显变化，可为玉米氮

2、吸收的机理研究提供一定参考。　　关键词：玉米；缺氮处理；石蜡制片　　玉米是世界上最重要的粮食、淀粉和工业原料作物。玉米作为我国第一大作物，其生产在国民经济发展中占有极其重要的地位。玉米也是一种重要的对高等植物进行遗传学和基因组学研究的模式生物。氮肥是农业生产中最重要与用量最大的肥料，但玉米种植中氮肥的大量使用也造成了严重的环境问题，例如环境污染以及由于过度使用肥料，尤其是氮肥造成的土壤酸化，损害了农业的可持续发展。而低氮条件下玉米生理结构的改变研究对如何提高玉米氮肥利用效率与耐低氮具有重要意义。本试验通过对缺氮玉米的根系组织进行了切片制作及显微分析，旨在了解缺氮对玉米根系

3、组织结构及营养状况的影响。　　一、材料与方法为了充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余文化生活。为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。　　1.材料的处理　　选取颗粒饱满，籽粒均一的玉米种子，30%的H2O2浸泡15min用蒸馏水将玉米残留的H2O2冲洗干净，25℃下浸泡8h后萌发36h。待种子根部生长至

4、2cm时，移入8个水培盆中，先用1/2Hoagland培养液培养1d后换为Hoagland营养液培养，待玉米生长至三叶一心时期，取4盆换用Hoagland缺氮培养液作为处理组，另外4盆仍用Hoagland培养液作为对照组，待缺氮玉米出现明显变化后，分别取实验组和对照组玉米根系组织，液氮速冻后保存于-80℃待用。　　2.实验方法　　样品的分割与固定。将处理和对照根切成长约2毫米的小段，割取后立即投入预先准备好的FAA固定液中，将气泡抽出，使材料下沉进行固定。　　冲洗与苯胺番红整体染色。材料固定后，用70%酒精冲洗材料，冲洗2次，每次放置30min，再经50%、30%、酒精复

5、水至蒸馏水，每级1h。再入苯胺番红溶液整染过夜。　　石蜡制片。材料整染后，用蒸馏水洗掉浮色，经20%、30%、50%、70%脱水，每级1h；85%、95%、100%、100%各级酒精脱水，每级1h，然后依次使用1/2二甲苯+1/2纯酒精、二甲苯、二甲苯透明，每级1h。为了充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余文化生活。为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人

6、员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。　　浸蜡。将组织留在透明剂瓶中，在小半瓶冷的二甲苯上中填满已熔化的石蜡，倒入的石蜡即凝成固体，然后将材料放在35―37℃之间的温箱内放置2d。将材料移入56℃的恒温箱中停留2―5h，换三次新鲜的纯石蜡，使留在组织内的透明剂全部排除后包埋。　　包埋。将浸蜡完成后的石蜡和根组织一起倒入包埋用的纸盒中，根据切片的要求，将材料每隔1cm放置一个，除去气泡、插入标签后将纸盒放入冷水水槽，使盒中包埋块迅速冷却，1h时后将纸盒打开取出包埋的蜡块贮藏备用。　　切片、贴片、展片与烤片。使用切片机切出10μm厚度的蜡带，将切好的蜡带用赫伯

7、特粘贴剂将蜡片粘贴在载玻片上。然后将带有蜡带的载玻片放在40℃展片台上伸展，蜡片完全伸平后，吸去多余的水，烤干后放入切片盒中。　　脱蜡、复染与封片。将烤干的切片入二甲苯脱蜡，每级30min，然后入100%酒精、95%酒精复水，每级5min，苯胺固绿溶液复染3―5min，95%酒精分色2min；然后用100%酒精脱水2次，二甲苯透明2次，每级5min；最后用封固剂封片。　　观察。使用显微镜对玉米各切片进行观察。　　二、结果与分析　　1.玉米�理结果为了充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教