物质及其受体nk1在非小细胞肺癌中的表达及作用

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1、青岛大学硕士学位论文P物质及其受体NK--1在非小细胞肺癌中的表达及作用姓名：王冠群申请学位级别：硕士专业：病理学与病理生理学指导教师：陈桦20110528摘要目的①了解P物质(substanceP，SP)及其受体神经激肽．1州K．1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及人肺腺癌细胞系A549细胞系中的表达特点。②研究NK．1特异性激动剂[Sar9，Met(02)11】substanceP(SMSP)以及特异性拮抗剂SRl40333对体外培养的A549细胞系生长增殖的影响。③探讨P物质及NK．1在NSCLC发展中的作用，临床

2、意义。④探讨SRl40333对NSCLC治疗的作用及意义。方法①分别采用免疫组织化学法检测NSCLC原发瘤组织，相应癌旁组织及解剖标本中相对正常肺组织标本中P物质和NK．1的表达情况。②采用免疫细胞化学染色检测二者在A549细胞系的表达特点。⑧采用MTT比色法检测不同浓度的SMSP和SRl40333单独及共同作用后A549细胞生长增殖的变化。④采用流式细胞技术检测SRl40333作用后A549细胞线粒体膜电位及生长周期的变化。⑤采用Hoechst33258荧光染色观察SRl40333作用后细胞的凋亡情况。⑥使用SPSSl6

3、．0软件，对实验结果进行统计学分析。P

4、时，浓度10。oM到10。5M均可促进A549细胞系的生长增殖，浓度为10’7M时其促增殖作用最明显；单独使用SRl40333时，浓度10一oM到10-SM时能够减缓并抑制A549细胞系的增殖，其中浓度为lO。6M时抑制增殖作用最明显；SMSP同SRl40333合用时，10。6M的SRl40333能够抑制1伊7M的SMSP引起的细胞增殖作用。⑤Hoechst33258荧光染色证明和流式细胞术测定证明SRl40333作用后可以引起A549细胞系增殖减缓并发生凋亡。结论①P物质与其NK．1受体在NSCLC组织及A549细胞中高

5、表达，提示神经内分泌参与NSCLC的发生和发展过程。②P物质能够通过NK-l受体促进体外培养的A549细胞的增殖。③NK．1受体拮抗剂SRl40333能够抑制A549细胞的生长作用，促进其凋亡。④NK．1受体可成为治疗NSCLC的新靶点，SRl40333有望做为治疗NSCLC的药物进行研究。硕士研究生王冠群(病理学)指导教师陈桦教授关键词：P物质；神经激肽一1；肺肿瘤；SRl40333TheExpressionandeffectofsubstancePandNK-IinNon-SmallCellLungCancerAbst

6、ractobjective①TostudytheexpressionofsubstancePanditsreceptor,neurokinin-1州K-1)innon·smallcelllungcancer(NSCLC)andhumanlungadenocarcinomacelllineA549．②ToevaluatethegrowthandproliferationeffectofthespecialselectiveNK-lagonist[Sar9，Met(02)11]substanceP(SMSPlanditsant

7、agonistSR140333ontheA549celllineinvitro．⑨ToinvestigatethepotentialfunctionofsubstancePandNK．1intheclinicaldevelopmentofNSCLC．④TodiscussthesignificanceofSRl40333onthetreatmentofNSCLC．Methods①TheexpressionofsubstancePandNK-1wasdetectedimmunohistochemistricallyincase

8、sofNSCLC，correspondingadjacenttissues，andanatomicalspecimensofnormallungtissueasnormalcontrols．②Wecarriedoutvitroimmunocytochemicalstudytoinvestigatethe