静安区手足口病流行趋势及病原学分析

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1、目录中文摘要1数_3HUp6第一部分上海市静安区2005年?2010年手足口病流行特征分析对象和方法8觀8Wit11第二部分上海市静安E2009年?2011年手足口病病原体监测结果分析对象和方法14结果15舰17第三部分上海市静安K人肠道病毒71型基因进化研究对象和方法19觀2328第网部分含氯消毒剂对肠道病毒71型灭活效果的研究对象和方法30縣323335参考文献38附录一综述41附录二上要试剂及主要溶液的配制51附录三主要仪器及材料53附录四硕士期间发表的论文54通55釔口.人学硕丨.?学位论文屮文摘要静安区手足口病流行趋势及病原学研究中文摘要本次课题通过收集20

2、05年?2010年静安区手足口病常规报表、监测资料等分析手足口病的流行趋势。应用RT-PCR、细胞培养等实验技术对2009年?2010年监测点手足口病病例标本进行检测，分析引起手足口病的病毒病原型别分布和肠道病毒EV71的VP1基因特征，以了解静安区于?足口病的流行规律和分子流行病学特征。通过实验研究不同浓度含氯消毒剂对肠道病毒71型的灭活效果，从而为指导本区手足口病防控措施的制定提供依据。本课题研究内容包括以下儿个内容:1.上海市静安区2005?2010年手足口病流行特征分析2005年发病率为20.44/10万，2006年为18.72/10万，2006年较2005年

3、有所下降。2007年发病率为31.32/10万，2008年为24.84/10万，较2007年有所下降。2009、2010年于?足口病的发病率均较2008年有所上升，但2005?2010年静安区本市人口手足口病年发病率以2007年最高。发病高峰集中在每年的5?7月份，2009年11月还出现第二个发病高峰。手足口病的年发病率以位于静安K西北部的曹家渡和江宁街道较高，其他街道总体发病率较低。男女性别比约为1.4:1，5岁以下儿童比例达到83.80%。以幼托机构儿童比例最多。2.上海由?静安区2009?2011年f-足口病病原监测结果分析2009?2011年分别收集监测点上海

4、巾'儿童医院临床诊断手足n病例咽拭、肛拭标本90份、180份和242份，采用Real-timeRT-PCR方法进行检测。结果显示，2009?2011年间，监测点儿童于.足门病例中柯萨奇病毒A16型(CA16)m性率逐年下降，而肠道病毒71型（EV71)和肠道病毐属其他病毒(EV)m性率呈上升趋势。对2010年7月至2011年12月监测点临床诊断手足口病例175例分别釆集咽拭和肛拭标本，分别用Real-timeRT-PCR//法进行EV71、CA16、EV检测。用McNemar检验比较两种标本检测结果的差异，EV71和EV/十：咽拭子和肛拭子两种标本检测结果有差异，P值

5、均〈0.05，CA16在两种标本中的检测结果无显著差异。应用Kappa检验，Kappa值均>0.4，显示咽拭了-和肛拭子的检测结果基本-致。根据本次实验配对标本检测EV71、CA16、EV结果不一致与标本釆集时间进行分析，推断肠道病毐可能在发病2天内在咽部大量繁殖扩增，此时通过呼吸道传播的可能性较大。将2010年7月至2011年12月监测点临床诊断手足口病例采集的175对咽拭和肛拭标本Real-timeRT-PCR检测结果按照标本釆集时间进彳/分析，对于EV71i人学硕I.学位论文屮文摘要来说，咽拭标本在发病后3天、4?11天均可检出阳性，而CA16、EV在发病3天后

6、都无法检出阳性，说明EV71在呼吸道带毒持续时间长于CA16和肠道病毒属病03.上海市静安区人肠道病毒71型基因进化研究随机选择2010年不同月份19份PCR阳性的标本进行Vero细胞培养，其中1例为重症培养物、18份为非重症培养物，对EV71病毒PCR扩增产物序列（VP1基因1200bp)系统发生分析，所有19株EV71病毐与2007年山东及2008年安徽串-阳EV71分离株同属C基因型中的C4a亚型。将本次研究的19株EV71分离株的VP1基因与从GenBank中检索到EV71各基因型和亚型的代表株序列，包括A、B、Cl、C2、C3、C4和C5亚型进行氨基酸和核苷

7、酸同源性分析，其中C4亚型选择的是2008年安徽省章阳市流行株。分析发现，19株EV71分离株的VP1基因与C基因型代表株核苷酸同源性在84.3%?97.1%，氨基酸同源性在88.6%?98.3%;与C4基因亚型最为相近，其核苷酸同源性在95.0%?97.1%,氨基酸同源性在95.1%?98.3%。我国自1998年从广东省分离鉴定出C4b亚型EV71分离株后，至2003年_内EV71亚型?直为C4b。2003?2004年，EV71的C4a和C4b两个亚型在我国共存，如浙江、广东、台湾。从2005年至今，上海、河南、云南、北京、山东、安徽、浙江等地分离