hif1α和细胞红蛋白在低压缺氧大鼠脑组织中的表达和意义

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1、英文缩写英文缩写AbbreviationFullEnglishNameChineseCAcomuammonis海马CATcatalase过氧化氢酶CDNAcomplementaryDNA互补DNACygbcytoglobin细胞红蛋白DEPCdiethypyrocarbonate焦碳酸二乙酯DGdentategyms齿状回EBetudiumbromide溴化乙锭disodiumethylenediamine二水乙二胺四乙EDTAtetraacetate酸二钠FITC—fluoreceinisothiocyante异硫氰酸荧

2、光素H．Ehematoxylin．eosin苏木素．伊红mF．1ahypoxia-inducible缺氧诱导因子．1afactor-1aHREShypoxiareponsiveelements缺氧反应元件LDHlactatedehydrogenase乳酸脱氢酶LPo1ipidperoxidation脂质过氧化物laserscanningconfocal激光扫描共聚焦LSCMmicroscope显微镜Ⅳ匝'Amalonaldehyde丙二醛i0英文缩写Nonitrogenmonoxidum一氧化氮NOS心icoxidesyn

3、thare一氧化氮合酶PDLpoly．D．1ysine左旋多聚赖胺酸ROSreactiveoxygenspecies’氧自由基reversetranscription逆转录．聚合酶链Rr．PCRpolymerasechainreaction反应TAETris．acetas．EDTAE缓冲液tetramethylrhodamine四甲基若丹明异TRITCisothiocyanate硫氰酸盐trishydroxymethylaminome三羟甲基氨基甲Tristhane烷vascularendothelialgrowth血管内

4、皮生长因VEGFfactor子河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。研究生签名：罐翩签名知础院领导签名：斯西’2口孵年3月2歹日河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行时研究工作及取

5、得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：翌．／磊中文摘要F-1Q和细胞红蛋白在低压缺氧大鼠脑组织中的表达和意义摘要目的：本实验通过建立大鼠低压缺氧损伤模型，采用RT-PCR和免疫荧光组织化学技术，研究低压缺氧性脑损伤后缺氧诱导因子．1a(HIE．1a)和细胞红蛋白(Cygb)在脑组织海马区的表达部位及时序性变化特点，探讨它们之间的相互关系以及在低压缺氧性脑损伤中的作用。·’方法：选用清洁级成年雄性SD大鼠

6、60只，体重280--一320克。随机分为对照组及低压缺氧6h、12h、18h和24h组。建立大鼠低压缺氧损伤模型；H．E、甲苯胺兰染色观察脑组织形态学改变；物理方法检测脑含水量；生化手段检测脑组织SoD、CAT、NOS活性及MDA、NO含量。应用RT-PCR技术检测大鼠脑海马区HIF．1a和CygbmRNA表达水平。采用免疫荧光双标记技术，利用激光共聚焦显微镜，观察低压缺氧脑损伤后HIF．1a和Cy曲在大鼠海马各区神经细胞中的定位及时序性变化特点。结果：l低压缺氧损伤后脑组织形态学改变：脑冠状切片H．E染色可见海马CAl

7、区对低压缺氧最为敏感。低压缺氧6h组CAl区大部分神经细胞胞体缩小，胞核固缩，核仁消失，胞浆深染，同质性嗜酸性着色(红色神经细胞)；海马CA2、CA3、CA4区以细胞水肿为主，神经细胞胞体肿胀，胞浆不规则淡染，胞核肿大淡染或消失。低压缺氧12h、18h和24h组海马各区细胞均以坏死和凋亡为主；随低压缺氧时中文摘要间的延长损伤逐渐加重。可见大部分细胞皱缩变形，胞浆深染，核碎裂及核溶解，间质中充满细胞碎片和凋亡小体。对照组甲苯胺兰染色后神经细胞胞核呈淡蓝色，胞浆可见大量深蓝色粗颗粒状Nissl体。各低压缺氧组H．E染色中所见的

8、红色神经细胞，甲苯胺兰染色呈均一深蓝色，Nissl体消失；H．E染色胞体肿胀、胞浆淡染细胞，甲苯胺兰染色整个细胞呈淡蓝色，Nissl体减少或消失。2脑含水量检测结果：各低压缺氧组脑含水量随低压缺氧时间的延长而逐渐增加，与对照组相比均有显著差异(尸