hplc法测定北苍术中苍术素的含量

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1、HPLC法测定北苍术中苍术素的含量摘要:苍术具有燥湿健脾,祛风湿的功效。主治湿阻中焦,风寒湿痹,脚膝肿痛,痿软无力,雀目夜盲。采用高效液相色谱法测定了北苍术挥发油中苍术素含量。该实验采用岛津LC-8A高岛效色谱仪,以甲醇-水溶液为流动相进行梯度洗脱,其中甲醇的流速为0.8mL/min,水的流速为0.2mL/min。实验结果如下:北苍术挥发油中苍术素的含量为6.28%。该方法操作简单,结果准确,重现性好,无需再作处理,无环境污染,可用于北苍术挥发油中苍术素含量的测定,具有很高的实用价值。关键词:高效液相色谱法含量测定北苍术苍术素挥发油目录引言11.实验内容21.1

2、仪器及试剂21.2色谱条件的选择21.3高效液相色谱法(HPLC)的原理21.4北苍术中挥发油的提取21.5标准曲线的绘制21.6苍术素的含量测定32.结果32.1标准曲线32.2高效液相色谱图42.3苍术术的含量53.讨论54.结论5参考文献6致谢7引言:中药苍术为菊科植物茅苍术Atractylodeslan-cea(Thunb.)DC.或北苍术Atractylodeschinen-sis(DC.)Koidz.的干燥根茎,始载于《神农本草经》,具有燥湿健脾、祛风湿、明目之功效,临床仍用于湿滞中焦证、风湿痹证及外感风寒挟湿之表证,为中医常用药材之一。与苍术燥湿健

3、脾功效相关的药理作用为调整胃肠运动功能,抗溃疡(苍术有较强的抗溃疡作用。实验发现,北苍术对幽门结扎型溃疡、幽门结扎-阿司匹林溃疡、应激性溃疡有较强的抑制作用,能显著抑制溃疡、动物的胃液量、总酸度、总消化能力及胃黏膜损害。研究认为,苍术抗溃疡作用机理主要有两个方面:①抑制胃酸分泌:北苍术挥发油中的苍术醇能抑制甾体激素的释放,减轻甾体激素对胃酸分泌的刺激。②增强胃黏膜保护作用:北苍术可使胃黏膜组织血流量增加,从苍术中提取的氨基己糖具有促进胃黏膜修复作用。),保肝,抑菌等作用。而降血糖,抗缺氧,中枢抑制,抗肿瘤,促进骨骼钙化及对心血管系统的影响等作用,则是其药理作用的

4、现代研究进展。苍术的主要化学成分如下:苍术根茎含挥发油,挥发油中主含苍术素(atractylodin)、β-桉油醇(β-eudesmol)、茅术醇(hinesol)、羟基苍术酮(hydroxy-atractylon)等。其余主含β-桉叶醇和苍术呋喃烃,还含β-芹子烯,左旋的α甜没药萜醇(α-bisabolol),茅术醇,榄香醇,苍术酮,芹子二烯酮等。又含聚乙炔化合物:苍术呋喃烃醇(atractyoldinol),乙酰基苍术呋喃烃醇(acetylα-tractylodinol)。苍术素的结构式:苍术素的性状为brownpowder,分子式为C13H10O,分子量为

5、182.2179。其药理作用为保肝,抗缺氧,降血糖,抗炎抗肿瘤,抗菌抗病毒,抗心律失常,对消化道的作用及对神经系统的作用等。《中国药典》至今仅有其对照药材(苍术素)的鉴别,尚无其含量测定标准。苍术的主要有效成分为聚乙炔类成分,即主要为苍术素。本文以苍术素为指标,采用高效液相色谱法(HPLC)建立了北苍术中挥发油的有效成分苍术素的含量测定方法,为苍术的质量标准研究提供了依据与方法。1.实验内容1.1仪器及试剂仪器:DW-2型调温电热器(规格5000ml,功率1000w),回流冷凝管(直型),挥发油提取器,5000ml圆底烧瓶,变压器,15ml容量瓶,胶头滴管,2m

6、l移液管,试剂瓶,超声波清洗器,一次性针管,微孔滤膜,电子天平,ShimadzuLC-8A制备型高效液相色谱仪。试剂:北苍术,甲醇(CH3OH),乙酸乙酯(Et0Ach),水,苍术素对照品。1.2色谱条件的选择色谱条件的选择:选择了甲醇-水常见的流动相系统,结果表明在这个系统中色谱峰的峰形较好,基线平稳,故选择甲醇-水系统为流动相。当采用体积分数为50%的甲醇-水溶液等度洗脱时,苍术素出峰太慢,时间太长;当采用体积分数为80%的甲醇-水溶液等度洗脱时,苍术素出峰时间为10min左右,时间较合理,此时色谱峰的峰形较好,基线平稳,因此最终优化的色谱条件如下:进样体积

7、:20μL;流动相:水(A)-甲醇(B)溶液,其中泵A(水)的流速为0.2ml/min、泵B(甲醇)的流速为0.8ml/min。1.3高效液相色谱法(HPLC)的原理高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以

8、图谱形式打印出来。1.4

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