终定稿浑河水大肠杆菌检测

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1、沈阳师范大学化学与生命科学学院微生物学研究性实验项目设计书+项目名称:浑河水的大肠杆菌检测项目负责人:周竹枫项目组成员:曲贵运、孙洪奎、李雪、王雪年级:09级专业:生物科学联系电话:13804003297电子邮箱:732003532@qq.com2011年04月14日一、立论依据(一)研究目的与意义1、水的微生物检验是衡量水质量的重要指标之一,也是判定被检水能否食用的科学依据之一。2、通过水的微生物检验,可以判断水加工环境及食品卫生环境,能够对食品被细菌污染的程度作出正确的评价,为各项卫生管理工作提供科学依据,提供传染病和人类、动物

2、和食物中毒的防治措施。3、水资源的微生物检验是以贯彻"预防为主"的卫生方针,可以有效地防止或者减少水资源中毒人畜共患病的发生,保障人民的身体健康;同时,它对提高产品质量,避免经济损失,保证出口等方面具有政治上和经济上的重要意义。4、据统计,在不发达国家有400多万儿童死于水传播性疾病,约有15%的儿童五岁前死于腹泻。在饮用水中不断发现新的对人类造成重大危害的病原微生物,如大肠杆菌O157∶H7、军团菌、隐孢子虫、柯萨奇病毒等,常规饮用水处理技术难以有效地去除。由于环境污染加剧,还会产生一些新的病原微生物,危害人类健康。(二)国内外研

3、究现状1、培养温度温度是影响微生物生长繁殖的主要因素之一,每种细菌都有生长的最适温度即其生长速率最高的温度。由于各种水环境中所分布的细菌种类不同,其最佳生长温度亦不同。世界各国对食品细菌总量指标的培养温度差异较大。根据所设立的指标采用高温、中温和低温分别培养相应的耐热菌、中温菌和嗜冷菌,绝大多数国家和组织以培养中温菌为主。针对中温微生物许多国家也采用不同的温度,例如:欧洲委员会对大多数食品采用30℃或21℃,对饮用水采取37℃和22℃;食品法典委员会(CAC)、FDA和ICMSF采用35℃;冰岛对不同食品采用不同培养温度,饮用水22

4、℃和37℃。而饮用水同时采取两种温度(22℃和37℃)是分别检测两种类型的细菌。2、培养时间细菌等单细胞生物在一定时间内通过二等分裂方式由一个细胞分裂增殖形成附着在培养基上(内)的肉眼可见的菌落,这是平板计数法的原理。菌落形成的时间主要依据细菌的代时,代时越短,形成的菌落时间越短。在菌落菌数测定时间选择方面,我国和世界大多数国家一样多采取(48±2)h,只有少数食品如海产品、蛋制品采用(72±2)h。该时间主要是判断菌落形成的大小、清晰度等,便于观察、计数。3、大肠杆菌的最新监测方法Colitag试剂法Colitag是一种预制式的干

5、性混合试剂,含有盐分、氮源、碳源以及用于检测总大肠杆菌、埃希氏大肠菌(E.coli)所用的指示剂以及营养底物。阳性的检测结果可以通过肉眼可见的变色反应得到。进行Colitag检测操作十分简单。试剂置于预先量好剂量的试管中,方便加入到灭菌杯中。加满灭菌杯到刻度线,混合并在35°C条件下进行培养。24h之内如果有黄色产生则表明样品中有总大肠杆菌存在。阳性的样本通过紫外灯进行荧光检测可以确认是否有E.coli的存在。(三)主要参考文献[1].何晓青,程莉等.饮用水中病原微生物检测方法与评价标准[J].黑龙江农业科学,2010(7):111

6、~113[2].白凤翎.国内外食品卫生微生物标准菌落总数的比较研究[3].刘灵芝黄毅.JOURNALOFMICROBIOLOGY[J].微生物学杂志2002,22(3)[4].沈萍陈向东.微生物学实验[M].高等教育出版社[5].程光胜李玲阁等.微生物实验法[M].北京科学出版社.1981:324-326[6].管志林王艾琳等.细菌的生化鉴定[M].化学工业出版社2006二、研究方案(一)研究目标、研究内容和拟解决的关键问题1、研究目标:以我国饮用水卫生标准为依据,检测各不同采样段的浑河水中的细菌及大肠菌群数,以此判断浑河水的水质。

7、浑河,是纵贯辽宁省东部和中部的著名河流,长368公里,又称小辽河。她发源于抚顺市东部,自东向西,依次流经清原、新宾、抚顺、沈阳、辽中、灯塔、辽阳县、台安、海城、大洼、大石桥、营口等县市境内,最后于营口市西西炮台注入辽东湾。以我国饮用水卫生标准为依据,检测各不同采样段的浑河水中的细菌及大肠菌群数,以此判断浑河水的水质。2、研究内容:于浑河水的6个不同的区段采集水样,测定其每毫升水样中的细菌总数以及每升水的总大肠菌群指数,并根据国家饮用水标准,比较和判断其水质的状况,以评估其优劣。大肠杆菌是人和动物肠道等处的常在菌,在1g粪便中约含有1

8、06个菌。该菌在饮水中出现被认为是粪便污染的指标。禽大肠杆菌在鸡场普遍存在,特别是通风不良,大量积粪鸡舍,在垫料、空气尘埃、污染用具和道路,粪场及孵化厅等处环境中染菌最高。3、解决的关键问题(1)水样的采集(2)水中细菌总数和总大肠菌

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