重医临床检验免疫学

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1、搬砖超人小明明2015.1.9临床检验免疫学一.绪论免疫学教学内容1.基础免疫学(Basicimmunology)相关内容:抗原、抗体、补体、细胞因子、HLA、免疫系统、免疫应答。以免疫应答为中心。2.临床免疫学(Clinicalimmunology)1)抗感染免疫(Infectionimmunology)2)超敏反应(Hypersensitivity)3)自身免疫(Autoimmunity)4)肿瘤免疫(Tumorimmunology)5)移植免疫(Transplantationimmunology)3.免

2、疫学实验技术(immunologicaltechniques)即:免疫学检验,根据免疫学基本理论建立起来的试验方法二.抗原抗体反应抗原抗体反应是抗原和相应抗体之间所发生的特异性结合反应,这种结合具有高度特异性,它既可以发生在体内,也可以发生在体外。发生在体内的抗原抗体反应,是机体体液免疫效应的表现方式,具有溶菌、杀菌、中和毒素及调理吞噬的作用。发生在体外的抗原抗体反应,根据抗原的物理性状(可溶性Ag或颗粒性Ag)及参加反应的物质不同,可分为:沉淀反应、凝集反应、中和试验及补体参与的反应等由于抗体都来自于血清,

3、因此,我们将体外的抗原抗体反应又称为血清学反应。本章讲的抗原抗体反应就是指发生在体外的抗原抗体反应抗原抗体反应原理1.Ag、Ab能特异性结合(内因):Ag、Ab能特异性结合,是由于Ag表位(抗原决定簇)和AbV区之间的特异性结合,二者在空间结构上是严格互补的。2.Ag、Ab结合的动力(外因):静电引力(又称库仑引力):它是指抗原和抗体分子上带有相反电荷-NH3+或-COO¯之间的相互吸引力。例如Ab分子上赖氨酸离解层中含有-NH3+,Ag分子上天门冬氨酸离后含有-COO¯,这两者之间就可相互吸引而产生静电引力

4、。该力的大小与两个电荷间距离的平方成反比。距离越近,静电引力就越强。范得华力(又称电子云力):该力是原子与原子、分子与分子间所具有的一种吸引力。当Ag、Ab两分子外层轨道上的电子相互作用时,电子云由于偶极摆动而产生吸引力,从而促使Ag、Ab的结合。该力大小小于静电引力。氢键:该力是由于分子中的H原子和电负性较大的O、N、S原子间的相互吸引而形成的。Ag(-NH2、-COOH、-OH、-SH)、Ab(-NH2、-COOH、-OH、-SH)可形成氢键桥梁,促使Ag、Ab的结合。氢键对于维持生物大分子(AgAb)的

5、形态和结构有重要作用。它的大小大于范得华力。疏水作用力:Ab是蛋白质,Ag少数是多糖,多数也是蛋白质,那么它们就是胶体物质,在水溶液中就带有-NH3+或-COO¯极性基团,从而带上正电或负电,成为亲水胶体。当Ag表位和AbFab段相互靠近时,亲水层消失,排斥掉两者间的H2O分子,促进Ag、Ab的结合。疏水作用力在整个Ag、Ab反应中提供的作用最大。在高浓度电解质(如NaCl等)存在的条件下,NaCl可先与Ab分子结合(在Ab未与Ag相遇时),排斥H2O分子,从而使Ab蛋白质优先沉降,称为盐析现象由于抗原抗体反

6、应不含有共价键,因此抗原抗体反应不为化学反应,不产生新的物质。Ag+Ab→AgAb搬砖超人小明明2015.1.9抗原抗体反应特点1.特异性:Ag、Ab的结合实质上是抗原表位和抗体可变区之间的结合。Ab可变区可形成一个平穴槽,Ag则楔状嵌入,由于两者在化学结构和空间结构上的互补,使得它们的结合具有特异性。这种结合如同钥匙与锁的关系,一把钥匙只能开相应的一把锁.交叉反应(cross-reaction)----抗体对具有相同或相似抗原表位的不同抗原的反应称为交叉反应。交叉反应并没有违背Ag、Ab特异性结合的原则,其

7、产生的先决条件是不同抗原之间存在共同Ag表位。交叉反应的意义:1.帮助免疫学诊断:eg外斐氏反应等:用变形杆菌OX19、OX2、OXk作抗原查血清抗体,诊断斑疹伤寒(立克次氏体感染所致)2.可造成免疫病理损害:eg链球菌感染后易导致肾小球肾炎,其原因为链球菌与人体肾小球基底膜有共同Ag表位所致。2.比例性:Ag、Ab的结合并不是在任何比例下都进行得充分、完全的。要形成我们肉眼可见的反应(如沉淀、凝集现象等),就涉及到最适比例问题。以沉淀反应为例:在一排试管中加入等量的Ab,然后依次向各管加入递增量的可溶性Ag

8、,根据形成的沉淀物及抗原抗体比例可见:(图)①:Ab过剩区,又称前带,此时,上清液中Ab过剩,大多出现的是可溶性抗原抗体复合物。②:Ag过剩区,又称后带,此时,上清液中Ag过剩,大多出现的也是可溶性抗原抗体复合物。③:是Ag、Ab合适比例范围,又称等价带。在这一带中,Ag、Ab反应充分,形成的沉淀物快而多;其中有一管Ag、Ab反应速度最快、形成的沉淀物最多,上清液中几乎没有游离的Ag或Ab存在。这时

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